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文档简介

1、不同浓度的去污剂对青蛙的病理性影响研究 0702班 侯 静11 论文题目2 论文选题依据3 研究目的与意义4 试验主要原理5 试验过程6 实验结果与分析21 论文题目不同浓度的去污剂对青蛙的病理性研究32 论文选题依据2.1两栖动物的形态学发育与机理研究 青蛙属于动物界、脊索动物们、两栖纲、无尾目、始蛙亚目、中蛙亚目、新蛙亚目,卵一般产于水中,孵化成蝌蚪,用腮呼吸,经过变态发育为成体。成体基本无尾,主要用肺呼吸,但多数皮肤也有部分呼吸功能。4 因为青蛙是以昆虫和其他无脊椎动物为主食,因此必须栖息於水边,作为生活在水体中的代表类群,由于其皮肤的高渗透性,必然会受到水体污染物的不利影响,产生各种不

2、良的生态效应。5 乔志刚,李学军曾做过青蛙的个体发育及食性观察的研究,并在解剖镜下和显微镜下观察了青蛙从孵出至变成幼蛙期间的个体发育过程6 青蛙由卵孵出成蝌蚪至发育变态为幼蛙大约需要70-90天,这期间是青蛙个体发育过程中各器官系统变化最激烈的时期。刚孵化出来的蝌蚪,身体呈纺锤形,无四肢、口和内鳃,生有侧扁的长尾,头部两侧生有分枝的外鳃,吸附在水草上,靠体内残存的卵黄供给营养。7经过几天以后,长出了口,能够摄食水中的微生物。再过些时候,外鳃消失,长出内鳃,身体外面逐渐出现侧线,心脏发育成一心房一心室,从外部形态到内部构造都很像鱼。大约再过40天,蝌蚪又发生了进一步变化,先开始长出后肢,然后又长

3、出前肢;尾部逐渐缩短;内鳃消失,肺形成;心脏由一心房一心室变为二心房二心室;外部形态和内部构造不再像鱼,蝌蚪已变成了幼小的青蛙,幼蛙离水登陆,逐渐发育为成蛙8 2.2 动物早期的组织病理影响研 从最古老的脊椎动物鱼到高等的哺乳类动物大鼠,仔猪,国内外做过很多有关肝脏,肾脏的组织病理学研究。Kumar和Pant通过实验观察比较了过量铜对文昌鱼及脊椎动物玫瑰无须钯急性毒性及组织病理学影响,9 结果表明用不同亚致死剂量处理鱼的肝脏出现典型的包括肝细胞坏死、解体等组织学损伤,且损伤程度呈现剂量依赖性。10 刘俊伟,张海棠,司红英等进行过仔猪铁中毒的组织病理学变化方面的研究。试验采用冰冻切片、组织学和组

4、织化学染色技术对临床送诊病仔猪的淋巴结、脾脏、肝脏、肺脏和肾脏等器官进行了解剖病理学和组织病理学的观察与研究。结果表明,肝脏器官的损伤有肝细胞个体变小肝血窦变宽但肝细胞并无变性和坏死。11 肝小叶周围结缔组织内的巨噬细胞和肝血窦内的枯否氏细胞(Kupffer cells)均含有蓝色的含铁血黄素颗粒。在肝血窦、中央静脉的内皮细胞内亦含有不同数量的含铁血黄素颗粒但在肝细胞内却看不到含铁血黄素颗粒。肾脏损伤有肾小体血管球(Glomerulus)萎缩变小,肾小囊(Renalvesicle)变得宽大。123 研究目的与意义 肝脏是动物消化系统中最大的消化腺,同时又是重要的解毒器官。肾脏是生成尿液清除体内

5、代谢产物及某些废物、毒物的重要器官,同时又具有重吸收功能 。肝脏、肾脏发生病变将严重影响动物的新陈代谢。133 研究目的与意义 本研究以黑斑蛙为试验对象,在单一急性毒性试验的基础上,研究洗衣粉(主要成分SDS)对青蛙生活状况、肝脏及其肾脏器官的影响,探讨SDS对青蛙的毒性效应和致毒机理,为洗涤剂对青蛙的影响评价提供毒理学依据,为人类保护青蛙提供参考价值。144 试验主要原理 石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法,不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺

6、乏反差,在一般光镜下不易清15 楚区别出,组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡,而能清晰辨认其形态结构。 16 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。本试验在对青蛙处理的基础上,取其肾脏、肝脏并制作成石蜡切片后在光学显微镜下观察组织细胞的形态变化。 17 5 试验过程青蛙的喂养肝脏、肾脏取材甲醛固定石蜡切片的制作石蜡块的制作石蜡块的整修石蜡装片的制作冲洗脱水透明浸蜡包埋切片与展片贴片与拷片染色186 试验结果与分析6.1青蛙的临床表现 青蛙经洗衣粉处理后48h后2,3、4、5号组其运动迟缓,平衡能力变差,72h 后,2、3、4、5组几乎不全浸在溶液中,活动能力显著下降,1号组运动能力变差,其它各组较前运动也迟缓,平衡能力也变差。96h后除对照组及1号有一个青蛙活动较正常外,其余各青蛙均浸在溶液中活动能力严重变小。 , 196.2 青蛙的组织病理学检查 正常6号对照组:青蛙肝脏肝细胞形态规则,细胞索排列整齐,肝细胞与肝血窦以中央静脉为中心向周围呈放射状排列(见下图)20 5号高剂量处理组青蛙肝细胞线粒体破裂,胞浆疏松、淡染

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