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1、安徽农业大学病毒学PPT思考题第一章 绪论1.与其他生物相比,病毒具有什么特点?病毒是一类既具有生物大分子属性和生物体基本特征,又具有细胞外感染性颗粒形式和细胞内繁殖性基因形式的十分独特的生物类群。病毒:是介于生命和非生命之间的一种物质形式,是一类比较原始的、有生命特征的、能够自我复制和严格细胞内寄生的非细胞生物。病毒的特点:(1)没有细胞结构;(2)仅有一种类型的核酸;(3)特殊的繁殖方式;(4)缺乏完整的酶系统和能量合成系统,也没有核糖体;(5)绝对的细胞内寄生。2.简述病毒学研究内容及发展趋势。病毒学研究的任务在于阐明病毒的性质及其与宿主的关系,研究的目的在于:(1)通过研究病毒,了解生
2、命的一些基本问题;(2)预防和控制各种病毒性疾病的发生和流行;(3)利用病毒为人类造福。现代病毒学研究出现以下发展趋势:(1)病毒功能基因组学和功能蛋白质组学的研究;(2)病毒分子病理学研究;(3)朊病毒分子生物学与疾病控制;(4)DNA疫苗的研究。第二章 病毒的形态、结构与分类1.病毒有哪些形态?如何测量病毒大小?(1)形态:电子显微镜下的病毒大小、形态多种多样,但多为对称结构,大致可分为球状、杆状和蝌蚪状3种基本形态。随着电子显微镜技术的发展,不断发现新的病毒形态,如子弹状、丝状、卵圆形、砖状、多形性等。(2)病毒体积极其微小,是亚显微的。病毒大小可以用电子显微镜直接、准确地测量。此外,也
3、可通过分级过滤、超速离心、电泳等方法间接的测定。【单位:nm(10-9m)或。】【使用显微测微尺】2.病毒粒子对称体制有哪几种?(1)螺旋对称(烟草花叶病毒TMV)。(2)二十面体对称(动物的腺病毒)。(3)复合对称(大肠杆菌的T偶数噬菌体如T4噬菌体)。(4)复杂对称(痘病毒)。3.病毒的主要化学组成及其功能是什么?从化学组成上看,病毒粒子含有核酸、蛋白质,某些复杂的病毒,特别是动物病毒,除核酸和蛋白质外,还含有脂类、碳水化合物和少量的其他成分。(1)病毒的蛋白:病毒的蛋白可分为结构蛋白和非结构蛋白;结构蛋白存在于病毒粒的核壳、基质和胞膜;非结构蛋白存在于病毒粒内,但不是结构成分。【病毒蛋白
4、质:病毒粒子的蛋白质可分为结构蛋白和非结构蛋白。结构蛋白构成病毒粒子的衣壳,也是囊膜的组成成分,赋予病毒粒子各种不同的形态。非结构蛋白在病毒粒子复制增殖过程中起作用,主要是指存在于病毒粒子中的酶蛋白。】根据功能,还可以将病毒粒子中的蛋白质分为衣壳蛋白、囊膜蛋白和酶蛋白3类。功能:保护病毒核酸;决定病毒感染、吸附的特异性;病毒抗原的主要成分;具有毒性作用;酶的作用。(2)病毒的核酸:病毒核酸编码的基因从几个到几百个。核酸是病毒的基因组,它是病毒粒子中最重要的成分,是遗传信息和生物活力的基础,也是病毒分类鉴定的重要依据。功能:遗传信息载体(遗传功能);致病作用。【(3)病毒的脂质:病毒粒子中的脂质
