维药白刺总黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究

1、维药白刺总黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究【摘要】目的考察唐古特白刺果总黄酮对衰老模型小鼠氧化才能的影响。方法用D-半乳糖制备衰老模型小鼠，以酶标法测定小鼠血清和肝组织中DA,SD,GSH-PX指标的变化。结果白刺果中总黄酮能显著降低衰老小鼠血清和肝组织DA程度，同时可进步SD和GSH-PX活力程度。结论唐古特白刺果总黄酮具有抗氧化作用。【关键词】唐古特白刺总黄酮抗氧化ResearhntheAnti-xidativeEffetfTtalFlavnidsfUighurediinesNitrariatangutrunBbr.inSubauteAgingdelieAbstrat：bjetiv

2、eTstudytheeffetfanti-xidativeinsubauteagingdelieithttalflavnidsfUighurediinesNitrariatangutrunBbr.ethdsTheagedieereinduedbyipD(+)-galatsefr8eeks.Deterinedalndialdehyde(DA)superxidedisutase(SD),glutathineperxidase(GSH-PX)intheiesseruandHeparithdel680irplateSpetrphteter.ResultsTtalflavnidsfUighurediin

3、esNitrariatangutrunBbr.ntnlyhadsignifiantinhibitineffetnDAlevelsbutalsinreasedtheratifSDativityandGSH-PXativity.nlusinThettalflavnidsfUighurediinesNitrariatangutrunBbr.hasgdanti-xidativeeffet.Keyrds：NitrariatangutruBbr;Ttalflavnids;Anti-xidativeeffetD-半乳糖致小鼠亚急性衰老模型因其衰老变化明显,模型稳定,在抗衰老研究中被广泛应用1。一般认为,D-

4、半乳糖引起的代谢紊乱使机体过氧化反响增强是其致老化反响的重要因素。唐古特白刺NitrariatangutrunBbr.为中国特有种,是蒺藜科典型的旱生荒漠植物，具有耐干旱，耐盐碱，能适应高温低寒的特点。唐古特白刺资源丰富，分布广泛，是新疆防风固沙的优良野生树种2。唐古特白刺的果实在新疆作为维吾尔民间药物入药，具有健脾胃、调经活血、降压等作用。常用于治疗消化不良、月经不调和高血压、头晕等疾病，临床证明疗效确切，无毒副作用。近年来对唐古特白刺的研究报导很多，但对其药理作用的研究甚少，仅见有关白刺果实有降血脂和抗氧化作用的报道3，果实中化学成分繁多复杂，到底哪种成分起效尚不清楚，因此，为了深化研究民

5、族药，并为维药白刺的充分开发利用提供科学根据，本文研究了维药白刺总黄酮对衰老模型小鼠氧化才能的影响。现报道如下。1材料与方法1.1药品1.1.1白刺果总黄酮提取与制备唐古特白刺果石河子大学生命科学学院阎平教授鉴定为NitrariatangutrunBbr.，采自新疆北部地区。样品采集后自然晾干，机械粉碎，过20目筛后备用。称取白刺果粗粉适量，置圆低烧瓶中，以料液比17参加80的乙醇，水浴加热回流2h，重复提取4次，合并提取液并浓缩至浸膏。用碱溶解酸沉淀法制得白刺总黄酮样品。1.1.2阳性对照药维生素E胶丸上海中洋海洋生物工程股份，批号050902。1.1.3亚急性衰老模型药D+半乳糖国药集团化

6、学试剂，批号F20220711。1.2试剂与仪器SD试剂盒南京建成生物工程研究所，批号20221108；DA试剂盒南京建成生物工程研究所，批号20221221；GSH-PX试剂盒南京建成生物工程研究所，批号20221111；蛋白定量测试盒南京建成生物工程研究所,批号20221220；del680酶标仪美国BI-RAD公司；TDL-5000低温冷冻离心机上海安亭科学仪器厂；PufferHubbard超低温冰箱美国HARRIS公司；X-80A旋涡混合器上海精科实验；电热恒温水浴锅北京泰克仪器；TN型托盘式扭力天平上海第二天平仪器厂。1.3动物分组与处理安康昆明小鼠96只(石河子大学实验动物中心提供

7、)，体重(255)g，雌()雄()各半，喂养普通饲料适应1周后,空腹称重，眼底静脉采血测血清DA后随机分为6组，每组16只，各半。组间体重、血清DA程度无明显差异。6组分别是正常组腹腔注射(ip)生理盐水+灌胃(ig)蒸馏水，衰老模型组ipD+半乳糖200g/kg+ig蒸馏水，低剂量组ipD+半乳糖200g/kg+ig白刺果总黄酮50g/kg，中剂量组ipD+半乳糖200g/kg+ig白刺果总黄酮100g/kg，高剂量组ipD+半乳糖200g/kg+ig白刺果总黄酮200g/kg，阳性对照组ipD+半乳糖200g/kg+ig维生素E100g/kg。1.4标本采集本实验用昆明小鼠ipD+半乳糖造

