化验作业指导书

1、化验作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08发布日期2006-06-06版次A/0页次1/11.目的1.1保证检验和试验工作逐步规范化、科学化和标准化，使产品制造过程的质量更好的处于受控状态。1.2充分发挥检验职能，在保证产品质量/安全的前提下，尽力降低成本。1.3根据技术部要求，合理选择检测项目，提高检测工作效率。2.适用范围化验岗位3.工作职责负责原料、成品的常规检测。4检测4.1饲料及原料常规项目（蛋白、水分、钙、磷、灰分、盐分等）采用的检测方法为容量分析法。4.2常规项目检测方法详见分项作业指导书。4.3所用的设备见分项设备使用指导书。5检验频次及时机5.1原料每批均需检

2、测（感观和理化指标）5.2对于不具备测定条件的原料也应做感观检测，并检查其质量证明文件（化验单、合格证），必要时送权威机构检测。5.3成品检测的频次与时机：成品每批均需感观检验，并根据成品检验项目规定做理化检验，另外根据近期质量情况，采取不定期（选项）化验；当成品感观检验有异常时，必须化验，新产品至少开始一周每批均做化验。6检测项目6.1原料和成品检测项目包括感观检验及理化检验两部分。6.2各种原料检测项目执行原料检验项目规定。6.3成品检测项目为蛋白、钙、磷、灰分、盐分五个常规指标。6.4原料和成品的检验执行作业指导书。7.相关记录：7.1WIA-08-01A原始记录粗蛋白测定作业指导书编

3、制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08-01发布日期2006-06-06版次A/0页次1/21.测定方法凯氏定氮法2.原理凯氏法测定试样中氮的含量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化为硫酸铵，加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，在用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。3.试剂3.1硫酸：分析纯，含量98，无氮3.2混合催化剂：0.4g五水硫酸铜，6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混均3.3氢氧化钠：分析纯，40水溶液（M/V）3.4硼酸：分析纯，2水溶液（M/V）3.5混合指示剂：0.1甲基红乙醇溶液，0.5溴甲酚绿乙醇溶液，两溶液等体积混合

4、，在阴暗处保存期为三个月3.6盐酸标准溶液：用无水碳酸钠或四硼酸钠标定3.7硫酸铵：分析纯，干燥4.试样的选取和制备选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。5.操作步骤5.1试样消煮称取试样0.5000g1.0000g，精确至0.0002，放入消化管中，加入6.4g混合指示剂，与试样混5.2试样的蒸馏合均匀，再加入12ml硫酸，将消化管制于消化炉上消化，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，在加强火力（360450），然后继续加热至少45min。5.2试样制备将试样消煮液冷却，冷却至室温后用水稀释，做为试样分解液。5.2试样蒸馏打开电

5、源开关，H2O开关，蒸馏水即自动进入发生炉内。在250ml三角瓶中加入2%的硼酸吸收液50ml和23滴混合指示剂，将该瓶套在接收管上，并让管口浸沉在硼酸吸收液中。粗蛋白测定作业指导书文 件 编 号WIA-08-01发 布 日 期2006-06-06版 次A/0页 次2/2取消化管，扳动蒸馏消化托盘架，使消化管固定在蒸馏托盘上，开启NaOH开关，注入50ml40%的NaOH溶液。蒸汽发生炉内蒸馏水经12min加热后，开始沸腾，迅速产生蒸汽进入消化管内进行蒸馏，待接收瓶液面高于150ml时，将接收瓶下移，使接收管离开液面，用蒸馏水冲洗出气口，然后取下接收瓶，待滴定用。5.4试样的滴定蒸馏后的吸收液

6、立即用盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色即为终点，同时按上述步骤做空白滴定。5.5结果计算（V2V1）*0.0140*6.25*V粗蛋白质（）=m*V0式中：V2滴定试样时所需盐酸标准溶液的体积，ml；V1滴定空白时所需标准溶液的体积，ml；C盐酸标准溶液的浓度，mol/L；m试样质量，g；V试样分解液总体积，ml；V0试样分解液的蒸馏用体积，ml；0.0140每毫克当量氮的克数；6.25氮换算成蛋白质的平均系数。6注意事项6.1混合指示剂应该在使用时再临时进行混合，一般一次配30ml40ml，单项指示剂配制可保存半年。6.2硫酸铵检测蒸馏装置时，回收率在98%102%之间为正常，用时1

7、05烘干1小时。6.3液体做蛋白时，称量时先固定消化管，称2.000g左右，加硫酸时需缓慢加入，以防止液体喷出，刚开始消化时保持温度在120130，赶走水分，防止喷射以及对下一步蒸馏的影响。水分测定作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08-02发布日期2006-06-06版次A/0页次1/11.适用范围本方法适用于测定配合饲料和单一饲料中水分的含量，但用做饲料的奶制品，动物、植物油脂和矿物质则除外。2.原理试样在1052烘箱内，在大气压下烘干，直到恒重，逸失的重量为水分。3.仪器设备3.1电子天平：0.0001g3.2电热恒温烘箱：可控温度为10523.3称样皿：玻璃或铝质，直径

