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文档简介
1、1.1 DNA重组技术的基本工具生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)过程分析基因工程的概念:基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境操作对象操作水平基本过程结果DNA重组技术的基本工具准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)DNA连接酶基因转移工具(“分子运输车”)基因进入受体细胞的载体思考 :原核生物为什么没有在长期的进化过程中由于外源DNA的入侵而灭绝,有什么保护机制? 限制性内切酶从哪里寻找?1. 限制性核酸内切酶“分子手术刀”限制性核酸内切酶的作用特点:能识别DNA双链特定核苷酸序列;从
2、特定部位的两个核苷酸之间切开。黏性末端和平末端连接酶种类: 黏性末端平末端DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点?阅读思考:3.基因进入受体细胞的载体“分子运输车” (2) 运载体的作用:质粒、噬菌体的衍生物动植物病毒等将外源目的基因导入受体细胞(1)常用的运载体:(3)作为载体的必要条件1、能够在受体细胞中能稳定地保存并能复制2、对受体细胞无毒害作用3、具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;4、具有某些标记基因,便于进行筛选。(如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 )常用的受体细胞:大肠杆菌谷草杆菌酵母菌动植物细胞达标练习在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使
3、用( )同种限制酶 B. 两种限制酶同种连接酶 D. 两种连接酶基因工程常用的受体细胞有( )(1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌(3)支原体 (4)动植物细胞A. (3)(4) B. (1)(2)(4)C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3)A、 BamHI和EcoRI;末端互补序列AATT B、 BamHI和Hind;末端互补序列GATCC、 EcoRI和Hind;末端互补序列AATTD、 BamHI和BglII;末端互补序列GATC限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,Hind以及Bgl的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何?( ) 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 ( ) B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNAD补救练习 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达C一、基因工程的概念.二、DNA重组技术的基本工具1.限制性核酸内切酶-”分子手术刀” 2. DNA连接酶-”分子缝合针
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