细胞病理学基本检验技术

1、细胞病理学基本检验技术细胞病理学基本检验技术第1页第一节 细胞病理学 基础检验技术细胞病理学基本检验技术第2页定义细胞病理学 采集、制备、染色观察 是经过检验细胞形态学特点，进行 健康和疾病筛查、诊疗和研究 体检、普查 诊疗、判别诊疗细胞病理学基本检验技术第3页本节内容提要一.标本采集二.标本涂片三.涂片固定四.涂片染色五.观察涂片六.细胞学诊疗七.细胞学诊疗质量确保细胞病理学基本检验技术第4页一.标本采集标准：准确选择采集部位标本保持新鲜，尽快制片尽可能防止血液及粘液等混入方法简便，操作轻柔，降低病人痛苦，预防并发症和肿瘤扩散采集、制备、染色、观察标准：准确选择采集部位标本保持新鲜，尽快制片

2、尽可能防止血液及粘液等混入（洁净）方法简便，操作轻柔，降低病人痛苦，预防并发症和肿瘤扩散细胞病理学基本检验技术第5页标本分类.脱落细胞 ：自然脱落细胞 非自然脱落细胞2.细针穿刺细胞细胞病理学基本检验技术第6页自然脱落细胞标本：咳出：痰 排出：尿、便 挤出：乳头分泌物等。非自然脱落细胞标本：如气管，宫颈，皮肤，乳头等。穿刺细胞标本：浆膜腔积液肿瘤穿刺采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第7页自然脱落细胞标本特点包含痰，尿液，乳头分泌物，精液等。轻易获取标本能屡次采样成份复杂，含各种细胞成份，炎细胞，微生物及外源污染物细胞成份保留较差采集、制备、染色、观察包含痰，尿液，乳头分泌物，精液等

3、。轻易获取标本能屡次采样成份复杂，含各种细胞成份，炎细胞，微生物及外源污染物细胞成份保留较差细胞病理学基本检验技术第8页霉菌污染0926963,男,78岁, 临床诊疗:肺炎 送检标本:痰细胞病理学基本检验技术第9页污染虫卵0926965,男,79岁, 临床诊疗:肺癌? 送检标本：痰细胞病理学基本检验技术第10页痰细胞退变细胞病理学基本检验技术第11页非自然脱落细胞标本特点 包含气管刷，宫颈刷，支气管灌洗液及皮肤乳头等刮取标本。直接从病变器官表面采样纤维镜能从器官内部获取标本能获取上皮下病变标本细胞成份保留良好，但诊疗标准不一样于脱落细胞采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第12页宫颈细

4、胞学取材与制片方法刮取法刷取法细胞病理学基本检验技术第13页气管刷细胞涂片细胞病理学基本检验技术第14页肺泡灌洗液0925790,男,66岁CT：左肺上叶尖后段不整形实变影气管镜：未见病变细胞学诊疗：腺癌细胞病理学基本检验技术第15页穿刺细胞标本1体腔抽出液：胸腹水、心包液、脑脊液等；2细针穿刺吸收液：如体表肿物穿刺液，超声定位下肝、胰腺和肾脏穿刺液；借助内窥镜技术穿刺等。理论上适合用于任何器官简便，费用低，创伤小良好穿刺和制片技术可取得最正确结果需外科病理学知识有一定不足，如采样不足等采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第16页二.涂片制备标准标本新鲜玻片清洁操作轻柔涂片牢靠涂片数量

5、采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第17页方法直接涂片：将新鲜标本直接涂在载玻片上 .推片法 .涂抹法 .压拉涂片法间接涂片：将各种液体标本进行浓缩处理后再涂片 .离心法 .液基薄层法 .细胞块法细胞病理学基本检验技术第18页.推片法采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第19页.涂抹法采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第20页.压拉涂片法采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第21页.离心法和细胞离心法离心法：大量液体标本，如浆膜腔积液、尿液、灌洗液。细胞离心法：将细胞直接离心到载玻片上，制成单层细胞涂片。适合用于少许液体、中等量细胞。采集、制备、染色、观察细

6、胞病理学基本检验技术第22页.液基细胞学（1）薄层法ThinPrep采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第23页宫颈病变好发部位细胞病理学基本检验技术第24页细胞病理学基本检验技术第25页细胞病理学基本检验技术第26页细胞病理学基本检验技术第27页(2) SurePath Prep 法 标本乙醇固定 悬浮于密度梯度溶液中涡旋法使聚集细胞团和粘液分开 密度梯度离心法使细胞成份和非上皮细胞成份分开 细胞在重力作用下沉淀到载玻片上细胞病理学基本检验技术第28页传统细胞学情况传统制备方法（普通是涂抹法） 标本质量不一致细胞分布不均杂质成份妨碍视线一个样本需涂多张涂片细胞病理学基本检验技术第29

