2012年度院所生物安全培训课件

1、 实验室生物平安2021.09实验室生物平安实验室生物平安实验室生物平安Laboratory Biosafety 是指以实验室为科研和工作场所时，防止危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施。 当实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过使用个体防护装置一级屏障、实验室的设计建造二级屏障和严格遵从标准化的工作及操作程序三级屏障等综合措施: 1确保实验室工作人员不受实验对象侵染。 2确保周围环境不受其污染。实验室感染相关事故1941年美国发生74例实验室相关的吸入性布氏杆菌感染事故1974年丹麦某医院临床生化检验室的工作人员肝炎发病率比普通人群高出

2、7倍1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍1992年美国报告职业性感染艾滋病者13例，其中1例是实验室工作者，12例是临床医护人员实验室感染相关事故1993年国内某医院报告225名医院工作人员医生、护士、食堂工作人员、检验人员HBV检测结果，其中检验人员感染率最高，阳性率为81.2%1998年，我国某高校学生在用大白鼠进行试验时，有两名学生被大白鼠咬伤，还有一些学生在解剖的过程中，未按照要求戴手套操作，结果在29名实验人员中，有9人感染了流行性出血热2004年新加坡、中国台湾、中国CDC SARS实验室感染2021年东北农业大学28名师生因动物实验使用了未经

3、检疫的山羊感染了布鲁氏菌病 中国医务人员职业感染途径 (n=1891) 调查时间：年年最常报告的感染：乙型肝炎、肺结核、伤寒、委内瑞拉马脑炎、布鲁氏菌病我国HIV职业暴露事故统计19972005年 中国输血杂志 , 2006，19(6) : 449-451. 实验室生物平安事故原因工作人员主观麻痹大意；未遵守实验室生物平安规那么和程序；生物平安实验室存在平安隐患；实验室感染可控性可控性：只要重视，加强实验室平安监督管理，认真对待是可以防止此类事故发生的。例如： 领导重视：生物平安意识、态度和责任； 科学管理：条例、完善、预案、可行性； 可靠的硬件：设施过硬、设备齐全、验证； 高素质的队伍：坚持

4、、培养、提高； 标准和程序：不断完善的技术和SOP。生物平安管理体系相关法规、条例组织机构 管理体系相关法规、条例法规 国务院?病原微生物实验室生物平安管理条例?中华人民共和国传染病防治法中华人民共和国国境卫生检疫法突发公共卫生事件应急条例医疗废物管理条例相关法规、条例技术标准国家标准?实验室生物平安通用要求?GB19489-2004 ?生物平安实验室建筑技术标准?GB50346 -2004 ?微生物和生物医学实验室生物平安通用准那么?WS 233-2002 ?人间传染的病原微生物名录?WS 2006?可感染人类的高致病性病原微生物菌毒种或样本运输管理规定? WS 第45号 2006生物恐怖的

5、法规文件2001年，?刑法?第三次修订案，把生物恐怖活动定为犯罪。2002年，国务院令第365号，?中华人民共和国生物两用品及相关设备和技术出口管制条例?及其管制清单。2006年，管制清单进行了修订和补充，增加了SARS病毒等13种病菌毒种等。2005年12月商务部、海关总署公布了?两用物项和技术进出口许可证管理方法?。组织机构 我国实验室生物平安管理实行法人责任制及实验室主任和工程负责人责任制设立生物平安领导小组和生物平安委员会负责生物平安工作实验室设置专职或兼职平安监督员 最高管理者法定代表人生物平安委员会实验室主任(生物平安负责人)工程负责人生 物 安 全 防 护 实 验 室生物平安领导

6、小组相关职能科室相关业务科室后勤保障部门平安监督员平安管理体系组织结构框图 实验室生物平安防护三项技术措施实验室的操作规程和技术 标准的操作规程 特殊的操作规程 平安设备一级屏障 特殊设计和建筑要求二级屏障生物平安分级BSLs生物平安实验室硬件:实验室设计建造 实验设备的配置 个人防护装备软件:管理规程 标准化的操作程序确保: 工作人员 周围环境 实验因子实验室生物平安防护 三项技术措施样品隔离技术机械、气幕，防止传染因子进入环境接触人体定向流技术三级负压系统，防止传染因子扩散消毒灭菌技术物理、化学，灭活传染因子实验室生物平安一级屏障primary barrier是操作者和被操作对象之间的隔离

