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文档简介
1、柯萨奇B组病毒与心血管疾病【摘要】目的:相识柯萨奇b组病毒vb在心脏疾病患者中的熏染状态,探究vb熏染与心血管疾病的内涵干系。要领:接纳间接酶联免疫吸附测定elisa和反转录-聚合酶链反响rt-pr,举行vbigg抗体和核酸检测。效果:心脏病组vbigg阳性率为44.8%112/250,比较组抗体阳性率为16.7%18/108,两者有明显性差异p0.05。vbrna检测效果表现,心脏病组阳性率为20.4%51/250,比较组为3.7%4/108,两者比力有明显性差异p0.05。结论:在心脏病患者中vb熏染较普及,应引起器重。【关键词】柯萨奇病毒熏染;酶联免疫吸附测定;心血管疾病authrsad
2、dress:entrefedialresearh,peplehspitalfguangdng,guangzhu,guangdng,510080,hina柯萨奇b组病毒xsakievirusb,vb是严峻的致病病原,其熏染可以引起普及的疾病1,除能引起无菌性脑炎、发热、肺炎等疾病外,还可诱发心脏疾患。比年来,柯萨奇病毒熏染陈诉不竭增长,发病率也不竭上升,对人类康健造成威胁2,3。为相识该病毒在人群中的熏染状态,探究柯萨奇b组病毒在心脏疾病中产生、生长中的作用,本研究对广州地域就诊的部门心脏病患者和体检正常者举行了血清及分子盛行病学视察,现将效果报道如下。1资料与要领1.1一样平常资料心脏病组:临
3、床诊断为冠心并风湿性心脏并高血压性心脏病患者250例,均为广东省人民病院心血管门诊和住院病人,年事3684,均匀61岁。男161例,女89例。正常比较组:无心脏病的体检正凡人108例,年事2576,均匀45岁。1.2样本网罗和处置惩罚心脏病组与正常比较组均外周静脉取血,分装于枸椽酸钠抗凝管和枯燥管内各2l。枯燥管的标本用作分散血清。抗凝管的标本在分散血浆后参加红细胞裂解液和二乙基焦磷酰胺dep水,混匀后离心弃上清,参加rna裂解液和氯仿,混匀离心,取上清,参加异丙醇,混匀后加到带网络管的吸附柱中,离心,参加去卵白液,离心,加洗涤液离心,末了在吸附膜中心参加纯水溶解,离心,即获rna。提取的rn
4、a和分散的血清均置-70冰箱保存待检。1.3间接酶联免疫吸附试验elisa于酶标反响板内参加病毒抗原液,置湿盒内4留宿。磷酸盐缓冲液pbs洗板3次,每次5in,加关闭液371h,洗板后加待检血清,置371h,洗板,加酶结合物,371h,洗板,加底物显色15in,不雅察效果vbiggelisa检测试剂由武汉大学医学院病毒研究所提供。1.4逆转录-聚合酶链反响rt-pr用gld软件按照bv5端非编码区高度守旧的rna序列选择方案合成引物,序列为5-ggatgagtataata-3;5-gagttaggattaggattaggat-3,扩增片断为299bp由上海博亚生物公司合成。逆转录和pr反响步调
5、:在1.5l的eppendrf管中参加dep水、10bufferrt、引物2和rna模板,933in,冰浴2in,再参加10buffer、rna酶按捺剂、av逆转录酶均为美国prega产物,43水浴90in后举行pr扩增。反响体系包罗10dntp、引物1、引物2、pr缓冲液、taqdna聚合酶、无菌纯水。反响参数为93变性6in,941in、551in、721in,共35个循环。反响产物用2.5%的琼脂糖举行凝胶电泳,电压80100v,4060in不雅察效果。1.5统计学处置惩罚接纳x2查验举行计数资料统计阐发。2效果2.1bvigg抗体检测效果elisa法检测效果:vbigg抗体阳性130例
6、36.3%。此中,心脏病组250例,阳性112例44.8%,比较组108例,阳性18例16.7%。两组间有明显性差异p0.05。分型检测以vb3抗体阳性率最高19.6%,其次为vb29.6%、vb58.8%、vb18.4%、vb44%和vb62.8%。2.2vbrt-pr检测效果效果表现vbrna总阳性率为15.4%55/358。此中心脏病组vbrna阳性率为20.4%51/250,比较组阳性率为3.7%4/108,两组比力有明显性差异p0.05。3讨论vb属于小rna科肠道病毒属。该病毒是一种同属型别浩繁,所致疾病庞大的病毒。天下卫生构造宣布的一份关于环球性病毒熏染与心血管疾病干系的盛行病学
7、视察中指出,vb在21种差异病毒中位居第一。与其他一些研究效果相似4,5。vb型别较多,产生的抗原性较为庞大,此中6个型别间的布局卵白存有较大氨基酸同源性,各型间具交织性抗原决定簇6。如今在对柯萨奇b组病毒的病原学诊断上,elisa及pr法因快速、敏感、特异性强等特点已用于检测vb熏染后病毒特异性抗体及核酸,这对vb熏染后血中病毒核酸及抗体的消长、临床诊断和预后断定均有引导意义7,8。本研究别离用pr和间接elisa法对广州地域就诊的部门心脏病患者举行了vbigg抗体和核酸检测。效果表现250例心脏病患者血清标本vb16型igg抗体阳性112例,此中以vb3阳性率最高,表白vb3的嗜心性较强,
8、熏染性较高。有21例标本两型同时阳性,表现vb熏染与心血管疾病的产生有关,且熏染有病毒型的差异。分组检测效果表现,心脏病组vbigg阳性率为44.8%,比较组为16.7%p0.05.rt-pr检测心脏病组vb阳性率为20.4%,比较组3.7%,两者有明显性差异p0.05)。本研究血清和分子盛行病学研究效果表现,vb熏染与心血管疾病虽有关联,但由于vb致病的庞大性和多样性,二者之间的干系尚需进一步研究证明。【参考文献】1金奇.医学分子病毒.北京:科学出书社,2001:579.2gristnr,reidd.epideilgyfviralinfetinsftheheart.lndn:edardalk
9、,1993:23-30.3程翔,李彬,廖玉华,等.医护职员柯萨奇病毒熏染与病毒性心肌炎发病环境阐发j.心血管病愈医学杂志,2022,13(4):328.4andrelettil,hberd,bequartp,etal.evidenefinterrelatinshipsbeteenverusrepliatinandyardialdaageinpersistedardiainfetinj.jedvirl,1997,52:206.5berardnf,davidk.enterviruses:pliviruses,xsakieviruses,ehvirusesandneerentervirusej.virlgy,1996,297(3):666-675.6徐耀光,周晓峰,刘立德.分子病毒学.武汉:湖北科学技能出书社,2000:313-324.7nihlsnf,ajetunbijf,li,etal.leulardetetinands
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