7、页标准化细胞学技术液基细胞学卓越标本质量清楚背景标准化标本制备过程均匀细胞分布一个样本只需一张含有代表性标本剩下样本可进行其它各种测试（免疫组化等）提升细胞学测试敏感性和特异性细胞病理学基本检验技术第30页痰低分化鳞癌 改进背景 细胞清楚度TCTTCT细胞病理学基本检验技术第31页6.细胞块法将标本中细胞聚集成团，形成与传统组织块类似细胞块，制成细胞切片，然后能够进行特殊染色。细胞病理学基本检验技术第32页三.涂片固定目标：是保持细胞自然状态，预防细胞自溶和细菌造成腐败。固定液能凝固和沉淀细胞内蛋白质和破坏细胞内溶酶体酶，保持细胞自然状态，使细胞结构清楚，易于着色。所以标本愈新鲜，固定愈及时，

8、细胞结构愈清楚，染色效果愈好。采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第33页固定不及时腺癌细胞固定及时腺癌细胞细胞病理学基本检验技术第34页固定方法： 湿固定：是使细胞原生质脱水、蛋白质凝固到达固定目标。可引发细胞皱缩。 干燥固定：是经过空气蒸发方式到达固定目标。细胞有增大趋势。细胞病理学基本检验技术第35页固定方法比较A未固定细胞B平铺在玻片上C湿固定D干固定细胞病理学基本检验技术第36页固定液种类： 乙醚乙醇固定液；氯仿乙醇固定液；95%乙醇固定液。固定时间：1530分钟细胞病理学基本检验技术第37页四.常见染色方法巴氏染色法（papanicolaou stain）（湿固定）苏木素-

9、伊红（H-E）染色法瑞氏-吉姆萨染色法采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第38页巴氏染色法（Pap)细胞病理学基本检验技术第39页巴氏染色来历 Papanicolaou(帕帕尼古拉乌) 子宫颈抹片这个检验是Papanicolaou 医生在公元1928 年在美国首度提出。因为简便易行，而且能够早期发觉子宫颈癌或不正常细胞方便早期治疗，而后风靡全世界，成为一个妇科不可或缺主要例行检验。为了纪念这位医师贡献，在国际上这个检验就叫作Pap test 或者Pap smear。 细胞病理学基本检验技术第40页Papanicolaou 医生1883年生于希腊。他父亲也是一位医生，曾经当过 Kymi

10、 市市长。他21岁时完成医学教育，到德国留学研究生殖细胞学，1913年移民美国。 他最初研究天竺鼠阴道分泌物内细胞周期改变。以后用相同方法去研究妇女阴道内分泌物及细胞改变。听说全世界第一个Pap test 就是用在他妻子身上。 细胞病理学基本检验技术第41页于1925年在纽约以一群自愿妇女做研究时，在一个妇女子宫颈抹片上偶然发觉一些癌细胞。这个发觉使他异常振奋，而后经一系列研究后，于1928 年发表一个学术演讲：阴道内细胞能够用来早期诊疗妇女癌症。 细胞病理学基本检验技术第42页Papanicolaou 医生因心脏病病逝于1962年。 他妻子Mary，也是一位伟大、自我牺牲妇人，他是Papan

11、icolaou 医生第一个 Pap test 妇人，他曾经作过他细胞检验员，帮忙训练许多技术人员。以后20年时间，Papanicolaou医生基础上以他作定时阴道细胞检验，而后完成一本妇人周期性阴道细胞改变著作。每次Papanicolaou 医生介绍他妻子时，总是说：这是我太太也是我受害者。 总之，一个成功男人背后，经常会有一个伟大无私女人。 细胞病理学基本检验技术第43页细胞病理学基本检验技术第44页苏木素-伊红（H-E）染色法细胞病理学基本检验技术第45页瑞氏-吉姆萨染色法细胞病理学基本检验技术第46页其它特殊染色组织细胞化学染色：过碘酸Schiff染色（PAS糖原）、三色染色、普鲁氏蓝染