7、，也称一级隔离如生物平安柜 分3级-I、II、III级个体防护装备 口罩、面具、眼镜，防护衣、帽、裤、鞋、靴、袜、手套、正压服等个人防护装备PPE一级屏障 一级屏障 生物平安柜BSC-Biosafety cabinet一级屏障-生物平安柜生物平安柜的作用防护实验对象、人员和环境。处理感染性物质特别是高浓度感染性物质。进行有可能产生气溶胶的操作时，如离心，研磨，剧烈震动，超声破碎，翻开内外压力不同的感染性物质的容器，动物鼻腔接种等。一级屏障-生物平安柜生物平安柜与超净台生物平安柜提供了对样品、人、环境的保护超净台仅提供对样品的保护生物平安柜类别级别工作口平均进风速m/s循环风比例（%）排风比例（

8、%）连接方式I级0.360100密闭连接II级A10.380.517030可排到房间或设置局部排风罩A20.517030可排到房间或设置局部排风罩B10.513070密闭连接B20.510100密闭连接III级/0100密闭连接级生物平安柜 保护工作人员和环境 不保护试样。级生物平安柜级生物平安柜一级屏障-生物平安柜平安柜操作要点将实验器具放置于平安柜中，紫外灭菌15分钟后，通风10-15分钟。检测气流是否正常。标准有序进行试验，防止手臂频繁进出平安柜紊乱气流，同时防止实验材料挡住风口。实验完毕清洁平安柜内部。紫外灭菌15分钟，通风10-15分钟后关闭平安柜。一级屏障-生物平安柜本卷须知HEP

9、A滤器不能截留化学气体，同时，挥发的化学品可能损坏HEPA滤器。滤器风扇以及平安柜内插座可能产生电火花，如果在平安柜中操作易燃易挥发液体易引起火灾或者爆炸。实验室生物平安二级屏障(secondary barrier) 生物平安实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离 实验室的设施结构通风空调系统 给水排水电气和控制系统二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流 一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区 实验室生物平安水平分级根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物平安防护水平biosafety level，BSL分为4级，I级防护水平最低，IV级防护水平

10、最高以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物平安防护水平以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物平安防护水平一级生物平安实验室 适用于实验对象对健康成年人无致病作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小。一级生物平安实验室 举例：大肠杆菌耐格里原虫感染性犬肝炎病毒枯草芽孢杆菌一级生物平安实验室减少含微生物液体喷溅和气溶胶的形成每日清洁实验台面，及时清理实验废弃物标准的微生物学实验操作限制实验区人员走动严禁在实验区饮食防止使用口吸式移液实验服/乳胶手套/防护面具、眼镜。二级生物平安实验室 适用于实验对象对人和环境具有 中等潜在危

11、害。二级生物平安实验室乙肝病毒 沙门氏菌 HIV血清学检测麻疹病毒举例：* 有有效的疫苗或治疗措施二级生物平安实验室人员实行限制进入制度，实验中限制出入；应设可关闭的带锁的门，可使用感应式、肘开式或脚踏式等非手动操作水龙头；洗眼装置；配备消毒灭菌的设备；实验室工作区域外应有存放备用物品的条件。* 特别要警惕污染的针头或者锐器三级生物平安实验室 适用于实验对象是通过呼吸途径使人感染导致严重的甚至是致死性疾病的致病微生物或其毒素。三级生物平安实验室例如： 结核杆菌 炭疽杆菌 鼠疫杆菌通常已有预防疫苗四级生物平安实验室 适用于实验对象是对人具有高度危险性，表现出通过气溶胶途径传播或传播途径不明的目前

12、尚无有效的疫苗和治疗措施的致病微生物及其毒素。四级生物平安实验室有暴露于通过气溶胶传播或者传播途径不明确的致病菌潜在可能感染可能致死 例如：黄病毒埃博拉病毒SNV中欧蜱传脑炎病毒病原微生物实验室生物平安传染病的巨大危害生物武器的潜在威胁。生物恐怖的现实威胁。生物技术的非和平应用微生物学实验室的平安隐患。 病原微生物实验室生物平安的核心是防扩散和防感染！十八大实验室生物平安重点病原微生物危害等级(GB 19489)GB 19489-2004?实验室 生物平安通用要求? 2004年10月1日实施分级依据微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施分级3.1 危害等级I

13、 低个体危害，低群体危害3.2 危害等级 (中等个体危害，有限群体危害)3.3 危害等级 III 高个体危害，低群体危害3.4 危害等级 (高个体危害，高群体危害)微生物危害等级(国务院条例)?病原微生物实验室生物平安管理条例? 分级依据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度将病原微生物分为四类一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物 微生物危害等级(国务院条例)三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成

