同化激素类概述

1、同化激素类概述7.1 概述同化激素 亦称蛋白同化激素，是一种能够促进细胞的生长与分化，使肌肉扩增，增强骨头的强度与大小的甾体激素。近年来人工合成的一些衍生物,其雄激素作用大为减弱,而同化作用则保留或增强,这些衍生物称同化激素。雄激素能明显地促进蛋白质合成(同化作用),能使肌肉发达,体重增加;同时氨基酸分解减少(异化作用),使尿素生成减少降低氮质血症。但使用雄激素常可出现男性化现象,因而限制了它的应用。同化激素主要用于蛋白质同化或吸收不足、降低亢进和损失过多等情况。畜牧业中使用同化激素,可以很快产生显著和直接的经济效益,因此对生产者有很大的吸引力。17.2 性状、药动学及残留情况17.2.1 内

2、源性激素性激素是由性腺所分泌，肾上腺皮质及胎盘也少有产生，他们属类固醇激素，包括雄激素、雌激素及孕激素。睾酮、孕酮和雌二醇为最具活性的天然激素，在畜牧业中应用主要作为生长促进剂。（1） 雌二醇该品为白色或乳白色结晶性粉末；无臭。在二氧六环或丙酮中溶解，在乙醇中略溶，在水中不溶。内服后胃肠道吸收快，经肝脏首先代谢而失效。与血浆蛋白有广泛结合，与蛋白质结合少，主要与性甾体结合球蛋白。（2）孕酮白色或几乎白色的结晶性粉末，无臭，在氯仿中极易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，水中不溶。肠道吸收后迅速在肝脏内失活。舌下、直肠、阴道给药有效，肌肉注射吸收迅速，血中半衰期仅几分钟。动物经孕酮处理后，可食组织

3、中残留量极低。（3）睾酮白色或类白色结晶粉末，无臭，在氯仿中极易溶解，在乙醇或乙醚中易溶，在醋酸乙酯中溶解，在植物油中略溶，在水中不溶。17.2.2 外源性激素外源性激素是一类蛋白同化作用强、雄激素作用较弱的睾酮衍生物。药理作用和不良反应与雄激素有许多相同之处，促进蛋白质合成能力强，雄性化的不良影响较雄激素小。（1）去氢甲睾酮蛋白同化作用强于雄激素样作用，孕激素样活性小能促进蛋白质合成，抑制蛋白质异生，增进食欲，使肌肉生长，体重增加促进钙磷在骨中沉积，加速骨骼生长促进组织新生和创伤修复降低血清胆固醇（2）司坦唑醇蛋白同化作用强，为甲睾酮的30倍，雄激素活性仅为其四分之一能促进蛋白质合成，抑制蛋

4、白质异生降低血清胆固醇，甘油三酯水平促进钙磷在骨中沉积，减轻骨髓抑制男性不良反应小主要用于预防遗传性血管性水肿（3）醋酸甲羟孕酮作用与黄体酮相似,孕激素活性强,无雌激素和雄激素活性,有抗雌激素作用。内服、注射均有效。内服在胃肠道吸收,在肝内降解。肌内注射后23天血药浓度达到峰值。血药峰值越高,药物清除越快。肌注150mg后69个月血中才检不出药物。（4）去甲睾酮牛注射去甲睾酮后,脂肪中残留能被检出,并持续73天;尿中残留低于1g/kg。内服后脂肪中残留未被检出,但尿中残留可检出。（5）醋酸甲地孕酮本品为孕激素对垂体促性腺激素的释放有一定的抑制作用,但比左炔诺孕酮和炔诺酮为弱。不具有雌激素和雄激

5、素样活性,但有明显抗雌激素作用。与雌激素合用,抑制排卵。动物致畸试验表明对家兔具有死胎率增加和致畸作用。（6）醋酸美仑孕酮内服时孕激素作用约为黄体酮的75倍,无雌激素和雄激素活性,具有显著排卵抑制作用。小母牛用药后,母药和代谢物主要由粪便排出。停药6h,肝、脂肪、肾和肌肉组织中的残留量分别为915g/kg、78g/kg、1.21.8g/kg和0.51g/kg。脂肪、肝、肾和肌肉中母药残留量分别占总残留的80%、37%、30%和45%。美国FDA规定休药期48h,但欧盟禁止使用。17.3 样品处理17.3.1 提取液体样品(奶、血液、尿液)提取前需要脱脂肪,通常在4 、7000g离心,除去浮在上

