微生物基础知识培训讲稿

1、关于微生物基础知识培训课件第一张，PPT共三十九页，创作于2022年6月主要内容微生物知识概况 什么是微生物 微生物与人类的关系 微生物的特点洁净车间微生物污染途径常见消毒和灭菌第二张，PPT共三十九页，创作于2022年6月一、什么是微生物？一切肉眼看不见或看不清的微小生物 的总称。它们都是一些体积微小，结构简单的低等生物。 广泛存在于自然界的一群体形微小（直径小于0.1mm）、结构简单、肉眼看不见，必须藉助光学或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的生物。第三张，PPT共三十九页，创作于2022年6月2、微生物的种类 按其结构、化学组成及分化程度可分为:原核类: 仅有原始核质，无核仁或核膜，

2、细胞器很不完善。（细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、衣原体、立克次氏体）真核类: 细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。（酵母、霉菌）非细胞类: 体积微小，能通过除菌过滤器。（病毒）第四张，PPT共三十九页，创作于2022年6月3、微生物的形态第五张，PPT共三十九页，创作于2022年6月第六张，PPT共三十九页，创作于2022年6月葡萄球菌链球菌棒状杆菌大肠杆菌弧状菌酵母菌(芽痕)微生物的显微状态第七张，PPT共三十九页，创作于2022年6月微生物的显微状态铜绿假单孢菌 沙门菌生孢梭菌枯草芽孢杆菌 第八张，PPT共三十九页，创作于2022年6月个体小,面积大：小于0.1mm。肉

3、眼不可见。分布广,种类多（10万多种） ：自然界中到处都有，如水、空气、土壤等, 土壤中的数量最多。代谢强，转化快：发酵乳糖的细菌在1小时内可分解其自重100010000倍的乳糖；产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比食用公牛强10万倍。生长旺，繁殖快：微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代。适应性强，易变异（耐药性产生的原因）二、微生物的特点第九张，PPT共三十九页，创作于2022年6月三、微生物与人类的关系微生物无处不在，我们无时不生活在“微生物的海洋”中。第十张，PPT共三十九页，创作于2022年6月微生物在哪里?第十一张，PPT共三十九页，创作于2022年6月第十二张，P

4、PT共三十九页，创作于2022年6月土壤数亿/g细菌，土壤中的细菌总重量估计为：10034 10 12 吨；每张纸币带细菌：900万人体体表及体内存在大量的微生物： 皮肤表面：平均10万个细菌/平方厘米；口腔：细菌种类超过500种；肠道：微生物总量达100万亿，粪便干重的1/3是细菌，每克粪便的细菌总数为：1000亿个；每个喷嚏的飞沫含4500-150000个细菌，重感冒患者为8500万。第十三张，PPT共三十九页，创作于2022年6月时时刻刻与微生物“共舞” 是 祸？是 福？微生物既是人类的敌人，也是人类的朋友！第十四张，PPT共三十九页，创作于2022年6月微生物是人类的朋友！ 微生物是自

5、然界物质循环的关键环节；体内的正常菌群是人及动物健康的基本保证； 帮助消化、提供必需的营养物质、组成生理屏障微生物可以为我们提供很多有用的物质； 醋、酶、各种药物、疫苗、面包、奶酪、啤酒、酱油等基因工程为代表的现代生物技术；第十五张，PPT共三十九页，创作于2022年6月微生物是人类的敌人！鼠疫天花艾滋病狂犬病埃博拉病毒第十六张，PPT共三十九页，创作于2022年6月二、微生物与人类的关系可以说，微生物与人类关系的重要性，怎么强调都不过分.微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来巨大利益的同时也带来“残忍”的破坏。它给人类带来的利益不仅是享受，而且实际上涉及到人类的生存。第十七张，PPT

