实时荧光定量PCR仪性能指标对比

1、实时荧光定量PCR仪比较表StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评光源石英卤钨灯石英卤钨灯卤钨灯蓝光LED6个LED96个蓝光LEDLED1个LED氙灯石英卤灯激发范围宽广，光强强，非常适合做多通道的定量PCR,LED的激发光源是冷光源相对寿命相对也要长，但是光强度低，光的激发范围受限制。通道4通道5通道5通道其中一个为校正染料通道3通道52/

2、4通道2、4、5、6不等3块检测滤光片/6块检测滤光片五通道多通道是定量PCR发展的趋势，现在多通道的荧光定量实验也越来越多，主流的是4通道检测器PMTPMT冷CCD光电二极管6个光电二极管1/2个PMTPMT光电二极管CCD采用CCD检测器具有边缘效应，做实验时必须加入校正染料。采用PMT检测器，能将光信号放大，检测灵敏度高，无需校正染料。发光二极管的检测灵敏度低。滤光系统4个激发光滤镜与4个发射光滤镜5个激发光滤镜与5个发射光滤镜5个激发光滤镜与5个发射光滤镜带有3个/4个检测端滤光片6个激发与6个检测激发端没有滤光片发射端有2/4个滤光片检测滤镜片3个/6个发射光检测滤光镜5个激发端滤光

3、片和6个检测断滤光片激发光与发射光的双重过滤能排除杂光的影响，从而提高检测的准确性样品通量96孔96孔96孔48孔/96孔96孔96孔36/72/1003296/38496孔通量高，可以采用多孔板方便操作。激发光范围350-750nm350-750nm400-660nm470nm450-730nm470nm365nm/470nm/530nm/585nm/625nm/680nm/460nm470nm430-630nmStratagene扩大了光谱的检测范围，从350-750nm。目前市场上所有的荧光探针都适用。优化的4通道能减少各通道光谱之间的相互干扰。StratageneMx3000PStra

4、tageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评检测光范围350-700nm350-700nm500-660nm450-730nm460nm/510nm/555nm/610nm/660nm530,640,705nm/530,560,610,640,670,705nm430-630nmStratagene检测光范围最宽广可用荧光染料ALEXAFluor350(350nm-440nm),FAM/S

5、YBRGreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX/JOE/VIC(535nm-555nm),Cy3(545nm-568nm),TAMRA(556nm-580nm),ROXTM/TexasRed(585nm-610nm),andCy5(635nm-665nm).ALEXAFluor350(350nm-440nm),FAM/SYBRGreenI(492nm-516nm),TET(517nm-538nm),HEX/JOE/VIC(535nm-555nm),Cy3(545nm-568nm),TAMRA(556nm-580nm),ROX/TexasRed(585nm

6、-610nm),andCy5(635nm-665nm).FAM/SYBRGreenI,VIC/JOE,NED/TAMRA/CY,和ROXCY5FAM/SYBRGreen,VIC/JOE,andROX没有明确注明可用染料，yrreel可用SYBRGreen,FAM,VIC,TET,HEX,ROX,JOE,TAMRAFAM/SYBRGreenI,TET,HEXVIC/JOE,/TAMRA/CY,TexasRed和ROXCY5FAM/SYB,LC610.LC710(2.0增加HEX,JOE,640,670)rCyan500/Yreen/CrRed610/rRed640/Cy5CyeR/CS/rata

7、gene的可用染料最多，开放性最好CyeCyeStratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评检测动态范围10个10个9个9个9个910个9个10宽广的动态范围有利于摸索实验条件温度均一性(+/-)0.25(+/-)0.25(+/-)0.5土0.5C0.490.4+/-0.01+/)0.4(+/-)0.35Stratagene改进了传统的模块加热方式，

8、使得温度非常均匀，实验的重复性更好升降温速度2.5度/秒2.5度/秒样品：1.6度/秒，模块：2.5度/秒模块最高4.6度/秒，样品快速功能下2.2度/秒、普通功能下1.6度/秒最高5度/秒，平均3.3度/秒铝质：升4度/秒，降3度/秒；银质：升6度/秒，降4.5度/秒15度/秒0.1-20度/秒升4.8度/秒，降2.5度/秒相比同类型产品,Stratagene的升降温速度快检测灵敏度（准确性）单拷贝（区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%）单拷贝（区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%）单拷贝（区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%）10

