食品中脂肪酸及反式脂肪酸检测方法

1、食品中脂肪酸及反式脂肪酸之检验方法适用范围：本检验方法适用于食品中脂肪酸及反式脂肪酸之检验。检验方法：气相层析法( gas chromatography, GC )。装置：气相层析仪：检出器：火焰离子检出器( flame ionization detector, FID )。层析管：CP-Sil 88毛细管，内膜厚度0.20心叫内径0.25 mm X 100 m,或同级品。试药：正己烷、氢氧化钠、甲醇、氯化钠、无水硫酸钠、14%三氟化硼甲醇溶液均采用化学试药特级。脂肪酸标准品：饱和脂肪酸甲基酯标准品：四烷酸甲基酯 t tetranoic methyl ester, 4:0 )、六烷酸甲基酯(h

2、exanoicmethyl ester, 6:0 )、八烷酸甲基酯 (octanoic methyl ester, 8:0 )、十烷酸甲基酯 (decanoic methyl ester, 10:0)、十二烷酸甲基酯 (dodecanoic methyl ester, 12:0 )、十四烷酸甲基酯 (tetradecanoic methyl ester, 14:0)、十六烷酸甲基酯(hexadecanoic methyl ester, 16:0 )、十八烷酸甲基酯(octadecanoic methyl ester, 18:0)、二十烷酸甲基酯(eicosanoic methyl ester,

3、 20:0 )、二十二烷酸甲基酯 (docosanoic methylester, 22:0)及二十四烷酸甲基酯(tetracosanoic methyl ester, 24:0 )等对照用标准品。反式脂肪酸甲基酯标准品：9-反式-十六碳烯酸甲基酯(9-trans-hexadecenoic methyl ester,9t-16:1 )、4-反式-十八碳烯酸甲基酯( 4-trans-octadecenoic methyl ester, 4t-18:1 )、5-反式-十八碳 烯酸甲基酯(5-trans-octadecenoic methyl ester, 5t-18:1 )、6-反式-十八碳烯酸甲

4、基酯6 6-trans-octadecenoic methyl ester, 6t-18:1 )、7-反式十八碳烯酸甲基酯 (7-trans-octadecenoic methyl ester, 7t-18:1 )、8-反式-十八碳烯酸甲基酯(8-trans-octadecenoic methyl ester, 8t-18:1 )、9-反式-十 八碳烯酸甲基酯(9-trans-octadecenoic methyl ester, 9t-18:1 )、10-反式-十八碳烯酸甲基酯110-trans-octadecenoic methyl ester, 10t-18:1 )、11-反式-十八碳烯酸

5、甲基酯(11-trans-octadecenoicmethyl ester, 11t-18:1 )、12-反式-十八碳烯酸甲基酯(12-trans-octadecenoic methyl ester, 12t-18:1 )、 13-反式-十八碳烯酸甲基酯(13-trans-octadecenoic methyl ester, 13t-18:1 )、14-反式-十八碳烯酸甲 基酯(14-trans-octadecenoic methyl ester, 14t-18:1 )、15-反式-十八碳烯酸甲基酯1 15-trans-octadecenoic methyl ester, 15t-18:1 )

6、、16-反式-十八碳烯酸甲基酯(16-trans-octadecenoic methyl ester, 16t-18:1 )、9-, 12-反式十八碳二烯酸甲基酯( 9,12-trans-octadecadienoic methyl ester, 9t,12t-18:2)、9-顺式，13-反式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-cis, 13-trans-octadecadienoic methyl ester, 9c,13t-18:2 )、8-反式，12-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 8-trans, 12-cis-octadecadienoic methyl ester, 8t,12c-18:2 )

7、、9-顺式，12-反式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-cis,12-trans-octadecadienoic methyl ester, 9c,12t-18:2 )、9-反式，12-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-trans,12-cis-octadecadienoic methyl ester,9t,12c-18:2 )、9-反式，15-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-trans,15-cis-octadecadienoic methyl ester, 9t,15c-18:2 )、10-反式，15-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 10-trans,15-cis-octadecadienoic me

8、thyl ester, 10t,15c-18:2 )、9-反式，12-反式，15-反式-十八碳三烯酸甲基酯(9-trans,12-trans,15-trans-octadecatrienoic methyl ester, 9t,12t,15t-18:3 )、9-反式,12-反式，15-顺式- 十八碳三烯酸甲基酯( 9-trans,12-trans,15-cis-octadecatrienoic methyl ester, 9t,12t,15c-18:3 )、9-反式, 12-顺式，15-反式-十八碳三烯酸甲基酯( 9-trans,12-cis,15-trans-octadecatrienoic

