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1、活性氧（ROS）介导的乙醛氧化损伤心肌致细胞凋亡的初步研究上海中山医院心血管病研究所 研究背景 酒精性心肌病迅速蔓延在西方世界，酒精是继发性非缺血性扩张型心肌病主要原因1) 据统计，成年人2/3不同程度饮酒2) 酒精性心肌病,1/3以上与酒精有关在中国，随着生活水平不断提高，酒精性代谢相关疾病增多乙醇？乙醛？损伤心肌乙醇，乙醛诱导心肌细胞比较实验1）养化应激水平2）细胞凋亡水平转基因过表达ADH或ALDH比较实验1）过表达ADH加剧心肌收缩功能障碍2）过表达ALDH减少心肌细胞凋亡乙醇 乙醛 乙酸ADHALDH乙醛通过何种途径损伤心肌？心肌肥大、凋亡致功能改变遗传因素病毒感染DNA突变免疫改变

2、T细胞杀伤心肌炎ROSROS途经导致静脉内皮细胞凋亡J. Biol. Chem. 279:11244. 心肌细胞胞浆特异表达 -MHC, 200 体外心肌细胞培养乙醛诱导心肌细胞Bcl-2蛋白表达0 2 6 12 18 24 48 h不同条件诱导下ROS的变化乙醛诱导细胞培液上清SOD活性hSD鼠心力衰竭模型中ALDH2明显下调染色体定位：12q24.2 蛋白定位：线粒体内膜醛脱氢酶 2 aldehyde dehydrogenase(ALDH2)线粒体功能ROS产生主要场所引起氧化损伤ATP能量来源抗氧化酶系凋亡和抗凋亡蛋白 Bcl家族线粒体功能心肌组织ALDH2活性测定结果RT-PCRWes

3、tern Blot在SD鼠心衰模型中DDDDReal time-PCR54KD36KDALDH2/pAd-HM4质粒构建CAG poly API-SceII-CeuIKpnIApaIXhoI (2)SalI (2)BamHI(2)XbaI (2)SalI (2)PstI (2)?SphIHindIII (3)total 35.3kb1720bp730bp30.3kbAmprXbaI（ 2)ALDH21954bpEcoRPstBglBglHind0.8kb2.5kbAdeno virus genomeE3(-)(28133-30818)Adeno virus genomeE1(-)(342-3523)ITRITRPacIPacI技术路线细胞培液上清DCM组转ALDH2*1形 DNA ladder态 TUNEL基 ALDH2因 ADH-1蛋 Bcl-2家族白 caspase移植心脏组织 SD鼠心肌细胞 活 ALDH2性 ROS对照组对照组乙醛干预转ALDH2*2未转未干预通 MAP

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