5、主要是磷脂和胆固醇,分别占50%60%和20%30%。病毒粒子所含的脂质大部分是囊膜的成分,来自宿主细胞的胞膜或核膜,因此具有宿主细胞的某些特性。可高根据囊膜的有无将病毒分为无囊膜的病毒和有囊膜的病毒两类。(4)病毒的糖类:糖是所有病毒核酸的成分之一,核糖与核苷酸共同构成了核酸的骨架。有些病毒除了核酸中的糖之外,还含有其他的糖类。有些病毒囊膜含有糖脂类。功能:细胞识别的信号;糖蛋白还是重要的免疫原。(5)病毒的其他化学成分:多胺和金属离子。有机阳离子:大部分多胺是阳离子,与核酸的磷酰基阴离子具有亲和力;无机阳离子。这些有机离子和无机阳离子均与病毒的核酸结合,而且是无规则的结合,其结合量受环境对
6、离子相对亲和力的影响,这种结合会对病毒的构象产生一定改变,但对病毒粒子的侵染力无明显作用。】4.病毒分类的原则包括哪几方面?目前得到ICTV认可的分类原则是:(1)核酸类型、结构及分子量;(2)病毒的形态和大小;(3)病毒的形态结构;(4)病毒对乙醚、氯仿等脂溶剂的敏感性;(5)病毒血清学性质和抗原性;(6)病毒在细胞培养上的特性;(7)对脂溶剂以外其他理化因子的敏感性;(8)流行病学特点。第三章 病毒的复制1.病毒的复制周期可分为哪几个阶段?试述各阶段的主要过程及特点。自病毒吸附于细胞开始,到产生成熟子代病毒从感染细胞释放到细胞外的复制过程称为病毒的复制周期。一个完整的复制周期包括:吸附、侵
7、入、脱壳、病毒大分子的生物合成、装配和释放阶段。病毒的吸附、侵入和脱壳又称病毒感染的起始。翻译翻译病毒大分子生物合成 (1)吸附。吸附是病毒与细胞表面的相互作用,是病毒复制的第一步。多数病毒的吸附过程一般分两个阶段:病毒粒子吸附到细胞表面,吸附是由于不同带电粒子间因静电引力而结合。病毒与受体的相互作用启动病毒进入细胞的动力学过程。(2)侵入。整个病毒颗粒或其基因组及相关蛋白通过质膜屏障向胞质转运的过程称为侵入。侵入的方式因病毒不同而异,同一病毒也可以不止一种方式侵入。从病毒侵入细胞的方式看,目前发现有3种类型:病毒囊膜和质膜融合;细胞胞吞病毒;病毒直接进入胞浆。(3)脱壳。病毒侵入细胞后,病毒
8、的囊膜和衣壳去除而病毒核酸释放出来的过程称为脱壳。病毒脱壳后病毒的颗粒形式从受染细胞内消失,存在于细胞内的是病毒的基因组。囊膜病毒脱壳包括脱囊膜和脱衣壳两个步骤,无囊膜病毒只需脱衣壳,脱壳方式随不同病毒而异。(4)病毒生物大分子的合成。病毒感染细胞后,利用宿主细胞合成核酸和蛋白质的原料、场所、机制和能量,完成自身大分子的生物合成。病毒的大分子生物合成包括mRNA的转录、基因组的复制和病毒蛋白质合成等。(5)装配和释放。病毒大分子合成产生的结构组分以一定方式结合,组装成完整的子代病毒颗粒,这一复制阶段称为装配。病毒的装配是一个复杂的过程,是病毒复制、成熟和增殖的一个必要步骤。装配。病毒的装配包括
9、两个主要步骤,第一个步骤是衣壳的装配,病毒基因组被识别并包装入衣壳中;第二个步骤是囊膜化过程(对囊膜病毒)。释放。裂解;出芽;细胞外吐。?2.举例说明病毒的特异性吸附与细胞受体的关系。在病毒被吸引到细胞表面后,病毒的表面蛋白(病毒吸附蛋白)能与细胞表面的受体(病毒细胞受体)形成结构互补的结合,这种相互作用是特异的、不可逆的。病毒与受体的相互作用启动了病毒进入细胞的动力学过程。病毒表面上能够识别特异的宿主细胞受体的结构蛋白,称为病毒吸附蛋白(VAP)。病毒吸附蛋白与宿主细胞表面受体结合后,能够启动病毒粒子或者病毒核酸进入到宿主细胞的过程。病毒吸附蛋白受体结合域上某些氨基酸的突变能够影响病毒对受体
