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文档简介
1、睡莲花总酚酸超声提取工艺研究【摘要】目的以药材中总酚酸含量为评价指标,优选维药睡莲花超声提取最正确工艺。方法单因素实验考察乙醇浓度、料液比、超声提取时间、超声次数,超声功率对药材中总酚酸含量的影响,并通过正交实验确定最正确提取条件。结果乙醇浓度、料液比、超声提取时间对总酚酸的提取率有显著影响。结论超声提取维药睡莲花中酚酸类化合物的最正确提取工艺条件为:乙醇浓度70%,料液比120,超声功率30,提取时间40in。【关键词】睡莲花酚酸超声提取正交试验StudynUltrasniExtratinTehnlgiesfNyphaeaandidaPresl.Abstrat:bjetiveTptiizet
2、heultrasniextratinnditinfrNyphaeaandidaPresl.ethdsptiizednditins(ethanlnentratin,ateria/extratinslutinrati,ultrasnitieandextratinties)eredeterinedbythesinglefatrsexperientsandrthgnaltest.ResultsTherearkablefatrstaffettheextratinfttalphenliaidsinNyphaeaandidaPresl.ereethanlnentratin,ateria/extratinsl
3、utinrati,ultrasnitie.nlusinTheptiuextratinnditinsfttalphenliaidsere:70%ethanl,ateria/extratinslutinrati120,ultrasnitie40inutes.Keyrds:NyphaeaandidaPresl.;Phenliaid;Ultrasniextratin;rthgnaltest维药睡莲花为睡莲科(Nyphaeeae)植物雪白睡莲NyphaeaandidaPresl.的枯燥花,具有清热解毒、镇静安神的作用。主要用于小儿急、慢惊风,热症引起的头痛、热感、咳嗽。在维吾尔民间用药历史悠久,是维吾尔
4、医常用的单方或复方抗病毒药中的主要成分1,2。国外学者研究发现其同属植物含有多种酚类化合物,我们通过化学成分研究发现维药睡莲花中也含有酚类化合物。酚类化合物的生物活性广泛而温和,具有抗菌、消炎、抑制血小板聚集、抗凝及血栓形成等作用3,4。本研究采用单因素实验及正交实验法考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数对维药睡莲花总酚酸超声提取效果的影响,以确定其最正确超声提取条件,从而为合理开发利用维药睡莲花资源提供科学根据。1材料与仪器1.1材料与试剂睡莲花产自新疆阿克苏,提取前先进展晒干、粉碎处理;没食子酸对照品由中国药品生物制品鉴定所提供,批号:110831202202,其余试剂均为分析纯。1
5、.2仪器紫外分光光度仪SHADZU,UV-2501P,电子天平Sartrliux,超声提取仪天津奥特赛恩斯仪器,AS10200BDT,真空枯燥仪(上海精宏仪器设备,DZF-6050型)。2方法与结果2.1标准曲线制备精细称取没食子酸对照品7.5g置于50l容量瓶中,参加甲醇溶解稀释至刻度作为储藏液,汲取3.5l于25l容量瓶中,参加甲醇稀释至刻度配制成21.0g/l对照品溶液。精细汲取对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5l,分别置于25l容量瓶中,参加甲醇5.0l,0.3%十二烷基硫酸钠2.0l,0.6%三氯化铁与0.9%铁氰化钾混合液10.91.0l,暗处放置5in,再参加0.1
6、l/LHl稀释至刻度,暗处放置20in,显色剂作空白在最大吸收波长720n处测定吸收度,其回归方程为:Y=0.3556X+0.1446,相关系数r=0.9994。2.2超声条件下不同因素对酚酸类化合物提取率的影响2.2.1乙醇浓度对酚酸类化合物提取率的影响在5g药材粉末中,分别参加15倍量50%,60%,70%,80%,90%乙醇超声提取,超声温度为20,超声时间为15in,超声频率为40Hz,超声功率为30超声处理,考察乙醇浓度对睡莲花总酚酸提取率的影响。结果见图1。由图1可以看出,随着乙醇浓度的升高,维药睡莲花总酚酸提取率呈上升趋势,乙醇浓度在70时提取率最高。但当浓度进一步增加,提取率反
7、而降低。2.2.2乙醇用量对酚酸化合物提取率的影响在5g药材粉末中,分别参加70%乙醇40,60,80,100,120l超声提取,超声温度为20,超声时间为15in,超声频率为40Hz,超声功率为30超声处理,考察乙醇用量对酚酸类化合物提取率的影响。结果见图2。由图2可以看出维药睡莲花中总酚酸的提取率随溶剂用量的增加而增加,乙醇用量在20倍时提取率最高。但当溶剂用量进一步增加,提取率反而降低。2.2.3提取时间对酚酸类化合物提取率的影响在5g药材粉末中,分别参加15倍量70乙醇,超声温度为20,超声频率为40Hz,超声功率为30分别超声处理10,20,30,40,50in,考察超声提取时间对睡
8、莲花总酚酸提取率的影响。结果见图3。从维药睡莲花总酚酸的提取效果图3看,随着提取时间从10in到60in,提取开场阶段,总酚酸的提取率随提取时间的延长而增加较快,在40in时达最高;提取后期提取速度逐渐减慢,提取率呈下降趋势。2.2.4超声功率对酚酸类化合物提取率的影响在5g药材粉末中,参加15倍量70%乙醇,超声温度为20,超声时间为30in,超声频率为40Hz,超声功率分别为30,90,150,210,270超声处理,考察超声功率对睡莲花酚酸类化合物提取率的影响。结果见图4。图4说明,在频率、时间和温度固定时,超声波的电功率对维药睡莲花总酚酸的提取率影响不大。2.2.5提取次数对酚酸类化合
9、物提取率的影响在5g药材粉末中,分别参加15倍量70乙醇,超声温度为20,超声时间为30in,超声频率为40Hz,超声功率为30,超声处理1,2,3,4,5次,考察提取次数对睡莲花总酚酸提取率的影响。结果见图5。由图5可以看出维药睡莲花中总酚酸的提取率随提取次数的增加而呈上升趋势。2.2.6正交实验通过以上单因素,进展正交实验,以获取最正确提取工艺。见表1。表1超声提取维药睡莲花总酚酸L9(34)正交实验因素程度略通过正交实验可以得到维药睡莲花中总酚酸的最正确提取工艺为A2B33,即:20倍量的70乙醇超声提取40in。2.3不同提取方法提取率比拟2.3.1水煎煮法称取药材粉末5g,参加20倍
10、水煎煮两次,40in/次,提取液合并、浓缩、枯燥。按“2.1项下的方法测定药材中总酚酸含量为0.21%。2.3.2回流提取法称取药材粉末5g,参加20倍70%乙醇回流提取两次,40in/次,提取液合并、浓缩、枯燥。按“2.1项下的方法测定药材中总酚酸含量为0.44%。2.3.3超声提取法称取药材粉末5g,参加20倍70%乙醇超声提取2次,40in/次,提取液合并、浓缩、枯燥。按“2.1项下的方法测定药材中总酚酸含量为1.0%。3讨论本文研究了维药睡莲花总酚酸的提取工艺,单因素及正交实验结果显示乙醇浓度、乙醇用量及超声提取时间对超声提取酚酸类化合物有显著影响,同时确定了提取条件的最正确组合应为A2B33,即乙醇浓度为70,料液比为20倍,超声功率30,提取时间为40in。与传统的提取方法比拟,超声提取法明显优于水煎煮法和回流提取法。水煎煮法和回流提取法需要加热、费时,而超声提取法操作简单、省时,提取效率高。【参考文献】1刘勇民.维吾
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