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1、同济大学附属同济医院检验科生化组项目操作指导书TJYYJYKSH/XMZ115第2版标题:血清尿酸(UA)测定第章 第15节第 PAGE 3 页 共 NUMPAGES 3 页1. 目的:保证UA检测结果准确、可靠2. 适用范围:UA在全自动生化分析仪上的检测3. 项目名称:UA4. 检测方法:尿酸酶-过氧化物酶偶联法原理:样品和加入试剂R1(缓冲液/酶/TOOS),加入试剂R2(缓冲液/酶/4-氨基安替比林),启动反应: 尿酸酶 尿酸 + O2 +2H20 尿囊素 + CO2 + H202尿酸在尿酸酶催化下,氧化生成尿囊素和过氧化氢。 过氧化物酶POD2H2O2 + H+ + TOOS + 4
2、-氨基安替比林 醌亚胺有色物质+ 4H2OTOOS:N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺过氧化氢与4-氨基安替比林和TOOS在过氧化物酶的作用下,生成有色物质(醌亚胺化合物),其色泽与样品中尿酸浓度成正比。6. 试剂:6.1 检测试剂:6.1.1 品牌:罗氏6.1.2 货号:R1:11929429 216; R2:1929437 2166.1.3 包装规格:R1:6258 ml ; R2:668 ml6.1.4 试剂组成:R1:缓冲液/酶/TOOS磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪酸聚乙二醇醚:4.8%; 抗坏血酸氧化酶: 5 U/
3、mlR2:缓冲液/酶/4-氨基安替比林磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH7.8;过氧化物酶: 1 U/ml;铁氰化钾:0.30mmol/L; 尿酸酶: 0.5 U/ml;4-AAP: 3 mmol/L;6.2 标准品:罗氏C.F.A.S.混合定标液7. 仪器:HITACHI 7180 生化分析仪8. 操作:自动生化分析仪测定,具体参数见附录。 线性范围:11.9 1487 umol/L 参考范围:210 420 umol/L11. 临床意义:11.1 血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸增高,但有时亦会出现正常尿酸值.11.2 在核酸代谢增加时,如白血病,多发性骨髓瘤,真性红
4、细胞增多症等血清尿酸值亦常见增高.11.3 在肾功能减退时,常伴有血清尿酸增高.11.4 在氯仿中毒,四氯化碳中毒及铅中毒,子痫,妊娠反应及食用富含核酸的食物等,均可引起血中尿酸增高. 标本要求:血清、血浆(非EDTA、枸橼酸、草酸盐抗凝)标本。以空腹时采血为佳,但有节制的早餐不会使尿酸明显升高。血样本采集应避免在过度的肌运动后或暴露于强光下,否则会使结果升高。标本在室温中稳定3天。13. 注意事项:13.1 遇高浓度 VitC 的标本,可使测定结果偏低。13.2 红细胞内有多种非特异性还原物资存在,因此用血清测定比用全血好。13.3 以甲醛为防腐剂的商品尿酸标准液,仅可用于磷钨酸还原法,不能用于尿酸酶法。14. 参考文献
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