10、的识别、细胞嗜性和发病机制。如脊髓灰质炎病毒Mahoney株壳体的单一氨基酸突变可使病毒获得对小鼠的感染性,使小鼠发生脊髓灰质炎。病毒的细胞受体亦称病毒受体,是存在于细胞表面上能被病毒吸附蛋白特异性地识别并与之结合,使病毒侵入细胞和启动感染发生的细胞表面组分。例如狂犬病毒的受体是细胞表面的乙酰胆碱受体,单纯疱疹病毒的受体是硫酸乙酰肝素。不同种系的细胞具有不同病毒的细胞受体,病毒受体的细胞种系特异性决定了病毒的宿主范围。3.以腺病毒、SARS冠状病毒、流感病毒和人类免疫缺陷病毒为例,阐述其基因组的复制过程。病毒的大分子生物合成包括mRNA的转录、基因组的复制和病毒蛋白质合成等。基因组的复制类型:
11、(一)DNA病毒。(1)双链DNA病毒。包括痘病毒、乳多空病毒、腺病毒、疱疹病毒、杆状病毒等。其中,痘病毒粒子携带有依赖DNA的RNA聚合酶,其余均利用宿主的转录酶。这类病毒基因组的复制采用半保留复制模式,母代双链在解链蛋白的作用下解链,然后以单链为模板,按照碱基互补原则,在DNA聚合酶催化下新合成一条新链。这样子代的双链有一条来自母代。(2)单链DNA病毒。如细小病毒。(3)具有RNA中间体的双链DNA。如嗜肝DNA病毒科病毒。(二)RNA病毒。(1)正义单链RNA病毒。可分为两类:一类产生亚基因组mRNA ,一类不产生亚基因组mRNA。产生亚基因组mRNA的正义RNA病毒,包括星状病毒、杯
12、状病毒、披膜病毒、冠状病毒(SARS)、动脉炎病毒等。基因组RNA先指导合成非结构蛋白的前体,包括病毒依赖RNA的RNA聚合酶(RdRp)。这种酶催化RNA复制,同时可转录一种或多种亚基因组mRNA,指导病毒结构蛋白的合成,并与复制的基因组一起装配到子代病毒颗粒中。不产生亚基因组mRNA的病毒,如小RNA病毒和黄病毒等。(2)负义单链RNA病毒。副黏病毒、弹状病毒、丝状病毒、砂粒病毒、正黏病毒(流感病毒)等都属于负义单链RNA病毒。它们具有单链RNA,但不能直接呈现mRNA的作用,借助结合于病毒粒上的依赖RNA的RNA聚合酶产生mRNA并翻译成病毒蛋白。通过反基因组的合成,催化复制子代RNA,
13、并与结构蛋白和依赖RNA的RNA聚合酶装配形成子代病毒粒子。(3)双链RNA病毒。呼肠孤病毒是双链RNA病毒的代表。(4)逆转录病毒。这类病毒基因组为单链RNA(+),复制时首先在逆转录酶的催化下,合成RNA/DNA杂交中间体,切除RNA/DNA分子中的RNA后,以DNA(-)作为模板合成双链DNA,而双链DNA可整合于细胞DNA中,即前病毒。病毒子代RNA则由整合的病毒DNA转录而来。母代和子代RNA都能呈现mRNA的作用,又可作为基因组RNA装配到子代病毒颗粒。这类病毒包括白血病病毒等逆转录科病毒(人类免疫缺陷病毒,HIV)。4.有囊膜的病毒如何成熟与释放?(成熟:成熟方面,是核酸和蛋白质
