二恶英快速检测方案

1、一个秀丽而布满生气的美国中部小城，以其鸟类丰富多彩二著名，当留鸟蜂拥而至的季节，人们会长途报社来这里观光。一天， 随着一批携带有杀虫剂居民的到来，很快发生很多不祥变化。奇特的疾病攻击成群小鸡，牛羊也病倒和死亡；孩子在玩耍时突然倒下，几小时后已经死 去。能看到几只战栗小鸟吗，也已不能飞行。小路两旁只有焦黄枯萎的植物， 小溪也失去生命，由于水中已经没有鱼类。人从梦中醒来，再也听不到鸟儿 唱歌，原野、森林和沼泽都是一片安静，一切声音都没有了，只有可怕的寂 静蕾切尔卡逊安静的春天到底是什么使这个布满生气的小城几乎沦为了一座“死城”？长久性有机污染物POPSPOPS 是指具有高毒性，进入环境后难以降解，

2、可生物积存，能通过空气、和迁徙物种进展长距离越境迁移并沉积到远离其他排放地点的地区，随后在那里的陆地生态系统和水域生态系统中积存起来，对当地环境和生物体造成严峻负面影响的自然或人工合成的有机物。人类总是在不断的追求更好更舒适的生活，而当这种欲望无休止地膨胀时，执着变成了偏执。成千上万的原本在自然界中并不存在的各种合成化学品于是被万能的人类制造出来，被大量生产、应用，并最终进如环境。人类享受着各种合成化学品为自己带来的便利和多彩，却遗忘了它们对环境所产生的严峻危害性。这些物质成了生态环境的重大包袱，同时也给人类本身带来了始料未及的灾难。长久性有机污染物POPS就是人类制造出的化学合成物，也有可能

3、成为人类最大的“敌人”。为了提高农业产量、杀灭害虫，以滴滴涕为代表的有机氯农药呗数以千万吨地喷洒在宽阔的大地上；为了满足对电力输配的要求，近百万吨多氯联苯被生产出来并广泛用于变压器、电容器等电力设备中；而快速进展的垃圾燃烧、造纸、冶金等工业则成为二噁英大量生成和释放的温床。随着环境科学争辩的深入，以前被誉为“灵丹妙药”的滴滴涕呗称为“不行思议的化学品的多氯联苯PCBs对于人体安康地巨大危害才渐渐的显露出来。2022 年 11 月 11 日是个重要的日子，应为我国在当日已正式签署和批准了斯德哥尔摩公约国际社会的关于长久性有机污染物的斯德哥尔摩公约的开展，标志着人类向这些“自己制造出的死神”正式宣

4、战。二噁英类污染物检测目前二噁英类物质的检测方法有哪些？一、化学仪器分析方法HRGC/HRMS GC/HRMS HRGC/LRMS二、生物检测方法RROD 细胞培育法荧光素酶方法 EIA 酶免疫方法DELFIA 荧光免疫法HRGC/HRMS 方法1、承受 HRGC/HRMS区分率在 1 万以上的高区分率色谱/质谱联用仪的超痕量分析方法。优点：灵敏度高；能同时监测多个离子。是被多个兴旺国家认可的二噁英标准检测方法，如美国的EPA。缺点：分析操作简单；样品前处理过程格外简单，分析样品所需时间周期长通常为10- 20d；设备投入本钱和运行费用昂扬；购置同位素标准物质等消耗品费用高；检测费用昂扬。一个

5、样品需 900-1800 美元；监测只能在专业试验室进展，而建筑二噁英检测试验室需要几百万美元。GC/HRMS 和 HRGC/LRMS使用 GC/HRMS 法可保证灵敏度，简化前处理步骤，缩短检测时间，降低检测本钱， 但仍需在专业试验室中完成；使用 HRGC/LRMS 法可极大降低在检测仪器方面的投入，但当每克样品中二恶英浓度低于 pg/g 水寻常，却无法获得牢靠的检测结果。因而 HRGC/LRMS 法仅适用于检测二恶英浓度较高的污染源样品和污染较重的土壤样品。例如，美国的EPA8280 方法可检测出土壤、底泥、飞灰和燃油等样品中含 48 个氯的二恶英化合物， 不能用于检测如食品等二恶英含量较

6、低的样品。生物检测方法目前建立的生物学检测方法均是通过对 Ah 受体活化程度的测定来间接表达二恶英的 TEQ。EROD 细胞培育法二噁英与 Ah 受体结合活化后，被 Ah 受体核转位因子ARNT转移到细胞核内， 活化的核内基因是特异性 DNA 片段即二噁英相应因子DRE。启动发挥毒性的基因并增加其转录，从而激活 EROD 酶的活性。所以通过测定 EROD 酶的活性，可以了解二噁英激活 Ah 受体的力量，进而获得测试样品中二噁英的TEQ。荧光素酶方法该方法是将萤火虫荧光素酶作为报告基因结合到把握转录的DRE 上，制备成质粒载体并转染 H4llE 大白鼠肝癌细胞系含 Ah 受体转导途径的各个部件。