6、层的脂肪，用水或磷酸盐缓冲液稀释。半固体样品(肌肉、肝、肾)先要用切碎机或匀浆器进行组织破碎，提取均质，40-60 下加热，使脂肪融化成液体。粗提取液的净化方法包括液-液萃取、固相萃取法、液相色谱、免疫亲和色谱和超临界流体色谱等。为了达到更好的纯化效果,可将几种方法结合应用。液-液萃取大多是去除水溶性提取液中的脂肪,例如,乙腈或甲醇提取液中加入正己烷或异辛烷,可脱去脂类物质。17.3.2 净化固相萃取法固相萃取法具有简便、快速、经济等优点,已广泛应用于激素类药物的净化。正相柱常用硅胶、氧化铝、氰基型和氨基型吸附剂,反相柱常用C18和C8吸附剂。固相萃取柱的净化效果有时并不能满足质谱检测的要求,

7、因此有人将固相萃取法与色谱法相结合,对样品提取液作更高的纯化。17.4 分析方法 生物样品中同化激素类的分析主要采用色谱法,包括薄层色谱法、气相色谱法和液相色谱法。17.4.1 薄层色谱法薄层色谱法具有快速、经济等优点,适合残留分析的初筛。为了提高薄层色谱分析的灵敏度和选择性,在显色剂研究上做了大量的工作,一些与雌酮、雌二醇、己烯雌酚、玉米赤霉醇和玉米赤霉烯醇发生显色反应的染料被相继报道。重氮基染料与雌激素反应,形成重氮基衍生物、酚基和二羟基苯甲酸内酯类的雌激素衍生物,它们的色泽强度各不相同。此外,科林斯红和快蓝BB与激素反应成盐后,具有很强的色泽。17.4.2 气相色谱法20世纪80年代出现

8、的毛细管GC使GC-MS结构简化、仪器成本下降。毛细管GC和SIM检测方式使GC-MS发展成为一种成熟的、集高效分离、高灵敏度检测和结构鉴定为一体的分析技术。同化激素及其代谢产物的结构中含有多个羟基或酮基等极性基团,为高极性、难挥发、热稳定差的化合物,GC法难以直接分析,因此需衍生化使形成易挥发、热稳定性好的衍生物,以提高其色谱性能。17.4.3 液相色谱法HPLC比GC更常用于激素的分析。分析极性较大的雌激素结合物常采用阴离子交换色谱法或反相离子对色谱法,尤其是后者分离效果更好。环糊精色谱也被用于雌激素的分析,该法能有效地分离结构异构的雌激素结合物。雌二醇和雌三醇在200nm处有一中等强度的

9、较尖的紫外吸收峰,在280nm处有一较宽的弱吸收峰。孕酮和睾酮在240nm处有较强紫外吸收,紫外检测RP-HPLC法是分析生物样品的主要方法。一般紫外检测可获得足够的灵敏度,但荧光检测更适合于组织样品的测定。RP-HPLC和NP-HPLC均被用于雄激素的分析。体液中睾酮含量较高时,可采用紫外检测;否则,可将睾酮与衍生化试剂反应制备成荧光衍生物后再用紫外检测,或采用高灵敏度的荧光检测器进行检测。Lagana等报道LC法检测鸡肉、牛肉和牛肝中9种同化激素(群勃龙、睾酮、孕酮、雌二醇、己烯雌酚、左环十四酮酚、玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、玉米赤霉醇)残留。Andresen等报道了LC法测定脂肪中醋酸美仑孕酮、醋酸甲地孕酮和醋酸氯地孕酮的残留量。万美梅等采用LC-电化学检测法测定动物组织中己烯雌酚残留量。Davoli等报道了在线萃取液相色谱/快