6、共三十九页，创作于2022年6月 四、微生物生长的影响因素1营养物：水源、碳源、氮源等2pH值：各种微生物都有其最适宜的pH值，大多数细菌最适pH为6.87.4，但一般有较大的容忍度，在49也可存活和生长，少数细菌能在极端pH值范围内生长。真菌适于pH值36的微酸性环境，但在210也可生长。3温度：微生物适于生长繁殖要有适宜的温度，当超过其最低或最高可耐受的温度时，即停止生长或死亡。一般细菌最适温度为3040，真菌为2030。 第十八张，PPT共三十九页，创作于2022年6月4氧气：大多数细菌和所有霉菌都是需氧菌（在有氧环境中才能生长），少数细菌是厌氧菌（在无氧环境中才能生长），有些细菌和酵母

7、菌是兼性需氧厌氧的，在有氧或无氧环境中都能生长繁殖。5渗透压：微生物细胞膜和所有生物膜一样是一种半透膜，可让水自由通过，对溶质则有选择性。由于细胞壁的保护，微生物能存活在低渗透压的水中。而在高渗溶液（如高浓度的盐溶液或糖溶液、40%甘油）中，细胞会脱水并停止生长繁殖。但也有一些专性耐高盐细菌只有在高盐（1015%）条件下才生长。第十九张，PPT共三十九页，创作于2022年6月二、洁净车间微生物污染途径空气水人员器具物料第二十张，PPT共三十九页，创作于2022年6月空气中的微生物空气：空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带者。充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产品的媒介而成

8、为重要的污染源的。洁净室缓冲间的作用：必须保持缓冲间门的关闭，不得同时开启；控制空气对流，减少外界脏空气中的微粒、灰尘进入车间。（GMP要求空气洁净级别不同的洁净室（区）之间的静压差应大于5帕，洁净室（区）与室外大气的静压差应大于10帕，并应有指示压差的装置。必要时，相同洁净级别的不同功能区域（操作间）之间也应当保持适当的压差梯度。 ）第二十一张，PPT共三十九页，创作于2022年6月水生产过程中水是一个重要的环节，用作产品的清洗。消化道产品清洗一般为纯化水；血管类产品清洗一般为注射用水；GMP要求应当制定工艺用水的管理文件，工艺用水的储罐和输送管道应当满足产品要求，并定期清洗、消毒。药典明确

9、规定了纯化水、注射用水的微生物限度。第二十二张，PPT共三十九页，创作于2022年6月人人是洁净室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分钟向周围排放1000个以上的含菌粒子，女性为750个以上。穿无菌服时，静止时的发菌量为10300个/min，一般活动时发菌量为1501000个/min，行走时发菌量为9002500个/min。咳嗽一次发菌量为70700个/min，喷嚏一次为4500-150000个/min。所以在洁净室中，人的数量和活动应有特别严格的限制。人员污染的途径和方式人员卫生人员进出洁净区的程序人员在洁净区的活动人员卫生人的头发和皮肤：人的头皮上有140万个/cm2，两手上约有4

10、40万个，1g指甲污垢有38亿个，1g粪便可达101000亿个。可以说微生物是无处不在，无处不有。第二十三张，PPT共三十九页，创作于2022年6月人员进出洁净区的程序更鞋、更衣、洗手、手消毒要严格遵守制度规定；手的消毒方式严格遵守规程进行，必要时应进行消毒方式的验证；洁净服和一般工作服、洁净鞋和一般工作鞋应分开、分柜存放，以免交叉污染；不能不更换洁净服就进入洁净区；有效地遮盖内衣、毛发。对于无菌工作服还能包盖脚部，并能阻留人体脱 落物。 不同洁净度级别洁净区使用的洁净工作服分别/并定期 在不同级别洁净环境中清洗、干燥和整理并区别使用。第二十四张，PPT共三十九页，创作于2022年6月人员在洁