14、外壳装配起来。释放:粘在寄主的膜上,通过寄主释放出去,囊膜实际上就是寄主细胞膜的一部分。)装配:病毒的装配是一个复杂的过程,是病毒复制、成熟和增殖的一个必要步骤。病毒的装配包括两个主要步骤,第一个步骤是衣壳的装配,病毒基因组被识别并包装入衣壳中;第二个步骤是囊膜化过程(对囊膜病毒)。囊膜病毒在装配过程中还必须从细胞的某一膜结构中获得脂质双层。大多数有囊膜病毒在分泌途径中的单一场所经历装配和囊膜化过程,但有些病毒则具有更为复杂的相互作用,这些相互作用包括去囊膜化和再囊膜化过程。如疱疹病毒已进化到能够充分利用细胞分泌途径。首先,核内形成的病毒衣壳通过内核膜出芽进入核周间隙,获得初始囊膜,然后,初始
15、囊膜与外核膜相融合后从核周间隙逸出并除去初始囊膜,从而将核衣壳释放到细胞质中。在这里,核衣壳进一步完成组装,并与被膜蛋白结合。最后,核衣壳向高尔基体衍生的囊泡出芽再次发生囊膜化,含有囊膜化的成熟病毒粒子的囊泡转运至质膜后,通过细胞外吐作用将病毒粒子释放到细胞外。释放:(1)裂解;(2)出芽:有囊泡的动物病毒,通过质膜结构出芽时获得一层囊膜后才能成熟;(3)细胞外吐。5.试述病毒的非增殖性感染类型及发生原因。病毒的非增殖性感染主要有三种类型:流产感染、限制性感染和潜伏感染。(1)流产感染:是指病毒虽然可以进入细胞,但不能完成复制的感染过程。依其发生原因,可以将之分为依赖于细胞的流产感染和依赖于病
16、毒的流产感染(这类流产感染系由基因组不完整的缺损病毒感染引起)。(2)限制性感染:这类感染的细胞瞬时允许性产生。(3)潜伏感染:显著特征是在感染细胞内有病毒基因组持续存在,但并无感染性病毒颗粒产生,而且感染细胞也不会被破坏。第四章 病毒的遗传变异1.怎样理解突变是自发产生的?(病毒的突变可分为自发突变和诱发突变。自发突变是指自然状态下发生的突变,诱发突变是指经诱变剂处理发生的突变。)自发突变:(1)突变是自发产生的;(2)自发突变的随机性和突变率;(3)各个突变的发生彼此无关;(4)突变的可逆性与回复突变。2.诱发突变的因子有哪些?某些物理、化学因子可以诱发突变,提高诱变率,这些因子称为诱变剂
17、。诱发突变:(1)化学诱变。碱基类似物;嵌入诱变;改变DNA结构的诱变。(2)物理诱变。紫外线(非电离辐射,中波紫外线290320nm);电离辐射(X、射线等)。3.病毒突变体的种类有哪些?(1)条件致死突变体;(2)蚀斑突变体;(3)抗原突变体;(4)共变体;(5)适应新宿主突变体。4.试述病毒突变的分子机制。突变又称点突变,是核酸分子中1个或少数几个核苷酸对的增加、缺失或置换所造成的结构改变,可分为两种形式。(1)碱基置换:在这种突变中,碱基对的数量没有变,只是一个碱基对被另一个碱基对所代替。碱基取代的方式有两种,转换和颠换。结果可能出现下述4种情况:错义突变;无义突变;同义突变(;中性突
18、变。中性突变和同义突变又常称为沉默突变)。(2)移码突变:在正常的碱基序列中插入或减少一个或多个碱基,造成突变位点下游密码子的错读,产生氨基酸顺序完全改变了的蛋白质,一般无活性。第五章 病毒与宿主细胞的相互作用1.病毒感染的致细胞病变作用有哪些?(1)细胞死亡;(2)细胞融合和合胞体细胞形成;(3)血吸附和血球凝集;(4)细胞膜渗透性的变化;(5)包涵体的形成;(6)细胞转化。2.病毒如何在基因转录水平上利用细胞机制的?(1)抑制细胞基因转录。(2)病毒基因高水平转录。病毒粒子内包裹病毒编码的RNA聚合酶;病毒粒子内包裹转录激活因子;利用增强子促进早期基因转录;激活晚期基因转录;促进RNA聚合
