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文档简介
1、浅谈网状纤维染色在病理事情中的应用【摘要】目的总结网状纤维染色在病理事情应用中的领会。要领取活体构造查抄标本举行网状纤维染色。结果留意gri氏银氨液的配制质量、染色时间、氯化金调色时间的操纵等等可使网状纤维染色到达抱负结果。结论留意网状纤维染色历程的各个操纵环节、可使染色到达满足结果,在病理诊断中具有积极的意义。【关键词】网状纤维染色应用网状纤维是网状结缔构造内的一种纤维,由网状细胞产生,纤维细而有分支,穿行于网状细胞体和突之间,交织摆列成致密的网状,故称之。此种纤维用h.e染色一样平常不易区分,假设用银氨溶液感化能使纤维酿成玄色,故又称嗜银纤维。网状纤维多漫衍在结缔构造与其他构造接壤处,如基
2、膜的网板、肾小管四周、毛细血管四周等等。在造血器官和内排泄腺,有较多的网状纤维构成它们的支架,以是网状纤维染色应用非常普及。常用于表现和区分肿瘤的性子和泉源,如癌和肉瘤、血管内皮瘤和血管外皮瘤等,也可用于不雅察和研究癌构造的产生、生长及恶性程度;表现与不雅察基底膜的变革,从而有用地断定其上皮泉源,且有助于区分差异泉源的上皮肿瘤;还可用于识别坏死构造的布局及范例等等。因此,作为通例染色的需要增补,网状纤维染色在病理诊断中起到紧张的帮助作用,是病理染色技能不成缺少的构成部门。网状纤维染色要领较多,此中最常用的是gri法1,笔者就事情中积聚的履历和领会总结如下。1资料和要领1.1质料选自本院病理科活
3、体构造查抄标本,中性福尔马林结实,白腊包埋。1.2试剂配制gri银氨液:取10%硝酸银4滴盛入小量杯中,参加1滴10%氢氧化钠,即产生灰玄色沉淀;记载总量,加蒸馏水洗涤沉淀物,倾去上清液,再参加蒸馏水,重复3次,末了加蒸馏水,凑足总量,然后逐滴加浓氨水并不竭摇摆,使混淆匀称;至沉淀恰好溶解,参加10%硝酸银至沉淀再次天生,再滴入1滴至数滴的浓氨水,不雅察沉淀物将溶尽,尚留数个小颗粒时制止,加蒸馏水3倍后装入棕色玻璃瓶,密封避光保存备用。1.3要领2通例白腊切片,脱蜡至水。入0.25%高锰酸钾5分钟,自来水洗。2%草酸漂白,自来水洗,蒸馏水洗。2%硫酸铁铵媒染1分钟,细水速洗。入gri银氨液1分
4、钟加盖举行,蒸馏水洗。20%的甲醛溶液复原1分钟,蒸馏水洗。0.2%氯化金液镜下不雅察调色1-2分钟,蒸馏水洗。2%硫代硫酸钠结实1分钟,蒸馏水洗,v.g液复染3分钟。无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。2结果网状纤维呈玄色,胶原纤维呈赤色,配景呈黄色。3讨论网状纤维染色中,高锰酸钾的作用是氧化,使网状纤维具有选择性,染色力加强,同时改进配景致调,削弱银氨液对胞核的着染,有利于胞核的复染。不经氧化的切片,网状纤维不克不及很好地表现出来,故高锰酸钾存放时间不克不及过长,以免失去氧化作用。网状纤维是由含有糖卵白的胶原卵白构成,易与氨性银结合,即带正电荷的二氨合银离子被具有嗜银性物质的网状纤维吸
5、附,再经甲醛复原成棕玄色金属银,从而使网状纤维显色。因此为了得到满足而不变的染色结果,银氨液的配制是关键,配制时滴入氨水的量要适当,过多感到落落会使液体过碱,滴染使切片轻易脱落,过少那么感到上升,感化结果欠好。由于配好的银氨液很敏感,受光或气氛中的氧的作用后均易解离出银盐,故宜用棕色玻璃瓶密封避光保存于4冰箱中,不克不及利用金属器皿,如现用现配那么结果更佳。银氨液滴染水洗时间也要适当,接纳倾歪流水速洗,不然会产生银颗粒沉淀,水洗时间过长那么影响复原,甲醛是复原剂,能把与网状纤维的银氨化合物复原成棕玄色的金属银,因此20%甲醛液应常常调换。用0.2%氯化金调色须镜下操纵,如时间短,会增长配景染色
6、;时间长,那么会使网状纤维颜色变浅。网状纤维具有嗜银性,而胶原纤维布局疏松,宽孔粗纤维能与酸性染料结合3,在通常环境下为区分诊断和研究应用必要,同时再举行胶原纤维比拟染色,可使色彩区分更为光显、清楚,从而得到区分诊断的满足结果。在病理诊断及区分诊断历程中,he切片的光镜不雅察是病理诊断的底子,也是最根本的最重要的本领,但单纯用he染色偶然很难鉴别其病因、构造泉源及发病机制等方面题目,故常需借助其他帮助本领来增补,好比特别染色、免疫组化染色、电镜及原位杂交等要领。从而使病理诊断的正确性不竭得到进步,偶然这些要领在区分诊断上能起决定性作用,此中特染是专门用于表现某些特定目的物的染色要领,是病理诊断及科学研究范畴不成缺少的构成部门。而网状纤维染色在病理事情中是最常用的特别染色法,由于网状
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