6课程名称生化实验甲指导老师成绩

1、实验课程名称： 生化实验（甲）指导老师：成绩：_实验名称：酶的基本性质实验底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度（. 影响酶活性的激活剂和抑制剂）实验类型： 同组学生： 陈颂赞、一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填）四、实验器材与仪器（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）六、实验数据和处理七、实验结果与分析（必填）八、心得一、实验目的和要求1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。2. 学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。二、实验内容和原理在酶促反应过程中，酶的活性常受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂；某些物质它们并

2、不引起酶蛋白变性，但能使酶分子上的某些必需基团（主要是指酶活性中心上的一些基团）发生变化，因而引起酶下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低，称为酶的抑制剂。酶的激活剂种类：1、一些简单的无机离子，如Mg2+、Cl-等；2、一些中等大小的有机分子，如抗坏血酸等也是激活剂，它们对某些含巯基的酶具有激活作用；3、有些酶的催化作用易受某些抑制剂的影响，因而能除去抑制剂的物质也可称为激活剂，如 EDTA能除去重金属，因而能解除重金属对酶的抑制作用。4、具有蛋白质性质的大分子物质，这些激活剂是指可对某些无活性的酶原起作用的酶。酶的抑制剂有许多种：如重金属离子（Ag+、Hg2+、Pb2、Cu2等）、CO、氯化物

3、、H2S、砷化物、氟化物、生物碱、有机磷等都是抑制剂。少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性，而且常具有特异性。值得注意的是激活剂和抑制剂不是，各种激活剂对酶的作用是不同的。本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激专业：生物科学：学号：3130000985日期：2014.11.4地点：生物实验中心装订线活或抑制现象。淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下：淀粉紫色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖葡萄糖I2显蓝色显紫色显红色不显色不显色不显色（碘色）（碘色）（碘色）仍为多糖（无还原性）（有还原性）本实验中，Cl-为唾液淀粉酶的激活剂；C

4、u2+为唾液淀粉酶的抑制剂。利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同的呈色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活和抑制现象。淀粉 + 碘蓝色水解的程度是通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色之变化来判断的。三、实验材料与试剂1、实验材料新鲜唾液2、实验试剂 唾液淀粉酶（学生）取唾液 1ml 至 50ml 量筒中，用蒸馏水稀释至 50ml，用棉花过滤备用。唾液稀释倍数因人而异，可稀释 50400 倍，甚至更高。0.1%淀粉溶液1.0%氯化钠溶液1.0%硫酸铜溶液1.0%硫酸钠溶液碘化钾-碘液四、实验器材与仪器装订线1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴（37）五

5、、操作方法和实验步骤取试管 4 支，按下表操作：注意： 找出准确的保温时间，是本实验是实验能否成功的关键步骤之一，唾液淀粉酶液浓度可根据个人情况而定，通过 37水浴溶保温计时，反应时间最好在 815min 以内，只有确定准确的保温时间才能进行实验。 加入酶液后，务必充分摇匀，保证酶与全部淀粉液接触的反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。 碘化钾碘液不要过早地加到点滴板上，以免碘液挥发，影响显色效果。六、实验数据和处理装订线试管试剂处理12340.1%淀粉溶液(ml)33331% 硫酸铜溶液(ml)11% 氯化钠溶液(ml)11% 硫酸钠溶液(ml)1蒸馏水(ml)1唾液淀粉酶(ml)1111混匀

6、，37恒温水浴，保温 10min碘化钾-碘液（滴）1111观察结果深蓝色淡黄色深蓝色红棕色七、实验结果与分析一号管颜色最深说明铜离子对唾液淀粉酶有较强的抑制性；二号管颜色最浅说明氯离子对唾液淀粉酶有促进作用；3 号管颜色介于 4 号（蒸馏水）与 1 号之间，但比理论色深，说明钠离子对唾液淀粉酶有一定抑制作用，而且本实验用的酶不够强或稀释倍数过高。八、心得激活剂可分哪几类？本实验中 NaCl、硫酸铜是属于哪种类型？答：激活剂可分为：简单无机离子、中等大小有机分子、能出去抑制剂的物质、具有蛋白质性质的大分子物质等。NaCl 属于简单无机离子；CuSO4 属于重金属抑制剂。本实验中，1，2，3，4 管各有何用意？为什么要设计第 3 管和第 4 管？答：第 4 管作为空白对照；第 3 管用以证明 Na+ 和 SO42- 不影响淀粉酶的活性；第 2 管证明 Cl-对于淀粉酶是激活剂；第 1 管证明 Cu+对于淀粉酶是抑制剂。抑制剂与变性