8、成衰老模型，ipD+半乳糖后6周，模型组小鼠血清DA高于正常对照组，但无统计学意义；当时间增至8周后，血清DA明显高于正常，两组数据比拟有显著意义，故实验时间定为8周。8周后取材，所有小鼠于取材前1d停饲料，并禁食12h，乙醚麻醉，眼底静脉取血，颈椎脱离处死，取肝脏，制备血清及肝匀浆，储存于-20备用。1.5统计方法采用SPSS12.0软件处理，实验数据以s表示，多组间比拟用方差分析，两均数比拟用t检验。2结果2.1白刺果总黄酮对实验性衰老模型小鼠肝系数的影响小鼠造模8周后,各给药组与模型和正常对照组的肝系数虽有差异，但各组之间比拟,经统计学分析无显著性差异(P0.05)。见表1。表1白刺果总

9、黄酮对实验性衰老模型小鼠肝系数的影响略2.2白刺果总黄酮对衰老模型小鼠血清和肝组织脂质过氧化物DA含量的影响DA常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。血清DA测定数据显示：模型组血清脂质过氧化物DA含量比正常饲料组有明显增高(P0.001)，阳性对照组及高、中剂量组均能明显降低血清DA程度，与模型组比拟均有显著性意义(P0.01)；低剂量组血清DA与模型组比拟有所降低，但无统计学意义P0.05；肝组织DA测定数据显示：模型组肝组织DA含量造模后比正常饲料组DA有极明显增高(P0.001)，而阳性对照组、高剂量组、中、低剂量组均能明显降低肝组织DA程度，与模型组比拟均有显

10、著意义(P0.01)。见表2。表2白刺果提取物对实验性高脂模型大鼠DA的影响略2.3白刺果总黄酮对衰老模型小鼠血清和肝组织超氧化物歧化酶SD含量的影响SD对机体的氧化和抗氧化平衡起着至关重要的作用。血清SD测定数据显示,模型组血清SD含量造模后比正常饲料组有极明显降低(P0.001),阳性对照组及高、中剂量组均能明显升高血清SD活力程度，与模型组比拟均有显著统计学意义(P0.05)，低剂量组血清SD与模型组比拟有所升高，但无统计学意义P0.05；肝组织SD测定数据显示：模型组肝组织SD含量造模后比正常饲料组SD有明显增高(P0.001),而阳性对照组、高剂量组均能明显升高肝组织SD活力程度,与

11、模型组比拟均有显著意义(P0.01)，中剂量组虽没有阳性对照组作用强，但与模型组比拟具有显著性差异(P0.05)，低剂量组作用与模型组比拟，虽有所升高，但无统计学意义。见表3。表3白刺果总黄酮对衰老模型小鼠SD活力的影响略2.4白刺果总黄酮对衰老模型小鼠血清和肝组织GSH-PX含量的影响GSH-PX是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化复原型谷胱甘肽GSH对过氧化氢的复原反响，可以起到保护细胞膜构造和功能完好的作用。血清GSH-PX测定数据显示:模型组血清GSH-PX含量造模后比正常饲料组有极明显降低(P0.001)，阳性对照组及高剂量组均能明显升高血清GSH-PX程度

12、，与模型组比拟均有显著意义(P0.001)，中剂量组虽没有阳性对照组作用强，但与模型组比拟具有显著性差异(P0.05)，低剂量组作用与模型组比拟，虽有所升高，但无统计学意义；肝组织GSH-PX测定数据显示:模型组肝组织GSH-PX含量造模后比正常饲料组GSH-PX有明显降低(P0.001)，而阳性对照组、高、中剂量组均能明显升高肝组织GSH-PX活力程度，与模型组比拟均有极显著意义(P0.001)，低剂量组作用与模型组比拟，虽有所升高，但无统计学意义。见表4。表4白刺果总黄酮对衰老模型小鼠GSH-PX的影响略3讨论在模型形成期间，可以逐渐观察到模型组小鼠的皮毛，活动状态与正常组及其它组的区别。

13、模型组小鼠的皮毛颜色暗淡，有掉毛的倾向，并且活动缓慢。一般认为给小鼠连续注射D-半乳糖后,因其代谢产物半乳糖醇不能进一步代谢而堆积在细胞内,导致细胞肿胀,致使小鼠组织细胞出现衰老时的退行性改变以及功能的改变410，同时D-半乳糖在体内氧化产生的大量自由基超过机体的去除才能,引发脂质过氧化的链式反响,并且过氧化脂质(LP)的分解终产物(如DA)可与DNA,RNA蛋白质、磷脂等物质结合,损伤细胞膜,引起神经系统的功能障碍12，13，18，19。通过检测小鼠血清、肝组织DA，SD，GSH-PX的程度，得出模型组的DA程度显著升高，SD，GSH-PX活力程度显著降低。实验证明,高剂量组与阳性对照组比拟

14、，小鼠中血清、肝组织DA降低、SD，GSH-PX的活力升高；中剂量组与阳性对照差异有的不是很显著，提示在进一步的研究时剂量可以以中剂量组的数据做参考进展相关数据换算11，1417。低剂量组虽没有阳性对照组作用显著，但与模型组比拟也可以降低小鼠中血清、肝组织DA、升高小鼠中血清、肝组织SD，GSH-PX的活力。因此推测白刺总黄酮可能通过进步机体内SD和GSH-PX活性,增强其对自由基的去除才能,抑制脂质过氧化，降低体内DA的生成,从而起到保护机体组织的作用，同时到达延缓衰老的目的20。【参考文献】1邵义祥.医学实验动物学教程.南京：东南大学出版社，2022：224.2严奉伟,罗祖友,吴季勤，等.

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