11、净区的活动不携带个人物品进入洁净区，不在生产区吃东西；工作时，不要快速走动，操作的动作要轻，幅度要小，讲话要少，尽量避免不必要的走动，尽量不要频繁进出洁净室。具体依据洁净室卫生管理制度第二十五张，PPT共三十九页，创作于2022年6月器具洁净室器具定期消毒（75%酒精）。具体依据洁净室卫生管理制度物料原材料、包装材料入厂必须符合标准；物料进出洁净区需按照洁净室卫生管理制度无需清洗的双层密封包装物料无需清洗的单层密封包装且不可脱去包装的物料需清洗的物料不能接触紫外灯关照的特殊物料第二十六张，PPT共三十九页，创作于2022年6月三消毒与灭菌消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事药品生产和

12、检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害患者安全。第二十七张，PPT共三十九页，创作于2022年6月1概念无菌：不存在活的生物。防止细菌进入人体或其他物品的操作技术，称为无菌操作。灭菌：使达到无菌状态的方法（GMP指南）。 用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌（GB）。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。消毒：用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化（GB）。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖，常用抑菌

13、剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学试剂在高浓度时为消毒剂，低浓度时为防腐剂。第二十八张，PPT共三十九页，创作于2022年6月2常用消毒剂 消毒剂 乙醇： 70%75%水溶液 供洗手用消毒异丙醇： 75%水溶液 用于皮肤、器具等消毒甲醛： 37%40%甲醛液89ml，再加入45g高锰酸钾 每m3熏蒸量，密闭1224h。刺激性强戊二醛：2%水溶液，用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒。刺激性较轻。新洁尔灭（苯扎溴铵）：0.1%水溶液 用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效。抗菌谱较窄。第二十九张，PPT

14、共三十九页，创作于2022年6月杜灭芬（消毒宁）：0.05%0.1%水溶液 用于皮肤、器具等消毒过氧乙酸： 0.2%0.5%水溶液，用于器具等消毒 新配0.5%水溶液，抗菌谱广，可用于皮肤消毒，杀灭某些病毒，但性质不稳定 1g/m3熏蒸乳酸： 0.331mol/L熏蒸或与等量苯酚合用熏蒸 11.5ml/m3 ， 喷雾，用于空气消毒，有强杀菌作用熏蒸，密闭12h以上麝香草酚：5%麝香草酚溶于50%乙醇， 喷洒墙面、地面，杀霉菌第三十张，PPT共三十九页，创作于2022年6月3常用灭菌法1）干热灭菌法常见的有火焰烧灼、干烤和红外线灭菌等。火焰烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器

15、具的灭菌。干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，180200需0.51h。除热原则需25030min，或20045min，1802h。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。第三十一张，PPT共三十九页，创作于2022年6月2）湿热灭菌法通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是100，一般处理3060min可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢

16、。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用6080加热（或煮沸）1h，然后置2025保存24h（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。高压蒸汽灭菌（热压灭菌法）：超过一个大气压时，水的沸点高于100，反之亦然。 第三十二张，PPT共三十九页，创作于2022年6月 高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为：115.5 30min 121.5 20min 注意事项：a.

17、必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。b. 注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度一般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定一固定的灭菌曲线（象冻干曲线一样）。第三十三张，PPT共三十九页，创作于2022年6月c. 定期检查灭菌器内温度的准确性。3）化学灭菌法利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。但由于环氧乙烷易燃易爆且有毒（有致变异性），用

18、于药品方面极有限，多用于医疗器械、塑料制品等灭菌。（不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解。）4）滤过除菌法利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。第三十四张，PPT共三十九页，创作于2022年6月 过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22m。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般不应超过8小时。5）辐射灭菌法辐射有两种类型：一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波；一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、射线。第三十五张，PPT共三十九页，创作于2022年6月紫外线：紫外光波长在136390nm之间，其中260nm左右能破坏核酸，杀菌作用最强。 另外，空气中的氧受紫外线照射后，可微量转变为臭氧共同起杀菌作用。紫外线消毒的效果与光源