19、酶在病毒模板上的延伸。(3)病毒利用细胞mRNA加工机制。病毒mRNA的成熟;抑制细胞RNA的加工成熟。3.病毒如何进行蛋白质的合成?(1)修复细胞蛋白质翻译装置,抑制细胞mRNA的翻译,促进病毒蛋白翻译。(2)促进细胞mRNA的降解。(3)抑制细胞mRNA的转运,促进病毒mRNA输出。(4)增加细胞内阳离子浓度。(5)病毒蛋白采用特殊的翻译策略。合成多聚蛋白前体;渗漏扫描机制;核糖体ORF移位;病毒转录产物的编辑;翻译终止的抑制。4.干扰素的抗病毒机制有哪些?干扰素(interferon,IFN)是一类在同种细胞上具有广谱抗病毒活性的蛋白质,宿主对病毒感染应答的一个主要方式是产生干扰素。干扰
20、素除具有抗病毒活性外,还具有抗肿瘤、控制细胞生长和分化以及免疫调节等重要功能。IFN的抗病毒机制:IFN的抗病毒作用并不是直接灭活病毒,而是通过IFN同细胞表面受体结合而产生一组蛋白质,作用于病毒生命周期的一个或多个环节。病毒的入侵、脱衣壳、mRNA的转录、蛋白质的翻译、基因组的复制、新生病毒粒子的装配和释放都能被IFN所抑制。5.阐述病毒感染与细胞凋亡的关系。作为宿主对病毒感染的一种应答形式,细胞凋亡意义重大。病毒利用多种途径来平衡受感染细胞的生长和死亡。一方面,病毒感染细胞的过早死亡可大大减少病毒的数量,因此病毒进化出对抗细胞凋亡的一些策略。另一方面,一些病毒的基因产物可以诱导细胞凋亡,更
21、有利于子代病毒从感染细胞释放和传播。许多病毒感染都能引发或抑制细胞的凋亡,它们的作用机制虽各不相同,但都是作用于凋亡途径的不同环节或各种调控因子。病毒感染与细胞凋亡之间的关系十分复杂,仍有很多问题有待进一步研究。第六章 病毒感染及机体免疫应答与防治1.阐述病毒侵入机体并进行传播的机理(一)病毒侵入机体的途径。病毒可通过多种途径侵入机体,包括(1)呼吸道途径;(2)消化道途径;(3)泌尿生殖道途径;(4)皮肤、角膜、结膜途径。此外,在某些特殊情况下,病毒还可以通过接种方式直接进入机体。(二)病毒在机体内的扩散。(1)局部感染和系统感染。(2)上皮细胞的极性感染。(3)血源性传播。(4)侵袭组织器
22、官。(5)神经性传播。(三)病毒感染机体的形式。(1)急性感染。(2)持续性感染。慢性感染;潜伏感染;慢发感染(亦称迟发感染)。2.病毒如何逃避机体的免疫应答?病毒免疫逃避机制:在机体通过免疫系统组织病毒感染的同时,病毒也会通过多种方式突破机体免疫系统的各种功能而生存。(1)感染免疫特赦部位。(2)限制病毒基因的表达。(3)病毒基因的突变。(4)阻碍抗原递呈。(5)延缓病毒感染细胞的凋亡。(6)感染T淋巴细胞和B淋巴细胞。(7)干扰细胞因子和趋化因子的作用。(8)免疫耐受。3.如何预防病毒性疾病?病毒性疾病的防治必须考虑到病毒和宿主间相互作用的复杂性,采用针对传染源、传播途径和易感宿主的各种综
23、合性措施。(一)病毒疫苗。用疫苗进行预防接种以增强机体特异性的免疫力,是预防病毒感染的有效方法。(1)弱毒(活)疫苗。自然弱毒株疫苗;人工致弱毒株疫苗;遗传重配疫苗;病毒载体活疫苗;基因缺失弱毒疫苗。(2)灭活疫苗。【(3)亚单位疫苗。(4)DNA疫苗。】(二)抗病毒药物。病毒复制循环的任何步骤都可以作为药物选择攻击的靶。(1)核苷类似物。(2)逆转录酶抑制剂。(3)蛋白酶抑制剂。(4)神经氨酸酶抑制剂。(5)细胞因子。4.试评价抗病毒药物的作用。尽管历经近50年时间的研究,人们对于某些病毒的了解也非常多,但抗病毒药物总量仍然很少。究其原因有很多,但最基本的原因主要有:(1)干扰病毒复制增殖的