7、以此构成的CALUX 荧光素酶诱导活性与二噁英的毒性系数相对应，最终测定的结果也是TEQ毒性当量EIA 酶免疫方法该方法是依据鼠克隆抗体 DD3 与二噁英结合的特点而建立的竞争仰制酶免疫方法。使用酶竞争协作物HRP和样品中二噁英共同竞争有限的 DD3 抗体的特异性结合位点，以一系列不同浓度的 2,3,7,8-TCDD 为标准物质，做出 2,3,7,8-TCDD 标样与对应样品的剂量效应曲线，样品中二噁英毒性强度以计算出的TCDD 毒性等价浓度间接表示。最终通过测定 DD3 与 HRP 螯合物的荧光强度来猎取二噁英的 TEQ。螯合物的荧光强度与二噁英的 TEQ 成反比。DELFIA 荧光免疫法D

8、ELFIADissociation-enhancement Lanthanide Fluoro Immunoassay法属于时间区分荧光免疫分析法。该方法利用生物基因技术选择出适宜的抗原键合铕离子与样品中二恶英竞争单克隆抗体，待免疫反响完全后参加荧光增加液,使铕离子从抗原中解离下来，进入增加液,形成胶束，高效地发出荧光。螯合物最终用时间区分荧光法分析，其荧光强度与二恶英的 TEQ 成反比。检测方法前处理过程检测时间品1490018000.018003750010000.1700d检测本钱灵敏度试验条件本钱美元/单位样pg/g(1000 美元)HRGC/HRMS法简单有些GC/HRMS 法简化有

9、些GC/LRMS 法简化比较EROD 法简化340050012003100012001200比较萤光素酶法3简化2009000.025200比较EIA 法简化格外DELFIA 法简化22009000.5200 24h10150.135通过上图我们可以看出各种二噁英检测方法有优略性，我国现用的二噁英检测方法是 HRGC/HRMS 方法。图中我们可以看出这种检测方法精准度可以到达0.01pg/g中国国家标准为 0.5pg/g属于最优越的检测方法。但是相对的这种方法的前处理期也是最长且最简单的，投入的资金也相对很多。而且HRGC/HRMS 方法必需在专业试验室中进展检测，所以前期必需要建设专业试验室

10、，可谓相当消耗财力。而我们的荧光素酶法检测二噁英可谓相当便利、快捷也同样符合国家标准的0.5pg/g 的精准度。多层二噁英分级检测体系第一级：低本钱、快速的生物检测方法可应用于一般食品检测和环境监测，如定量筛选大规模的污染源样品等。其次级：一般的化学仪器分析包括 GC/HRMS 法和 HRGC/LRMS 法，可应用于对筛选出的样品进展较高精度的检测。第三级：建立几个符合国际标准的二恶英专业检测试验室，完成对二恶英检测的权威认证分析工作。CALUX 二恶英快速检测方案XDS 试验室拥有一项基因工程改造细胞株专利美国专利号 5,854,010，该试验室利用基因工程技术吧原核细胞的细胞色素P450

11、基因CYP1A1和萤火虫的荧光素酶合成基因，重组到大鼠肝癌细胞系H4IIE染色体上，二噁英类污染物在细胞浆内形成的多环芳烃受体AhR 复合物进入细胞核内以后，特异性的与染色体上的二噁英应答区域结合，从而激活细胞色素P450 基因和荧光合成酶基因合成荧光素。检测时只需将样品的提取液加到该细胞培育系培育液中，通过测定细胞溶解液的荧光强度来确定样品中二噁英总毒性当量。该方法与传统的 HRGC/HRMS 方法相比具有前处理过程简便、测定本钱低、周期短、需要样本量少等优点。适用于环境样品、食品、生物样品中二恶英含量的检测。CALUX荧光素酶法是经美国 EPA 批准的一种检测方法，可用于检测土壤、水、烟气、污染物、饲料、添加剂以及生物组织中的二噁英、呋喃和多氯联苯。该方法 2022 年已被美国指定为国家标准方法。得到美国FDA 和 EPA、欧盟、智利、日本等国的广泛承受，是大量筛查二噁英类污染物的型快速检测技术。CALUX 的特点已获得美国、欧盟、日本等国官方认可，方法成熟牢靠；高灵敏度1ppt方法简便易用，设备相对简便； 前处理简洁，