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文档简介

1、同济大学附属同济医院检验科生化组仪器操作指导书TJYYJYKSH/YQZ203第2版标题:全自动电泳仪操作指导书第2章第3节第 PAGE 5 页 共 NUMPAGES 5 页1. 目的:保证全自动电泳仪的正确和正常使用,按时、准确完成蛋白电泳和LDH同工酶的检测报告2. 适用范围:同济大学附属同济医院检验科生化室的所有成员3. 原理:在某个设定的电场中,带电粒子在支持介质中可向与其所带电荷相反的电极方向移动(既带有负电荷的粒子向正极方向移动;带有正电荷的粒子向负极方向移动)。由于很多有机化合物是两性物质,在不同介质中的电荷受pH的变化而不同。这就是电泳的基本原理。将电泳仪器的电源、电泳槽以及电

2、泳条带的分析装备3部分结构组合,并对电泳的全过程采用计算机控制操作,称为全自动电泳仪。 Helena公司EZ-Scan扫描程序和一台个人电脑、显示器及打印机以及合适的Helena扫描光密度计,通过对电泳图谱进行分析,达到体外诊断的目的。4. 型号:Helena公司的REP全自动电泳分析系统、EDC光密度扫描仪5. 产地:美国6. 技术特性:6.1 利用一个非限制性测试数字,一次可扫描99个样本,在几秒钟内对贮存的数据进行检索,并有全面的编辑功能,以便可选择某一区带,调节基线,在文件中插入评语等。6.2 分析速度:可在30分钟内完成60个样品的电泳。6.3 分析能力:REP自动化电泳仪可开展的电

3、泳分析测定项目十多项,可分析血或尿液样品,包括常规电泳(血清蛋白、同工酶、脂蛋白、血红蛋白、尿蛋白等)和免疫电泳。7. 实验室使用环境: 电压:220V 温度:15 308. 责任人:马丽9. 相关资料:EZ-Scan扫描程序,电脑,推车,操作手册10 操作方法:10.1 REP的操作10.1.1 打开主电源开关,电脑自行启动,选择“7”,按回车键,进入Program Selection Menu 菜单10.1.2 打开REP的电源开关10.1.3 在Program Selection Menu菜单中选择“2REP”, 按回车键,屏幕显示:Loading, REP开始进入运行程序及自检,自检通

4、过后显示电泳菜单界面10.1.4 准备试剂:LDH同工酶测定时按要求溶解干粉底物,具体要求见表1,蛋白电泳预先 配好染液和脱色液10.1.5 在电泳仪右侧的检体板上的WASH槽加蒸馏水,RINSE槽加清洗液,所加的量为2/3 槽,中间放一张滤纸10.1.6 取5075l样本放于样本杯中,避免产生气泡,并置于检体板上相应位置,具体要求见表110.1.7 打开电泳槽盖,加入一定量的界面液10.1.8 从试剂袋中取出琼脂片,拿掉琼脂片上的保护膜,按照圆孔在左长孔在右的方向放入电泳槽,琼脂片和温控板之间不可产生气泡,将多余的界面液擦掉10.1.9 测定项目为蛋白电泳时,将碳棒(黑色)置于琼脂片两端的外

5、侧;测定项目为LDH 同工酶时,将碳棒(黑色)置于琼脂片两端的外侧,玻璃棒(白色)置于琼脂片两端的内侧,盖紧电泳槽盖10.1.10 测定项目为LDH同工酶时,将溶解好的试剂放在试剂槽相应位置,具体要求见表1琼脂片大小与试剂用量关系:(表1)琼脂片大小(人份)样品位置 A B基质试剂稀释量ml试剂对应位置(颜色)30人份 1-15 16-301.5蓝16人份 4-11 19-261绿8人份 2-5 17-200.7黄10.1.11 在TESTS处用键盘上的PageUp、PageDown选择适当的测试项目,按F1键开始运行10.1.12 电泳结束后,在TESTS用PageUp、PageDown选择

6、WASH,清洗加样针,清洗结 束后,按F5键退出系统10.2 染色:10.2.1 取出已跑好的电泳片,除去盐桥,准备染色10.2.2 打开染色仪,将电泳片反置于染色板上,拧紧各个开关,选择SPE选项,按START 键,开始染色、烘干10.2.3 染色结束后,拧松各个开关,关掉染色仪电源10.3 扫描:10.3.1 打开扫描仪的电源10.3.2 在Program Selection Menu菜单中选择“3CEZSCAN”,按回车键,进入EZ-Scan主菜单10.3.3 电泳片按照圆孔在上长孔在下的方向置于扫描架上,用磁铁固定,关上门10.3.4 选择主菜单中的病人资料,按回车键10.3.5 选择

7、工作单,按回车键,出现下拉菜单,根据本次测试选择相应的工作单,运用键盘上的、键选择,按回车键确认10.3.6 选择进入,按回车键,光标移到工作菜单内,根据提示输入病人资料,每次正确输 入后,按回车键,继续下一个样本的输入,当所有样本的资料输入后,按Esc键回到主菜单10.3.7 选择主菜单中的扫描,按回车键10.3.8 选择工作单,按回车键,出现下拉菜单,根据本次测试选择相应的工作单,运用、键选择,按回车键确认10.3.9 选择测试,按回车键,出现下拉菜单,根据本次测试选择相应的测试项目10.3.10 选择参数,按回车键,根据提示内容设定10.3.11 选择开始,按回车键,仪器开始自动扫描10

8、.4 扫描图形的编辑:10.4.1 将光标位于图形上,按回车键,在屏幕左侧会显示编辑命令10.4.2 用鼠标或键盘上的上下左右箭头移动光标到所需的编辑命令10.4.3 删除区带标志:将光标移到要删除区带的标志附近,按Delete键,区带标志被删除10.4.4 插入区带标志:将光标移到要插入区带标志的位置,按Insert键,在图形上出现区 带标志10.4.5 当编辑结束时,按Esc键,屏幕显示菜单,把光标移到所需要的操作的功能,按回 车键即可10.5 血清蛋白电泳刀锋法操作:10.5.1 测定人份的不同有不同的加样位置: 加样位置 A B C 60人份 1 20 2140 4160 30人份 5

9、 14 2534 4554 18人份 27 2227 424710.5.2 按相应位置手工加血清12-17ul于样本盘中10.5.3 胶片的准备:取出胶片 用滤纸吸去多余的饱和液 将一定量的界面液加到电泳槽上 胶片平放于电泳槽中10.5.4 将自动加样器置于样本盘上方,在相应位置(2、9、16)放好加样刀锋,按自动加样器上的上下键使刀锋浸入样本中,吸样30秒10.5.5 时间到,刀锋上升,转移加样器至准备好的胶片上,按上下键使刀锋置于琼脂上,点样30秒10.5.6 时间到,移开加样器,放上碳棒,盖上电泳槽盖,准备电泳10.5.7 清洗加样盘、刀锋11. 维护的方法:11.1 清洁加样针:每次使用过加样针后,用WASH程序清洗11.2 检体板使用后,用去离子水漂洗11.3 工程师定期来保养11.4 仪器故障,及时报修,做好维修记录12. 注意事项:12.1 REP开机后,上部运行的Grant

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