24、化合物同时对机体有副作用;(2)抗病毒药物必须保证100%阻断病毒的生长,任何病毒逃避都是潜在危险,但要达到如此高的效率显然难度非常大;(3)很多医学上重要病毒(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、乳头瘤病等)没有合适的动物模型;(4)很多急性感染持续时间短,待发现疾病时,病毒已经不复制,而且事实上已从机体中被清除了。此外,由于缺乏快速诊断试剂,即使存在有效的治疗,很多抗急性病毒性疾病的药物开发和市场也因此受阻。第九章 重要医学病毒1.肝炎病毒主要包括哪几种?肝炎病毒是指以侵害肝脏为主,引起病毒性肝脏炎症的一组病毒,主要包括A、B、C、D和E5个型肝炎病毒,在我国分别称之为(1)甲型肝炎病毒(HAV)
25、;(2)乙型肝炎病毒(HBV);(3)丙型肝炎病毒(HCV);(4)丁型肝炎病毒(HDV);(5)戊型肝炎病毒(HEV)。2.乙肝病毒属于DNA病毒,它在细胞内复制的过程与其它DNA病毒相比有什么特点?(1)乙型肝炎病毒属于嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属,是引起病毒性肝炎的主要病原体之一。(2)嗜肝DNA病毒科的病毒有独特的复制方式,病毒合成以RNA中间体为模板,经反转录合成DNA链,在某些方面,HBV与RNA反转录病毒有许多相似性,故又称之为DNA反转录病毒。(3)HBV感染细胞的过程包括毒粒侵入与脱壳、病毒复制与整合、装配与整合、毒粒成熟与释放等连续过程。【 侵入;复制;装配。】3.艾
26、滋病病毒的主要传播途径有哪些?流行病学:AIDS的传染源是HIV感染者和AIDS患者。血液、精液、阴道分泌物、乳汁、唾液、脑脊液、骨髓及中枢神经组织等标本中均可分离到病毒。传播途径主要有三种:(1)性传播:是HIV的主要传播方式。美国和西方国家以同性恋间性传播为主;而非洲与东南亚地区则以异性性交为主要传播途径,造成AIDS的流行。患者多见于性生活活跃的年龄段(2050岁)。(2)血液传播:输入带有HIV的血液或血制品,包括骨髓或器官移植、人工授精及共用污染HIV的注射器和针头等。(3)垂直传播:孕晚期的后3个月胎儿经胎盘从母体获得感染者最多,其次是分娩时经产道感染,由哺乳感染者最少。13岁以前
27、的儿童AIDS患者中约70%的双亲有HIV感染史,故通过母婴传播影响下一代成为严重的社会问题。4.传染性非典型肺炎病毒的形态结构特点有哪些?(1)SARS冠状病毒属于巢状病毒目(套病毒目),冠状病毒科,冠状病毒属。【本属病毒为多形态,略呈球形或椭圆形,直径80160nm。有囊膜,囊膜为双层脂膜,表面一般可见到两种囊膜糖蛋白:膜蛋白(M或E1)和纤突蛋白(S或E2)。】(2)基因组为单链正义RNA,全长约29.7kb,具有正义RNA病毒特有的结构特征。(3)SARS-CoV病毒基因组与经典冠状病毒仅有60%同源性,但基因组的组织形式与其他冠状病毒相似。第十一章 人畜共患病病毒1.流感病毒是怎样分