9、 methyl ester, 9t,12c,15t-18:3 )、9-顺式，12-反式,15-反式-十八碳三烯酸甲基酯(9-cis,12-trans,15-trans-octadecatrienoic methyl ester, 9c,12t,15t-18:3 )、9-顺式，12-顺式，15-反式-十 八碳三烯酸甲基酯(9-cis,12-cis,15-trans-octadecatrienoic methyl ester, 9c,12c,15t-18:3 )、9-顺式，12- 反式，15-顺式-十八碳三烯酸甲基酯( 9-cis,12-trans,15-cis-octadecatrienoic

10、methyl ester, 9c,12t,15c-18:3 )及9-反式，12-顺式，15-顺式-十八碳三烯酸甲基酯(9-trans,12-cis,15-cis-octadecatrienoic methyl ester, 9t,12c,15c-18:3 )等对照用标准品。顺式脂肪酸甲基酯标准品：9-顺式-十四碳烯酸甲基酯(9-cis-tetradecenoic methyl ester, 9c-14:1 )、9-顺式-十六碳烯酸甲基酯(9-cis-hexadecenoic methyl ester, 9c-16:1 )、6-顺式-十八碳烯酸甲基酯(6-cis-octadecenoic met

11、hyl ester, 6c-18:1 )、7-顺式-十八碳烯酸甲基酯( 7-cis-octadecenoic methyl ester, 7c-18:1 )、8-顺式-十八碳烯酸甲基酯( 8-cis-octadecenoic methyl ester, 8c-18:1 )、9-顺式-十 八碳烯酸甲基酯(9-cis-octadecenoic methyl ester, 9c-18:1 )、10-顺式-十八碳烯酸甲基酯(10-cis-octadecenoic methyl ester, 10c-18:1 )、11-顺式-十八碳烯酸甲基酯(11-cis-octadecenoic methyl est

12、er, 11c-18:1 )、12-顺式-十八碳烯酸甲基酯(12-cis-octadecenoic methyl ester, 12c-18:1 )、 13-顺式-十八碳烯酸甲基酯(13-cis-octadecenoic methyl ester, 13c-18:1 )、14-顺式-十八碳烯酸甲基 酯(14-cis-octadecenoic methyl ester, 14c-18:1 )、15-顺式-十八碳烯酸甲基酯(15-cis-octadecenoic methyl ester, 15c-18:1 )、9-,13-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-,13-cis-octadecadieno

13、ic methyl ester, 9c,13c-18:2 )、9-,12-顺式-十八碳二烯酸甲基酯(9-,12-cis-octadecadienoic methyl ester, 9c,12c-18:2 )、9-,14-顺式-十八碳二烯酸甲基酯( 9-,14-cis-octadecadienoic methyl ester, 9c,14c-18:2 )、9-,15-顺式- 十八碳二烯酸甲基酯( 9-,15-cis-octadecadienoic methyl ester, 9c,15c-18:2 )、9-,12-,15-顺式-十八碳 三烯酸甲基酯(9-,12-,15-cis-octadecat

14、rienoic methyl ester, 9c,12c,15c-18:3 )及 11-顺式-二十碳烯酸 甲基酯(11-cis-eicosenoic methyl ester, 11c-20:1 )等对照用标准品。共辄式脂肪酸甲基酯标准品：9-顺式，11-反式-十八碳二烯酸甲基酯(9-cis,11-trans-octadecadienoic methyl ester, 9c,11t-18:2 )、10-反式，12-顺式-十八碳二烯酸甲基酯(10-trans,12-cis-octadecadienoic methyl ester, 10t,12c-18:2 )等对照用标准品。内部标准品：二H一烷

15、酸甘油酯( triheneicosanoin, 21:0 TAG )对照用标准品。器具及材料：加热器(Block heater) : 50200 C。旋涡混合器(Vortex mixer )。褐色玻璃瓶：15 mL ,附Teflon瓶盖。褐色样品瓶：2 mL ,附瓶盖标准溶液之配制：称取脂肪酸甲基酯对照用标准品各约50 mg,精确称定，以正己烷溶解，并定容至10 mL,供作标准原液。临用时再以正己烷稀释，供作标准溶液。内部标准溶液之配制：称取二十一烷酸甘油酯对照用标准品约500 mg,精确称定，以正己烷溶解，并定容至100 mL,供作内部标准溶液。粗脂肪之萃取：称取相当于含脂肪 100200