8、40mm以上，高25mm以下3.4干燥器：用氯化钙（干燥试剂）或变色硅胶做干燥剂4.测定步骤洁净称样皿，在1052烘箱中烘1h，取出，在干燥器中冷却30min，称准至0.0002g。用称样皿称取两份平行试样，每份2g左右，准确至0.0002g，不盖称样皿盖，在1052烘箱中烘3h，取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min，称重。再同样烘干1h，冷却，称重，直至两次称重量差小于0.0002g。5.结果计算：（W1W2）*100水分（%）=W1W0式中：W1105烘干前试样及称样皿重，g；W2105烘干后试样及称样皿重，g；W0已恒重的称样皿重，g。6.注意事项：6.1水分放在托盘上烘干，烘干

9、后取出时要盖上盖子。6.2放入水分时，应使烘箱达到105时再放入，以保证升温到105的时间最短，减少影响。6.3称量时应注意按顺序保证先取出的先称量，105烘干时间在5min之内,130烘干时间在1min之内。粗灰分测定作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号 WIA-08-03发布日期2006-06-06版次A/0页次1/11内容与适应范围本方法规定了测定饲料中粗灰分的测定方法；本方法适用于配合饲料、浓缩料及单一饲料中粗灰分的测定。2方法原理试样在550灼烧后所得残渣，用质量百分率表示。残渣中主主要是氧化物，盐类等矿物质，也包括混入饲料中有砂石、土等，故称粗灰分。3仪器与设备3.1样品粉碎

10、机3.2电子天平：0.0001g3.3高温炉：550203.4坩埚：25mm或50mm3.5干燥器4.测定步骤4.1坩埚的恒重：将干净坩埚放入高温炉，在55020下，灼烧2h,等温度降至300以下时，放入干燥器冷却第隔10min打开一次，30min后称其质量。4.2样品的炭化：在已恒重的坩埚中秤取2.00005.0000g试样，准确至0.0002g，在电炉上小心炭化，在炭化过程中，应将试样在较低温度下（600W）加热至无烟（0.5h1h），才升温灼烧至样品无炭颗粒。4.3样品的灰化：把炭化好的样品放入高温炉中，于55020下灼烧4h以上，等温度降至300以下时，取出，放入干燥器冷却，每隔10m

11、in打开一次，30min后称其质量。5结果计算m2-m0粗灰分（）=m1-m0式中：m0为恒重空坩埚的质量，gm1为坩埚加试样的质量，gm2为灰化后坩埚加灰分的质量，g所得结果应表示为0.016允许差6.1应同时做至少两个平行样，算其平均值为分析结果;6.2粗灰分含量在5以上的允许相对偏差为1；粗灰分含量在5以下的允许相对偏差为5.7注意事项：7.1要保证先取出的坩埚先称量。7.2炭化时最好不要开排风扇。水溶性氯化物测定作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号 WIA-08-04发布日期2006-06-06版次A/0页次1/11测定方法本方法规定用硝酸银直接滴定测定饲料中可溶性氯化物的方法。

12、2适用范围本方法适用于饲料原料、各种配合饲料、浓缩饲料和单一饲料，检测范围氯含量为060mg。3方法原理溶液澄清，在酸性条件下，加入硝酸银溶液使样品中的氯化物形成氯化银溶液，以10的铬酸钾为指示剂，呈现砖红色为滴定终点，根据消耗硝酸银的量，计算出氯化物的含量。3试剂3.1 10%铬酸钾指示剂3.2 硝酸银4测定步骤称取510g样品，准确至0.001g，准确加蒸馏水200ml，搅拌15min，放置15min，准确移取上清液20ml，加蒸馏水50ml，10%铬酸钾指示剂1ml，用硝酸银标准溶液滴定，呈现砖红色，且1min不褪色为终点。5结果计算 V2*C*200*0.05845*100NaCl(%

13、)= m*20式中：m样品质量，g；V2滴定消耗的硝酸银溶液体积，ml；C硝酸银的摩尔浓度，mol/L；0.05845与1.00ml硝酸银标准溶液c(AgNO3)=1.000mol/L相当的以克数表示的氯化钠的质量；6允许差每个样品应取两份平行样进行测定，以算术平均值分析结果。氯化钠含量在3%以下（含3%），允许相对偏差0.05；氯化钠含量在3%以上，允许相对偏差3%。7注意事项滴定时，不能对准强光，也不能光线太暗，以免影响滴定。钙测定作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08-05发布日期2006-06-06版 次A/0页次1/21测定方法乙二胺四乙酸二钠络合滴定法2适用范围配合

