Exp01 果蝇形态观察

1、欢迎光临遗传学实验 1遗传学实验日常要求1. 课堂纪律2. 课前预习,课间做好实验记录,课后详细总结实验结果并按时提交实验报告3. 严格遵守实验室的各种规章制度4. 维持实验台面、地面卫生,实验仪器有序、整洁 2实验一、果蝇的性状、生活史观察及饲养（3学时） 3一、实验目的1. 了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点；2. 区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征；3. 掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术4二、实验材料、用具及试剂材料: 果蝇18， 2(vg) ， 6(w、sn3、m)， 10(e)，14(vg、e)， 22(w) 用具: 双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白

2、瓷板、毛笔、乙醚、酒精棉球试剂: 乙醚、琼脂粉、白糖、丙酸、酵母粉、玉米粉等.学生参与配置玉米粉培养基 5三、实验内容1. 果蝇的生活史黑腹果蝇(Drosophila melanogaster）6果蝇作实验材料的优点生活史短繁殖率高突变类型多CS少, 唾腺CS7果蝇的生活周期长短与温度有关. 30以上果蝇不育和死亡,低温则使它的生活周期延长,生活力降低;最适温度为20-2525时，从卵到成虫约10d，成虫约活15d 8完全变态半天交尾, 1d产卵1-2d孵化3d,两次蜕皮2-3d化蛹4d羽化9卵:长0.5 mm,椭圆形,腹面稍扁平,被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝,使卵附着在食物(或瓶壁)上

3、10幼虫: 三龄幼虫长4-5mm,头部稍尖,黑斑为口器;其后有一对透明的唾液腺;一对生殖腺位于躯体后半部上方,精巢较大,似明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作为鉴别.幼虫活动力强而贪食,爬行时留下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好. 11蛹: 化蛹前从培养基爬出,附着在瓶壁上,形成一梭形的蛹.起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,即将羽化成虫: 刚羽化的虫体较长,翅膀尚未展开,体表未完全几丁质化,呈半透明的乳白色;透过腹部体壁,可见黑色的消化系统,渐变为短粗圆形,双翅展开,体色加深;如WT初为浅灰色,后呈灰褐色122. 形态构造头部: 一对复眼,一对触角胸部: 三对足,一对翅和

4、一对平衡棒腹部: 背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身被体毛和刚毛13 3. 成虫雌雄的鉴别雌果蝇雄果蝇体形较大体形较小腹部椭圆,末端稍尖腹部末端钝圆腹部背面5条黑纹腹部背面3条黑纹,前两条细,后一条宽且延续至腹面腹部腹面6个腹片(刚毛围成一圈)4个腹片无性梳第一对跗节基部第一节有性梳外生殖器比较简单外生殖器较复杂,刚羽化的幼蝇可观察到生殖弧、肛口板等144. 果蝇常见的几种突变类型突变性状基因符号性状特征所在CS白眼w复眼白色X檀黑体e体呈乌木色,黑亮IIIR黑体b体呈深色IIL残翅vg翅退化,部分残留IIR小翅焦刚毛msn翅较短刚毛卷曲XX15四、实验步骤1. 果蝇的饲养(

5、1) 培养基的配制 果蝇成虫的食物内需有醣类，而蛹期果蝇则可只依赖酵母即可生育。玉米培养基成份(100ml)水80 ml玉米粉8.25 g白糖6.2 g琼脂0.62 g丙酸0.5 ml酵母少许16配制方法水分成两份：一份用于溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,待两份分别溶解煮好后再合到一起煮沸,灭火后加入丙酸;充分搅拌后再分装培养瓶待培养基冷却后,在其表面洒稍许酵母粉,插一灭菌的滤纸片作为幼虫化蛹的干燥场所17注：分装前将饲养瓶、棉塞、吸水纸及其它用具和器皿高压蒸气灭菌(15磅,20min).分装时若瓶口较小,用大漏斗将饲料倒入,勿使饲料粘附瓶壁.若无干酵母粉,可于饲料分装后滴几滴酵母液于饲料表面.

6、待饲料冷却后,用酒精棉球或吸水纸将瓶壁上的水汽擦净,塞上棉塞 18培养瓶的灭菌准备灭菌的培养瓶准备灭菌的棉塞准备灭菌的滤纸包好的棉塞灭菌锅121 20min19配制好的培养基202）果蝇继代培养果蝇转移到新配制的培养基中繁殖.转移时要注意,不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出.一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶,使其飞入新培养瓶内准备转移果蝇的亲本及培养基21幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上222. 果蝇性状的观察1) 果蝇的麻醉处理准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶，并配以脱脂棉塞去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中23滴数滴乙醚

7、于麻醉瓶棉塞内,迅速将两瓶塞住,约30s,麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉状态.注意不能麻醉过度麻醉后的果蝇放在白瓷板上,用毛笔移动检查,根据需要用肉眼、放大镜或解剖镜观察.不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死,防止品系间混杂24果蝇的麻醉滴加乙醚的方法果蝇的麻醉剂25转入麻醉瓶中观察结果26死亡果蝇的标志272）果蝇识别 体形大小腹纹53腹部末端尖圆性梳无有28果蝇识别 29腹部体节数目：雌果蝇6节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。 30腹部体节数目：雄果蝇4节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。 31果蝇识别 32果蝇性状观察3、眼睛的颜色2、翅的大小1、身体的颜色33vgw、mew34w m35w m36 w、m、sn37bee+38观察后的结果填入下表类型特征 黑身白眼小翅白眼残翅红眼黑檀体w m sn体色黑色(b)正常(+)正常(+)黑色(e)正常眼色白色(w)白色(w)红色(+)红色(+)白色翅形正常(+)小翅(m)残翅(vg)正常(+)小翅刚毛正常(+)正常(+)正常(+)正常(+)卷毛39注意事项配制培养基时要将玉米粉及琼脂分开煮转移果蝇时要防止果蝇飞走麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度,需要用活体时,不可以麻醉过度使果蝇致死