16、mg之适量检体，精确称定，加入内部标准溶液 2 mL ,依CNS5036 N6117食品中粗脂肪之检验萃取粗脂肪，以正己烷溶解并定容至10 mL。检液之调制：取2.7节之溶液1 mL ,置于褐色玻璃瓶中，加入1N氢氧化钠甲醇溶液 1 mL ,充填氮气，拴紧瓶盖，以旋涡混合器震荡30秒，置于加热器中，以 80c皂化15分钟，取出冷却。加入 14%三氟化硼甲醇溶液 向1 mL,充填氮气，拴紧瓶盖，以旋涡混合器震荡 30秒，置于加热器中，以110c酯 化15分钟，取出冷却。精确量取正己烷1 mL ,加入上述之褐色玻璃瓶内，拴紧瓶盖，以旋涡混合器震荡1分钟，加入饱和氯化钠溶液 6 mL,拴紧瓶盖，轻轻

17、震摇，静置分层，取上层液至褐色样品瓶 中，加入少量无水硫酸钠，供作检液。注：三氟化硼为有毒物质，相关实验需于抽气柜内进行。鉴别试验及脂肪酸含量测定：精确量取检液及标准溶液各1注入气相层析仪中，参照下列层析条件进行气相层析，就检液与标准溶液所得波峰之滞留时间比较鉴别之，并依下列计算式求出各脂肪酸之含量（）：检体中各脂肪酸甲基酯之含量（Wfamex）:z、 Ac X RxXWisX 1.034Wfambi （g）=AsAx：各脂肪酸甲基酯之波峰面积。Ais:内部标准品之波峰面积。Rx：各脂肪酸甲基酯与二十一烷酸甲基酯在火焰离子检出器之相对反应系数，详如表Wis：内部标准品之添加量（g）。1.004

18、:二十一烷酸甘油酯转变为甲基酯之系数。检体中脂肪之总含量（）:检鞭中脂肪之舞含量（%）；尸）刈。WWfamex :检体中各脂肪酸甲基酯之含量（ g）。Ftagx :各脂肪酸甲基酯转换为三酸甘油酯之系数，详如表二。W ：取样分析检体之重量（g）。检体中各脂肪酸之含量（Wx）:Wx （ g） = W FAMEx X F faxWfamex :检体中各脂肪酸甲基酯之含量（ g）。Ffax：各脂肪酸甲基酯转换为脂肪酸之系数，详如表二。检体中饱和脂肪酸之含量（%）:检髓中6m瞅酸之含量%）工 WsKFJucXlOOW2 Wsafax :由2.9.3节所得之各饱和脂肪酸之含量总和（ g）。W ：取样分析检

19、体之重量（g）。2.9.5.检体中顺式单元不饱和脂肪酸之含量（%）：检鞭中JW式单元不能和肪酸之含量（%）=2 WmufjucXI 002 Wmufax :由2.9.3节所得之各顺式单元不饱和脂肪酸之含量总和（ g）W ：取样分析检体之重量（g）。2.9.6.检体中顺式多元不饱和脂肪酸之含量（%）:横醴中IB式多元不跑和3旨肪酸之含量（%） WpufjXIQOE WPUFAx :由2.9.3节所得之各顺式多元不饱和脂肪酸之含量总和(g)。W ：取样分析检体之重量(g)。检体中反式脂肪酸之含量(%):检瞿中反挪面酸之含量(%)弋刈口。W2 Wtfax :由2.9.3节所得之各反式脂肪酸之含量总和

20、(g)。W ：取样分析检体之重量(g)。气相层析测定条件：层析管温度：初温：170 C, 40 min温度上升速率：3C/min终温：200 C, 25 min检出器温度：300 c注入器温度：250 c移动相气体氨气流速：0.75 mL/min分流比：40: 1附注：1、本检验方法最低检出限量为0.05% o2、食品中若有影响检验结果之物质，应自行探讨。3、各脂肪酸甲基酯层析图谱，请参考 The American Oil Chemists Society Official Method Ce 1h-05各脂肪酸甲基酯与二十一烷酸甲基酯在火焰离子检出器之相对反应系数脂肪酸Rx脂肪酸Rx脂肪酸R

21、x脂肪酸Rx4 :01.574214:11.058718:21.008722:10.98815:01.432415:01.054018:31.001722:20.98256:01.337815:11.045718:40.994922:30.97697 :01.270216:01.042219:01.014222:40.97138 :01.219516:11.034520:01.006722:50.96559 :01.180216:21.026720:11.000522:60.959910 :01.148616:31.018920:20.994323:00.988211 :01.122816:41.011120:30.988024:00.983012 :01.101317:01.031820:40.981924:10.977912 :11.091017:11.024420:50.966513 :01.083118:01.022521 :01.000014 :01.067