14、饲料、浓缩料、预混合料和单一饲料。3原理将试样中有机物破坏，使钙溶解制备成溶液，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用EDTA标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。4试剂4.1盐酸：1+3（V1+V2）4.2氢氧化钾：200g/L4.3三乙醇胺水溶液：1+1（V1+V2）4.4乙二胺水溶液：1+1（V1+V2）4.5淀粉溶液：10g/L,称取1g可溶性淀粉入200ml烧杯中，加5ml水润湿，再加入95ml沸水搅拌均匀，煮沸，冷却备用（现配现用）。4.6孔雀石绿水溶液：1g/L4.7钙黄绿素甲基百里香酚蓝指示剂：0.1g钙黄绿素与0.13g

15、甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用。4.8钙标准溶液 0.0010g/mL称取2.497g于105110干燥至恒重的基准CaCO3，溶于40ml盐酸中，加热赶除CO2，冷却，用水转移至1000ml容量瓶中，稀释至刻度。4.9EDTA标准溶液的配制：称取3.8gEDTA入200ml烧杯中，加200ml水，加热溶解冷却后转至试剂瓶中，转至1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度。EDTA的标定：准确吸取钙标液10.0ml按试样测定法进行滴定。滴定度的计算： c*V T= V0式中： TEDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/ml；钙测定作业指导书文 件 编 号WIA-08-05发 布

16、 日 期2006-06-06版 次A/0页 次2/2 C钙标液的浓度，g/ml； V所取钙标液的体积，ml； V0EDTA标准溶液的用量，ml。5仪器设备5.1 电子天平：0.0001g5.2 高温炉：电加热，可控温度在550205.3 坩埚：瓷制5.4 容量瓶：100ml5.5 滴定管：酸式，25ml5.6 玻璃漏斗5.7 定量滤纸：中速，79cm5.8 移液管：10ml5.9 烧杯：200ml6测定步骤6.1 试样的分解取测定粗灰分后的盛灰坩埚，加入盐酸10ml和浓硝酸数滴（或1ml），小心煮沸，保持微沸约10min，待体积缩至原来的2/3时停止加热，冷却，转入100ml容量瓶中，用蒸馏水

17、定容，摇匀，为试样分解液。6.2 测定准确移取试样分解液10ml。加水50ml，加淀粉溶液10ml，三乙醇胺2ml，乙二胺1ml，1滴孔雀石绿，再加氢氧化钾过量10ml（每加一种试剂都须摇匀）。加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。7结果计算 T*V2*V0*100 Ca(%)=m*V1式中：TEDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/ml；V0试样分解液的总体积，ml；V1分取试样分解液的体积，ml；V2实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积，ml；m试样的质量，g。总磷量测定作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08-06发布日期20

18、06-06-06版次A/0页次1/11测定方法钒钼黄显色光度法2适用范围本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料和单一饲料，测定范围磷含量020ug/ml.3方法原理将试样中的有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的(NH4)3PO4NH4VO3MoO3,在波长400nm下进行比色测定。4试剂4.1 盐酸（1+3水溶液）4.2 硝酸4.3 钒钼酸铵显色剂称取偏钒酸铵1.25g，先加入少量水进行溶解，再加硝酸250ml，另称钼酸铵25g，加水400ml溶解之，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用水定容1000ml，避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。4.4 磷标准溶液

19、：将磷酸二氢钾在105干燥1h,在干燥器中冷却后称取0.2195g溶解于水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释到刻度，摇匀，即为50ug/ml的磷标准溶液。5仪器设备5.1 样品粉碎机5.2 分光光度计：有10mm比色皿，可在420nm波长下测定吸光度。5.3 容量瓶： 50，100，1000ml5.4 移液管： 1.0，2.0，3.0，5.0，10ml6测定步骤称取试样25g（精确至0.0002g）于坩埚中，在电炉上小心炭化，再移入高温炉，在550灼烧3h（或测粗灰分后继续进行），取出冷却，加入10ml盐酸溶液和硝酸数滴，小心煮沸10min，冷却后转入100ml容量瓶中，用

20、水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。准确移取试样分解液1ml于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色皿在420nm波长下，用分光光度计测得试样分解液的吸光度，然后进行计算。7结果计算 5*A 总磷（%）= m*1000式中：A吸光度，1；m样品质量，g.8注间事项：比色皿应用软纸或用擦镜纸擦拭，以免划伤比色皿。酸价检测作业指导书编 制赵紫杉审 核批 准文件编号WIA-08-07发布日期2006-06-06版次A/0页次1/11原理酸价（酸值）是指中和1g油脂所含游离脂肪酸所需氢氧化钾的毫克数。酸价高，说明油脂因水解而产生的游离脂肪酸多。酸价可直接说明油脂的新鲜程度和