《农业微生物学实验》课程教学大纲

1、农业微生物学实验教学大纲1课程中文名称（英文名称）：农业微生物学实验 （Experiments of Agricultural Microbiology）3课程类别：公共课程 学科基础课程 专业课程 实践教学环节4课程性质：必修课 选修课5课程属性：独立设课 课内实验6课程总学时: 48 学时 总学分：3 学分实验学时：16学时 实验学分：7适用专业：植物保护（农药方向）8先修课程：无机化学、有机化学、分析化学、生物化学、遗传学一、实验课程简介微生物学实验课程是训练学生的显微操作、无菌操作、分离接种、纯培养、培养基制作、灭菌消毒等实验技术的课程。微生学实验技术和方法是微生物学建立和发展的基础，

2、也为整个生命科学技术的发展做出过积极重要的贡献。随着分子生物学的诞生及其技术的应用，各学科的交叉渗透，极大地丰富了微生物学实验技术的内容，并将其推向一个新的发展阶段。微生物学实验技术和方法已广泛地渗透到现代生命科学的各分支领域，不断发挥着它独特的作用，因此，微生物学实验是一门十分重要的课程。在这里微生物学实验是为植物保护（农药方向）专业所开设的专业课程，为必修课。二、实验教学目标与基本要求目标：让学生掌握微生物学的基本操作技能，包括无菌操作、显微镜的使用、简单染色、革兰氏染色、细菌临时制片、酵母菌临时制片、霉菌临时制片、培养基的制作、消毒灭菌、分离与接种、微生物的初步鉴定等技术；使学生初步了解

3、或掌握先进的技术和方法，与迅速发展的学科前沿接轨，为将来学生从事与微生物相关的微生物肥料与农药生产、食品质量检验检测、环境监测、污染控制、水处理、食品加工、医药生产、基因工程、微生物资源等方面的工作和研究打下基础；使学生加深对理论知识的理解；培养学生一种尊重科学、实事求是、客观公正、严谨的工作作风和吃苦耐劳、团结协作的精神。基本要求：学生应严格遵守微生物学实验室规则，严格执行其中的各项规定；课前对所要进行的实验内容进行充分的预习，对实验的原理、内容、过程、注意事项等做到心中有数，应避免进了实验室不知道要做什么、怎么做，做完了还不知为什么要这样做；上课时应勤动手，多操作，胆大而心细；爱护实验的仪

4、器设备，对设备的操作和使用应按老师所讲的正确进行，不应违规操作；应如实记录实验数据，切忌对实验数据进行篡改，即时上交实验报告；实验完成后把用过的玻片、菌种等放到老师指点的地点进行集中处理，不得随意处置；以小组进行的实验同学间应相互配合。三、本实验课程的基本理论与实验技术知识本实验课是基于农业微生物学理论学习而开设，基本理论依据为原核生物的形态构造、真核微生物的形态构造、微生物的营养要求、微生物的代谢、微生物的生长繁殖规律、微生物的遗传变异、微生物生活的环境、微生物在自然界物质循环中的作用、微生物与植物的共生关系、微生物与环境治理与保护。本实验的基本实验技术为：微生物学实验常用的器皿的使用、显微

5、镜的构造性能和使用、微生物的染色和形态结构观察、培养基的制备、消毒与灭菌、微生物的纯培养、微生物数量测定、环境因素对微生物生长的影响。四、实验方法、特点与基本要求微生物实验室要求学生遵守一般实验室的规则外，还需注意以下几点：微生物无处不在，无孔不入，实验室的空气、桌面、工具、仪器设备、人体等处处都有微生物，因此，从事微生物的任何实验操作最重要的基础就是无菌操作，避免污染，走进微生物实验室的同学应时时牢记无菌观念，从每一步做起，防止污染的发生。另外，微生物实验中有些实验菌种是人的致病菌或条件致病菌，因些，操作中须小心，避免让其进入眼睛、呼吸道或口腔，引起炎症，如果有此情况发生，应及时报告老师作出

6、处理；实验后带菌的接种针、培养皿、玻片、试管等需灭菌后才能清洗。五、主要仪器设备高压蒸汽灭菌锅、 超净工作台、电热鼓风干燥箱、电磁炉、微波炉、纯水器、恒温培养箱、振荡培养箱、电子天平（0.01，0.001，0.0001）、紫外分光光度计、可见分光光度计、冰箱、离心机、试管、培养皿、接种针、三角瓶等。六、实验项目的设置与内容提要序号实验项目名称内容提要实验学时实验类型每组人数实验要求1显微镜的使用与细菌的简单染色普通光学显微镜的构造、原理、使用及保养维护方法，简单染色法的操作过程、注意事项，观察常见的、有代表性的几种细菌形态，学习无菌操作技术。3验证1必做2微生物的复染色法以典型细菌（大肠杆菌、

7、金黄色葡萄球菌）为材料，学习革兰氏染色的方法和原理；以枯草芽孢杆菌、褐球菌、巨大芽孢杆菌为材料观察细菌的芽孢、荚膜、鞭毛结构，学会这些特殊结构的染色方法和原理。巩固无菌操作技术。3验证1必做3放线菌、真菌形态及微生物菌落生长特征观察采用埋片法和水浸片法观察链霉菌、根霉、米曲霉、酿酒酵母菌的形态、繁殖方式。细菌、真菌、放线菌的菌落生长特征。3验证1必做4细菌、放线菌和真菌常用培养基的配制与灭菌制作培养细菌的牛肉膏蛋白胨培养基、放线菌的高氏一号培养基、真菌的PDA培养基，学习高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法的原理和方法。3验证2-3必做5土壤中细菌、放线菌、真菌的分离及平板计数。采用稀释平皿法从土壤中分

8、离细菌、放线菌和真菌，学习倒平板、制备稀释液、涂布等方法，并测定土壤中这几类微生物的数量。4综合2-3必做6显微镜直接计数法测定微生物的数量血细胞计数板的结构和计数原理、计数方法、计数中的注意事项，以酿酒酵母为材料练习用血细胞计数板计数。3验证2-3选作7微生物大小的测定目镜测微尺测定微生物大小的方法、原理、注意事项，操作内容有：目镜测微尺的安装、利用镜台测微尺对目镜测微尺的校正、测定一种细菌和一种酵母菌的大小。3验证2-3可选8土壤中微生物种类的初步鉴定对土壤中分离出的细菌、放线菌、霉菌从形态、革兰氏染色、培养特征几方面进行初步鉴定。3综合2-3任选9生物因素对微生物的影响利用滤纸条法测定青

9、霉素的抗菌谱，测定该抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、黑曲霉的抗菌作用。3验证2-3任选10氧对微生物的影响采用深层琼脂法来测定氧对不同类型微生物生长的影响，在葡萄糖牛肉膏蛋白胨深层琼脂试管中接入各类微生物，在适宜的条件下培养后，根据微生物的生长情况，判断其对氧的需求和耐受情况。3验证2-3任选七、实验报告要求实验报告格式：题目、实验目的、实验原理、实验步骤、实验结果、实验结论与讨论（分析）。绘图一律用铅笔，绘图时要求标明各部位的名称。数据分析一定要有原始数据。需统计分析的数据一律要作统计分析。不能抄袭别人的实验报告，一般每人需作一份自已的报告。八、考核方式与成绩评定标准本门课程不作专门的卷面考试，以平时学生的操作和实验报告作为成绩评定的依据。如果条件和时间允许，可进行一次操作考核，即学生按指定的内容操作演示，老师根据其操作结果打分。本门课程的成绩=平时操作20%+实验报告7