14、严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 各种病原微生物的危害等级分类参见卫生部?人间传染的病原微生物名录?2006.01病原微生物的危险等级分布种类危害等级危害等级 危害等级危害等级病毒185114219细菌311901真菌635寄生虫1232临床检验相关病原生物危险等级分布病原微生物运输运输包装要求运输包装要求A类：对健康人或动物造成永久性残疾或致命疾病的感染性物质。包装：三层包装，并附上完整的危险品申报单，培训运输人员。运输包装要求 B类：不

15、符合列入A类标准的感染性物质。运输专用名称为B类生物物质代替 诊断标本或临床标本。 包装：三层包装,不需要危险品申报单。运输工具高致病性样本应不少于两人护送实验室操作规程和技术标准 实验室的运行标准仪器设备的使用标准针对感染性材料的试验操作标准个人防护用品的使用标准实验室消毒规程危险废弃物的处置规程锋利器具的平安操作规程实验紧急情况处理规程 生物危害风险评估评估目的生物危害评估是对微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估目的是为确定生物平安防护等级、实验标准操作规程提供重要依据 在危害评估的根底上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备防止工作人员发生感染，同时防止过分防护在群众中

16、造成恐慌 生物危害风险评估评估内容生物因子的种类的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料来源传染性、致病性传播途径在环境中的稳定性感染剂量、浓度动物实验数据预防和治疗实验室生物平安管理制度准入制度设施设备监测、检测和维护制度健康医疗监督制度生物平安工作自查制度实验室资料档案管理制度生物平安管理及实验室人员培训制度其它必须的制度 生物平安工作自查制度 实验室生物平安工作应定期进行自查形式可以参考质量管理体系有关不符合检测的控制、内审、内务管理等程序必须列出与生物平安相关的各个环节逐一检查 实验室人员培训制度 保证所有实验室 工作人员必需接受培训并经考核合格，持证上岗新工作人员经过培训通过考核

17、后，还须与有资格的工作人员一同工作1个月，才能获得上岗证所有人员每年至少要接受一次新的培训对培训内容、考核方式也应作出规定建立并保存人员培训和考核记录档案 洗手实验室工作人员在实际或可能接触了血液、体液或者其他污染材料后，即使戴了手套也应立即洗手。摘除手套后、使用卫生间前后、离开实验室前、进食应洗手。实验室生物平安本卷须知六步洗手法标准搓揉20s6步法第一步，五指并拢、掌心搓掌心；第二步，手指交错、掌心搓掌背； 第三步，手指交错、掌心搓掌心；第四步，两手互握，互相摩擦；第五步，拇指在掌心旋转； 第六步，指尖摩擦掌心。 防护口罩外科手术口罩：不是呼吸防护保护他人口罩的存放及效期(通风、枯燥，2-

18、3年)呼吸防护口罩强调适配性，儿童不宜使用前请仔细阅读说明书佩戴、摘除流程掌握更换时机，不得随意丢弃提示：N95防护不含油气溶胶，过滤效果最低可达95 N95是所有认证等级中最低、最根本的一个等级。离心管破碎，应立即停机，并于30分钟后翻开。戴乳胶手套后，再套上厚橡皮手套，用镊子取出离心碎片。全部碎管和套管等应放入无腐蚀性的消毒液中浸泡24小时，或采用高压灭菌。离心机转头应采用无腐蚀性的消毒液擦拭干净，擦布也需经高压灭菌。离心机废弃物处理应置于耐用、 防漏容器内，密封运出实验室。 普通废弃物和含感染性物质的废弃物分别处理。 含感染性物质的针头等锋利废弃物应放于巩固的容器中，统一处理。非一次性利

19、器放入厚壁容器中最好高温高压蒸气消毒处理。废弃物处理禁止将针头丢弃在塑料袋或普通垃圾箱中蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌器是所有灭菌器中历史最久、应用最广、价格最廉价的灭菌设备之一；适用于耐高温、耐高湿物品的灭菌，也适合处理微生物污染的废水和固体废物。物品装放时，难于灭菌的物品放在上层，较易灭菌的物品放在下层；金属物品放下层，织物包放上层，上下左右相互间均应间隔一定距离以利蒸汽置换空气。不正确的习惯废针头和碎玻璃不经包装丢弃自己或他人被刺、被感染。混合医学垃圾和生活垃圾感染和污染环境。向下水道排放未经彻底消毒的有害病菌或高浓度的有害化学品致癌物、致畸物、重金属盐溶液等。意外暴露的处置 预防措施处理原那么意外情况处理事故的评估和改进 刺伤、切割伤或擦伤