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文档简介
1、实验3减数分裂制片技术和显微镜观察一、实验目的学习花粉母细胞涂抹制片技术,观察细胞减数分裂时期染色体变化规律及特征并绘图。观察花蕾或花药长度与减数分裂时期的关系。二、实验原理减数分裂是生物在性母细胞成熟形成配子过程中发生的一种特殊有丝分裂,它包括连续两次的细胞分裂阶段,最终分裂为染色体数目减半的四个子细胞,从而发育为雌性或雄性配子(n)。由于植物花药取材容易,操作和鉴定比较方便,故一般都取用花粉母细胞作为减数分裂制片材料。在生物发育的适宜时期取样、固定、涂片等程序,便可在显微镜下观察到减数分裂过程中染色体的行为变化。三、实验材料lily百合(2n=24)四、实验步骤(一)取材lily百合:通常
2、花蕾长度18mm(花药长度8mm)时为花粉母细胞分裂始期。花蕾约40mm(花药长17mm)时为减数分裂终期。釆集18-40mm不同长度的花蕾,固定,保存。(二)制片从小花中取出花药13枚置于载玻片滴一滴醋酸洋红溶液用镊子按压花药去尽肉眼可见残渣盼染色2分钟睁盖上盖玻片盼在低倍镜下寻找花粉母细胞睁高倍镜下观察各分裂相细胞染色体的特征及变化规律.选择典型分裂相的临时片12张盼在酒精灯火焰上缓缓烘干(不能沸腾!盼将玻片放入液氮罐,在液氮表面冷冻1分钟取出玻片放在白纸上,手按盖玻片一边,用刀片从另一边将盖玻片揭开置于白纸上(有材料的一面朝上)少滴一滴中性树胶在载玻片上的材料处原位盖上盖玻片树胶凝固后镜
3、检。1.取花药1枚(截)置载玻片中央2.加1滴染色液用镊子按压,并镊除可见残渣4.放上盖玻片(三)显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的花粉母细胞,然后依次转换到高倍镜观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。区分4类细胞:形状较大,圆形,核大,着色较浅的是花粉母细胞。形状较小、着色较深的是花药壁体细胞。形状居中略呈扇形的是四分体的小孢子。形状较大,内部透明并有明显外壳的是成熟的花粉粒。五、实验作业1.在实验课中完成制作细胞减数分裂各时期图象片子1-2张2.花发育进度与染色体的动态变化关系花蕾(花药)序号12345花蕾(花药)长度1.11.31.41.51.6细胞主要处在的分裂时期细线期偶线期粗线期双线期3.绘制细胞学片子的分裂相,并作染色体行为特征的描述。1.1前期I细线期图象和行为特征一核内染色体呈细长线状,互相缠绕,难以辨别成双的染色体。色单体之间发此期可清楚1.5.前期双线期图象和行为特征各对同源染色体开始分开,由于在粗线期非姐妹染生了交换,因而同源染色体在一定区段间出现交叉,地观察到交叉现象。1.4前期I粗线期图象和行为特征:配对后的染色体逐渐缩短变粗,含有两条姐妹样一个二价体包含了四条染色单体,故又称为期间各同源染色体的非姐妹染色单体间可能发1.3偶线期图象和行为特征同源染色体相互纵向靠拢配对,称为联会。这对同源染色体,称为二价体。偶线期所
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