实验6 细菌在自然界和人体的分布及 1

1、实验六 细菌的分布及外界因素对细菌的影响1目的要求1、了解细菌在自然界和正常人体的分布2、理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义3、掌握外界因素对微生物的不利影响2基本概念1、消毒：用物理或化学方法杀死物体上病原微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮肤涂擦；用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用于消毒的化学药物称为消毒剂。2、灭菌：用物理或化学方法清除或杀灭物体上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物、繁殖体和细菌的芽胞）的方法。3、无菌操作：防止微生物进入机体或物体的操作方法，称无菌操作或无菌技术。如外科手术，细菌接种等。 3外界因素杀菌的原理热力杀菌的原理：是通过加热脱水干燥和大分子变性。可

2、使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，新陈代谢发生障碍，细菌因而死亡。紫外线杀菌的原理：干扰DNA的复制与转录；导致细菌变异或死亡。 化学消毒剂杀菌的原理：使微生物蛋白质凝固与变性，致使细菌代谢发生障碍而死亡；干扰微生物酶系统和影响其代谢；损伤细胞膜：醇类、酚类、表面活性剂等损伤细菌细胞膜，引起细胞膜的渗透性改变，导致细菌死亡。 4实验材料菌种：白色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌；培养基：普通平板、液体培养管试剂：2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌生理盐水器材：接种环、接种针、酒精灯、镊子等5实验内容与方法一、细菌分布（一）细菌在自然界的分布（二）细菌在正常人体的分布二、外界因素对细

3、菌的不利影响（一）湿热对细菌的杀灭作用（二）紫外线对细菌的杀灭作用（三）消毒剂对细菌的杀灭作用（四）抗生素对细菌的杀灭作用6一、细菌的分布1、空气中的细菌检查2、水（自来水）中细菌的检查3、周围环境中细菌检查自由发挥（如笔、硬币）4、手和咽喉中细菌的检查7二、外界因素对细菌的影响（一）湿热对细菌的杀灭作用（二）紫外线对细菌的杀灭作用（三）消毒剂对细菌的杀灭作用（四）抗生素对细菌的杀灭作用8（一）温度对细菌的影响原理：细菌适宜生长温度：37度加热到100度细菌繁殖体死亡有芽胞的细菌不会死亡（如枯草芽胞杆菌）检测对象：大肠杆菌（或白葡菌）、枯草杆菌步骤：分别取上述两种细菌，设置对照组后，分别沸水浴

4、10min，培养24h，看结果9目的要求： 认识高温（煮沸法）对细菌繁殖体和芽胞的作用材料： 1、菌种：枯草杆菌（有芽胞） 变形杆菌 （无芽胞） 2、肉汤培养基、水浴锅 1037 24h枯草杆菌枯草杆菌大肠杆菌大肠杆菌100 5min100 5min菌膜澄清浑浊11普通条件培养下细菌生长状况枯草杆菌大肠杆菌12煮沸杀菌后细菌生长状况枯草杆菌大肠杆菌13（二）紫外线对细菌的影响原理：紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体，使细菌死亡取有芽胞细菌（枯草杆菌）、无芽胞细菌，设置对照后，以紫外线照射30min，培养24h，看结果14接种大肠杆菌接种枯草杆菌班级、姓名/学号、大肠 枯草uv30培养箱紫外线杀菌的结果15（三）消毒剂对细菌的影响消毒剂：2%碘酒棉球,75%酒精棉球以碘酒（酒精棉球）消毒手指前后，分别涂抹培养基，培养24h后，看结果16（四）抗生素对细菌的影响（药敏试验 ）平板培养基上徒均匀涂布细菌后，以沾有庆大霉素、头孢曲松、青霉素、环丙沙星的四张纸片贴在培养基表面培养24h后，看结果17目的要求:1、了解抗生素敏感试验的操作方法;2、初步作为抗