28、类的?流感病毒属于正黏病毒科,由这种病毒引起的一种急性呼吸道传染性疾病称为流行性感冒,简称流感。根据临床表现,可分为单纯型、肺炎型、中毒型和胃肠型。【流感病毒是有囊膜病毒。】流感病毒为球形,但也常有同样直径的丝状形态,长短不一。流感病毒由核心和外层组成。根据核蛋白抗原性不同可分为A、B和C型,型特异性由核蛋白(NP)和基质(M)抗原的抗原性质决定。2.禽流感病毒有哪些血清型?根据血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的抗原特性,将A型流感病毒分成不同亚型。H可分为15个亚型(H1H15)、N有9个亚型(N1N9)。两种抗原的变异是引起新的大流行的病原基础。一株流感病毒的名称包括型(A、B或C)、宿
29、主来源(除人外)、地理来源、毒株编号(如果有)和分离的年代,后面及圆括号内附以HA(H)和NA(N)的抗原性说明。【两个非结构蛋白:NS1和NS2。NS1和NS2的功能尚不清楚。外层为类脂质包膜。包膜上散布着长1012nm的密集钉状物或纤突,主要为棒状三聚体的血凝素(HA)和蘑菇形四聚体的神经氨酸酶(NA),这两种抗原易发生变异。】3.如何鉴定流感病毒?诊断:(1)病毒分离;(2)病毒鉴定;(3)抗体检测。病毒鉴定:(1)用鸡红细胞检测胚液中的血凝活性的常量或微量技术是现在使用的标准方法。将血凝阳性的尿囊液用于病毒鉴定。非常重要的是,确定尿囊液中检出的血凝活性是由流感病毒还是其他血凝病毒。因此
30、,分离物要用新城疫抗血清作HI试验检测。如为阴性,则检测A型NP的存在,以确定有A型流感病毒。用双向免疫扩散试验或单放射溶血试验可以检测特异NP或基质蛋白(MP)。抗NP或MP的单克隆抗体,在ELISA中检测这些抗原很有用。(2)鉴定程序的下一步是确定HA、NA表面抗原的抗原亚型。可在HI试验中用一组制备的抗14种不同血凝素的抗血清鉴定HA的型别。应用分离的抗HA或含相关抗NA的重组病毒的抗血清,可以加速分型、避免由于抗体抗NA而产生的空间抑制。应用已知HA亚型抗血清的试验不能检测带有新HA的流感病毒,因此,重要的是所用的方法要能确定有未知血凝素的抗原是流感病毒,如上所述,通常是用检测型特异抗
31、原(NP或MP)的试验。NA亚型通常用制备的抗9种已知神经氨酸酶的抗血清在NI试验中鉴定。现已研制出一种微量NI技术,这有助于对大量分离物的分析,且能节省试剂并易于操作。这种微量NI技术常在病毒分离中用作首选的测定方法。(传代时,必须对这些问题加以考虑。)4.被狗、猫咬伤后该如何处理?伤口处理:咬伤、抓伤部位的处理应在暴露后立即进行。若无法立即处理,应在3小时内进行。具体措施是用20的肥皂水反复、彻底冲洗1020分钟,局部用70乙醇或2.53碘酒消毒。也可使用0.1新洁尔灭冲洗或消毒,但其杀灭狂犬病毒的作用低于20的肥皂水,使用前应将肥皂水冲洗干净,以防肥皂水中和新洁尔灭。深部伤口需要用注射器