12、色等。免疫细胞染色：识别细胞类型、起源等。识别微生物染色： Gram染色，PAS，六胺银，Ziehl-Neelsen染色（抗酸染色）等。细胞病理学基本检验技术第47页胸水细胞块免疫组化染色BerEp4染色细胞病理学基本检验技术第48页五.显微镜观察方法视野采集、制备、染色、观察细胞病理学基本检验技术第49页用10倍物镜进行浏览细胞病理学基本检验技术第50页发觉异常细胞后，用40倍观察细胞病理学基本检验技术第51页六.细胞病理学诊疗细胞形态学判断基础标准1细胞数量2细胞排列结构特征3细胞核特征4细胞质特征5背景6人为原因细胞病理学基本检验技术第52页.细胞数量 多增殖指数增加（肿瘤或增生）少荒凉

13、，注意观察细胞病理学基本检验技术第53页0926164,女，65岁，临床诊疗：胸水既往史：骨髓瘤细胞量多细胞病理学基本检验技术第54页宫颈TCT涂片细胞量正常 细胞量少细胞病理学基本检验技术第55页2.细胞结构特征 涂片中细胞经常缺乏结构特征 正常细胞有极向、平铺 恶性细胞重合：异常粘附性、异常聚集性。细胞病理学基本检验技术第56页宫颈涂片中正常宫颈柱上皮细胞病理学基本检验技术第57页腺癌C0924833，女，65岁，腹水 细胞病理学基本检验技术第58页3.细胞核特征 良性大小一致，核质细，核膜光。恶性大小不一，核质粗，核膜厚。细胞病理学基本检验技术第59页 宫颈TCT涂片正常 高度病变细胞病

14、理学基本检验技术第60页胸水涂片 腺癌细胞病理学基本检验技术第61页4.细胞质特征核质比增加 嗜碱、粘液、空泡、吞噬细胞病理学基本检验技术第62页胞浆内粘液细胞病理学基本检验技术第63页5.涂片背景： 包含细胞成份和非细胞成份（血、粘液、炎症、微生物） 恶性坏死背景（肿瘤素质）6.人为原因：制片不佳；污染。细胞病理学基本检验技术第64页七 细胞学诊疗质量确保标本采集：尘细胞，宫颈细胞数量制片过程：离心，固定，染色阅片诊疗：全方面，结合临床及组织学不停理论学习复查会诊（IQAM,EQAM.P274）定时随访：金标准细胞病理学基本检验技术第65页痰中尘细胞细胞病理学基本检验技术第66页宫颈涂片上柱

15、上皮细胞病理学基本检验技术第67页细胞病理学诊疗优势安全简便，痛苦少，不良反应少，可重复取材，设备要求低，费用廉。快速准确，检出率约60%，适合大规模防癌普查及高危人群随访观察，可发觉早期癌和原位癌。检验范围大细胞病理学基本检验技术第68页病例举例1年3月检验病理号04767女，51岁临床诊疗：宫颈炎宫颈TCT：细胞量5000，诊疗:ASC-H细胞病理学基本检验技术第69页年8月活检病理号19604 ：ABCDE共5点活检病理诊疗：慢性宫颈炎细胞病理学基本检验技术第70页年9月复查细胞号0926170诊疗:上皮内高度病变细胞病理学基本检验技术第71页年9月手术病理诊疗：宫颈CIN 累及腺体细胞

16、病理学基本检验技术第72页病例举例2TCT诊疗：高度病变病理活检：慢性宫颈炎六个月后：病理活检：宫颈鳞状细胞癌细胞病理学基本检验技术第73页脱落细胞学诊疗不足有一定误诊率：细针吸收可有10%假阴性，痰细胞学检验可有20%假阴性，少数出现假阳性。详细部位难确定肿瘤分型困难非肿瘤性疾病诊疗研究少细胞学诊疗为二级诊疗，需经活检组织学证实后，方可进行治疗。细胞病理学基本检验技术第74页细胞病理学诊疗是一个复杂过程，千万不能过分强调最终止论主要性。 why ?细胞病理学基本检验技术第75页细胞病理学检验影响原因多！患者信息：年纪和性别；激素水平；临床表现；其它检验结果病变部位：局部解剖；影像学特征细胞特点：细胞量；类型；分布和粘附性；背景其它信息：电镜；免疫组化；流式细胞仪；细胞遗传学细胞病理学基本检验技术第76页没有标准迄今为止，没有一项细胞形态学特征或一套规范细胞形态学标准能准确可靠地判别良恶性细胞。细胞病理学基本检验技术第77页细胞病理学基本检验技术