7种中草药醇提取物抑菌杀菌作用的研究

1、我国的中草药资源非常丰富，我国劳动人民应用中药已有数千年的历史，许多中草药具有抗菌消炎的作用。该课题组在前期研究的根底上，挑选出地榆、苍术、紫花地盯半枝莲、大黄、枸骨、千里光等7种常见中草药，用95%酒精提取其活性成分，选取大肠杆菌、枯草杆菌菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌等常见污染菌作为靶标菌，通过抑菌、杀菌试验，检测中草药对靶标菌的作用效果，为开发绿色杀菌剂提供参考。1材料与方法1.1试验材料1.1.1供试中草药。地榆Radixsanguisrbae、苍术Atratyldesrhize、紫花地丁Vilaeherba半枝莲Prtulaagrandiflrahk、大黄Rheupalatu、枸骨Ile

2、xrnuta、千里光Seneisandens，以上7种中草药均购置于咸宁市温泉中药店，烘干备用。1.1.2供试菌种。枯草杆菌Baillussubtilis、金黄色葡萄球菌Staphylusaureus、大肠杆菌Esherihiali、酵母菌Saharyeserevisiae，上述菌种均由华中农业大学发酵工程室提供。1.2试验仪器和试剂1.2.1试验仪器。DH5000AB型电热恒温培养箱、SJ1D型单人超净工作台、YX280A手提式不锈钢消毒器、J2菌落计数器、DH-101电热恒温本文由论文联盟.Ll.搜集整理鼓风枯燥箱、84型加热磁力搅拌器、BD216荣事达冰箱。1.2.2试验试剂。1l/LN

3、aH溶液、1l/LHl溶液、75%酒精、95%酒精、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基。1.3试验方法1.3.1菌悬液的配制。将大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌接种在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，37培养24h；酵母菌接种在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，28培养48h。将培养好的菌种，分别用接种环挑取少许菌体于装有无菌水的试管内，震荡均匀，制成菌悬液。用平板菌落计数法测定其菌液浓度，并用稀释法，使菌液含量数为104fu/l，即为供试菌液。1.3.2中草药提取液的配制。将中草药烘干、粉碎，分别用95%酒精1常温下萃取4d2，将提取液离心后，减压蒸馏温度约为5052，将中草药提取液中的酒精蒸

4、发。然后用蒸馏水定容到质量浓度为1g/l，置于04冰箱中备用。1.3.3体外抑菌试验测定3。将固体培养基加热熔化，每20l固体培养基参加已装有预定量中草药提取液0.5、2.0l的无菌培养皿直径为15中，再参加0.2l菌液稀释后菌液浓度约为103个/l，用涂布器涂布均匀，每一处理重复3次，用无菌水作对照。上述操作均在超净工作台内进展。将细菌培养皿倒置，置3637恒温培养24h，将酵母菌培养皿置恒温箱中28恒温培养48h后统计菌落个数，计算抑菌率4。抑菌率=对照菌落数-处理菌落数/对照菌落数100%。1.3.4体外杀菌试验测定。试验时，菌悬液的浓度约为104fu/l。取0.5l菌悬液和4.5l提取

5、液于无菌小试管中混合均匀对照组为无菌水，作用至预定时间5、15in后，取0.2l菌药混合液接种到装好培养基的培养皿中，用涂布器涂布均匀，每次操作重复3次。将做好的细菌平板倒置放入3637恒温培养箱中培养24h后，将酵母菌培养皿置恒温箱中28恒温培养48h后统计菌落个数，统计菌落个数，计算杀菌率5。杀菌率=对照菌落数-处理菌落数/对照菌落数100%。2结果与分析2.17种中草药酒精提取液的抑菌试验由表1可见，7种中草药的酒精提取液对4种菌有明显的抑制效果。随着药物剂量的增大，对4种菌的抑制效果显著增强。在药物为2.0l时，中草药对枯草杆菌的抑菌作用大小依次为大黄枸骨千里光苍术紫花地丁半枝莲地榆，

6、大黄抑菌率为99.4%，效果最好；中草药对酵母菌的抑菌率均在72.9%以上，其中千里光抑菌才能最强，抑菌率为91.5%；中草药对大肠杆菌的抑菌作用大小依次为地榆苍术大黄半枝莲紫花地丁千里光枸骨，地榆抑菌率最高，为97.2%；中草药对金黄色葡萄球菌的抑菌作用大小依次为大黄地榆枸骨千里光苍术半枝莲紫花地丁，大黄抑菌率为88.3%，效果最好。综合抑菌率看，7种中草药提取液对酵母菌抑菌率均较高。抑菌试验说明，同一中草药对不同细菌的抑制作用亦存在着显著差异，不同中草药对同一种菌抑菌效果也不同。2.27种中草药酒精提取液的杀菌试验从表2可看出，7种中草药95%酒精提取液对4种菌均有明显的杀菌效果。在中草药

7、质量浓度为1g/l时，随着杀菌时间的延长，杀菌率有显著的进步。靶标菌与药物作用15in后，中草药对枯草杆菌的杀菌作用大小依次为大黄枸骨千里光紫花地丁苍术半枝莲地榆，大黄杀菌率为92.2%，效果最好；中草药对酵母菌的杀菌率均在57.9%以上，千里光杀菌率最高，为90.7%；中草药对大肠杆菌的杀菌显著，杀菌率均在60.1%以上，大黄杀菌率最高，为94.3%；中草药对金黄色葡萄球菌的杀菌最为显著，杀菌率均在70.0%以上，大黄、地榆杀菌率为100%，效果最好。杀菌试验说明，不同中草药对同一种细菌的杀菌作用有显著差异，同一中草药对不同菌的杀菌作用亦存在着较大差异。3结论与讨论3.1讨论3.1.17种中

8、草药的抑菌试验。7种中草药提取液抑菌率的上下与药剂量有关，中草药剂量越大抑菌率越高；药物的抑菌效应呈现剂量效应；同一中草药对不同菌的抑菌效果也存在着较大的差异，可能是药物的成分对不同菌作用机理不同所致。不同中草药种在一样的浓度下对同一细菌的杀菌效果有明显差异，其原因主要是因为不同中草药所含的有效成分不同所致。目前对于中药抑菌机制的研究报导很少，的中药抑菌途径主要在三方面：干扰微生物的酶系，破坏其正常的新陈代谢，抑制酶的活性；使微生物的蛋白质疑固和变性，干扰其生存和繁殖；改变细胞膜的浸透性，使其体内的酶类和代谢产物逸出导致其失活6。3.1.27种中草药的杀菌试验。同种中草药在不同作用时间下对同种细菌的杀菌作用效果不同，这是因为作用时间越长，药物中的有效成分对细菌的作用越充分，对菌的杀灭效果越好。不同中草药种在一样的浓度、一样时间下对同一细菌的杀菌效果有明显差异，其原因主要是因为不同中草药所含的有效成分不同所致。同一中草药对不同菌的杀菌效果也存在着较大的差异。可能是药物的成分对不同菌作用机理不同所致。抑菌才能强的中草药，其杀菌才能也强。中草药提取液杀菌的作用机理方面的研究还处在探究阶段7。中草药所含的活性成分受生长地域、不同季节、植物不同部位、不同提取方