DB1301-T238-2017水貂阿留申病碘凝集试验操作规程

1、B 41DB1301石家庄市地方标准DB 1301/T 2382017水貂阿留申病碘凝集试验操作规程2017-10-10 发布2017-11-30 实施石家庄市质量技术监督局发布DB 1301/T 2382017前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由石家庄市农业局提出。本标准起草单位：石家庄市农林科学研究院。本标准起草人：任二军、刘洁、刘进军、李伟、韩学良、荣敏、涂剑峰、邵西群、邢立民。DB 1301/T 2382017水貂阿留申病碘凝集试验操作规程范围本标准规定了水貂阿留申病碘凝集试验操作过程中材料准备、血样采集及碘凝集试验操作技术等内容。本标准适用于水貂养殖场

2、阿留申病的初筛。术语和定义下列术语和定义适用于本文件。阿留申病阿留申病又称浆细胞增多症，是由一种主要侵害水貂免疫细胞的阿留申病毒（ADV）引起的，导致自身免疫系统紊乱、缓慢发展的进行性衰弱的疾病，同时并发强烈的自身免疫的慢性传染性疾病。材料准备及血样采集材料毛细采血管（20 uL肝素钠抗凝的毛细玻璃管，长度75 mm，直径1.55 mm）、玻璃板（10 cm10 cm）、毛细管盒、记号笔、标签纸、指甲刀、工业橡皮泥、10 uL移液器、牙签。血样采集采血时间每年结合选种工作采血3次，采血次序及时间见表1。表1采血次序及时间表采血次序采血时间第1次分窝初选时第2次9-11月份终选时第3次翌年2月份

3、配种前编号将水貂以12只为一组与毛细管盒一一对应进行编号，编号方法为栋舍号+笼号。采血1DB 1301/T 2382017水貂保定保定者戴上棉手套从笼内抓取水貂，在该笼的产箱上进行保定。血样采集术者一手固定水貂后爪，另一手取灭菌的指甲刀在趾甲与趾垫的结合处剪断趾甲，弃去第一滴血，然后将毛细采血管一端轻触血滴，待血流入管的2/3处，用手指堵住毛细采血管的上端，另一端垂直插入工业用橡皮泥进行封口。血样保存采血管按照编号顺序放入毛细管盒中，将毛细管封口端朝下竖直放置，如果不能及时检测，宜放置在冰箱中保存。备检血浆的制备采集的血样可用毛细采血管专用离心机2500 rpm3000 rpm离心10 min

4、，也可在室温或4 冰箱内放置过夜析出血浆。溶血的血样应弃去，重新采集。碘凝集试验试剂鲁戈氏碘液使用市售鲁戈氏碘液，保存方法按说明书要求操作。自配试剂称取碘化钾4 g、碘颗粒2 g、蒸馏水30 mL，先将碘化钾用少量的蒸馏水溶解于玻璃烧杯中，再加入碘颗粒，震荡使其充分溶解，最后加入剩余的蒸馏水，充分混匀，放置于棕色瓶，静置24 h即可使用，4 冰箱保存。操作方法将干净的玻璃板平放，划成24个方格，横数4个格，纵数6个格，每格2.5 cm1.5 cm，用砂轮轻划毛细采血管血浆与红细胞界面，掰断毛细管，用10 uL的移液器将血浆吹出，按顺序滴到玻璃方格内，每滴血浆旁加10 uL的碘凝集试剂，然后用牙签将二者混匀，每个血样更换一个牙签。结果判定混匀后，1分钟内进行观察，结果判定见表2。表2碘凝集试验结果判定序号现象结果判定结果记录1出现显著的棕色不规则絮状或颗粒状沉淀物强阳性+2有明显颗粒状沉淀物阳性+3有微弱的颗粒状沉淀物阳性+2DB 1301/T 23820174