9、拷贝（区别5000个拷贝与10000个拷贝的可信度为99.7%）单个拷贝的基因组DNA50fMfluorescein单拷贝单拷贝单拷贝升降温方式Peltier半导体Peltier半导体Peltier半导体Peltier半导体/steponeplus使用VeriFlex技术分为6个独立控制区域Peltier半导体Peltier半导体空气加热制冷空气加热制冷Peltier半导体半导体加热制冷控温更加精确。空气加热制冷虽然快速，但是控温不精确。StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppen

10、dorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评反应体积10100uL10100uL20100uL10-30uL150uL5-100ul(通常20ul)20ul-100ul的毛细管（反应体积可最少到5ul）10uL-100uL(96well)and5uL-20uL(384well)PCR反应的一般体积都是20-50ul试剂和耗材开放开放（支持FRET）专门为Taqman设计ABI专用耗材(0.ImL)低缘管开放36孔可使用0.2ml的单管，其余为专用耗材特制耗材，专用试剂封闭Stratagene试剂和耗材完

11、全开放快速PCR功能与FullVelocity配合使用可以快速至50分钟完成与FullVelocity配合使用可以快速至50分钟完成无有，快速功能40分钟内完成有有本身升降温速度比较快。反应时间45min1.5不等本身升降温速度比较快。35个循环反应20ul要30min,100ul要60min406分钟之内完成40个PCR循环快速PCR功能有利于缩短反应时间，提高实验效率。StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000

12、RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评软件易用性软件功能强大，支持绝对定量分析、基因表达差异分析、SNP分析等不同应用模式、操作非常方便简单，界面直观。软件功能强大，支持绝对定量分析、基因表达差异分析、SNP分析等不同应用模式、操作非常方便简单，界面直观。支持激发光滤光片与发射光滤光片的单独控制,能形成滤光片的错配，从而来满足FRET应用。软件操作复杂、单个软件功能薄弱。绝对定量（标准曲线）、CT进行相对定量分析、基因分型、融解曲线分析标准曲线分析，CT与CT进行相对定量分析，基因分型、读板实验。数据输出方便。具有e-mail提醒功能。软件功能比较强大。Stra

13、tagene定量软件的操作简单，有口皆碑！StratageneMx3000PStratageneMx3005PABI,Prism7500ABIStepOne/PlusBio-RadCFX96Eppendorf:2/4ColorSystemsRotorGene6000RocheLightCycler1.5/2.0RocheLC480简评主体评价i开放的系统，宽广的波长范围，能采用所有可用的探针染料2孔间温差小，实验重复性好。3.米用PMT检测，减少激发光、检测光交叉干扰，提高灵敏度4软件功能强大，但非常简单易用5，机器内置芯片能保存数据，电脑死机等情况不会丢失数据。6,完全的荧光定量PCR培训项

14、目。7，个人化的荧光定量PCR仪i开放的系统，宽广的波长范围，能采用所有的定量探针染料2孔间温差小，实验重复性好。3.米用PMT检测，减少激发光、检测光交叉干扰，提高灵敏度4软件功能强大，但非常简单易用5，机器内置芯片能保存数据，电脑死机等情况不会丢失数据。6，5通道配置，支持FRET应用。7,完全的荧光定量PCR培训项目。8，个人化的荧光定量PCR仪5通道，能与Taqman探针很好的匹配，软件使用麻烦，需要校正染料。仪器搬动后需要校正光路。有引物探针设计软件，但只能设计引物与Taqman探针。有单独的相对定量软件。目前StepOne系列的光学系统没有详细信息。只是知道LED激发所有的孔。具有梯度和快速功能LED+光电二极管（检测灵敏度值得怀疑）；逐孔扫描（光源移动）；操作温度30-100C有梯度功能；采用LED作为光源,光强弱。阵列光源有个体差异，影响检测的重复性；是普通PCR的升级产品，稳定性有待考查RG6000有5种型号：2Plex，2Plex+HRM,5Plex，5Plex+HRM,6Plex。空气加热制冷，升降温速度快，温度均一性好。但