32、或导管伸人伤口进行液体灌注、清洗。如果有免疫血清,严重咬伤者若皮试阴性应12小时内伤口周围或近心端封闭浸润注射。如无严重出血,一般不做包扎和缝合。5.朊病毒的结构特征是怎样的?形态特征与基因组结构:(1)朊病毒为一种对蛋白酶有抗性的蛋白质,分子量2730kD,定名为PrPsc。该病毒没有遗传物质核酸。致病蛋白质PrPsc能在大脑内自我复制,数量不断增加,直至形成纤维,破坏神经细胞,并最终杀死动物。【(2)PrP基因在人体内定位于第20号染色体短臂,称为PRNP,编码253个氨基酸。在小鼠体内定位于第2号染色体,称为Pmp,编码254个氨基酸。该基因是一个单拷贝基因。(3)PrPsc能改变所遇到
33、的任何PrPc的形状,变形成为一个新的PrPsc分子,这个新生PrPsc分子反过来又可改变更多PrPc分子的形状。这种连锁反应使得正常的蛋白质和致病的蛋白质因子都成为新病毒的材料。】【书上:朊病毒是动物与人传染性的海绵状脑病的(TSE)病原,不是传统意义上的病毒。它没有核酸,是一种传染性蛋白质颗粒。朊病毒蛋白(PrP)是人和动物中普遍存在的由正常细胞基因编码的产物,分子质量为2730ku。正常状况下,朊病毒蛋白处于细胞形态,称PrPc,本身不能致病;而导致疾病的是处于瘙痒形态的朊病毒蛋白,称为PrPsc。这两种不同形态的蛋白质由同一基因编码,具有完全相同的氨基酸序列,但是空间结构差异较大,两者
34、高级结构的不同使得它们在理化性质以及生物学特性上产生很大差异。PrPc主要由螺旋组成,表现蛋白酶消化敏感性和水溶性;而PrPsc主要由折叠组成,对蛋白酶消化具有显著的抵抗能力。PrPsc是PrPc经翻译后修饰而转变为折叠异常的病理形态,其复制呈一个指数增长过程,从而引起PrPsc的积聚,并能聚集成淀粉样的纤维杆状结构,最终导致宿主神经元的淀粉样变性。PrP基因在人体内定位于第20号染色体短臂,称为PRNP,编码253个氨基酸。在小鼠体内定位于第2号染色体,称为PmP,编码254个氨基酸。】6.应该怎样预防朊病毒感染?(1)疯牛病(牛海绵状脑病)、库鲁病、克-雅氏病、格-史氏综合症及人类朊病毒病
35、等都是致死性疾患,迄今尚无特效治疗。有报道用金刚烷胺、阿糖腺苷及异丙肌甙疗,可使病情改善。(2)现在只有防范和控制这类病毒在人或牲畜中的传播。用污染朊病毒的肉骨粉作饲料喂牛是导致疯牛病的病因。发现病牛的牛群全部淘汰,加以焚毁。不能焚烧的物品及检验后的病料,用紫外线照射消毒无效。化学消毒剂中,比较有效的是浓缩漂白粉溶液或氢氧化钠溶液。最有效的办法是在一个多孔高压锅内1341小时灭活病毒。在干热条件下,即使到360l小时仍会有传染性。(3)接触被朊病毒污染的物质或病人的血、脑脊液、尿、粪便或其他体液时应戴手套,当进行诊疗操作如静脉穿刺、腰穿等,应戴手套、口罩、防护大衣及保护性眼罩。第十二章 昆虫病
36、毒1.何为昆虫病毒?昆虫病毒有哪些种类?研究昆虫病毒有什么意义?(1)昆虫病毒是指以昆虫作为宿主并在宿主种群中引发流行病的病毒种类。(2)【昆虫病毒有1600多种,感染包括鳞翅目、双翅目、鞘翅目、膜翅目、直翅目、蜻蜓目、脉翅目、半翅目、同翅目、等翅目、毛翅目、蜚蠊目和微翅目等的昆虫。昆虫病毒病研究已从最初的有益昆虫病毒病的防治逐渐扩展到利用昆虫病毒来防治有害昆虫。】种类:昆虫病毒种类繁多,形态结构和形态发生各异,据国际病毒分类委员会第八次报告的统计,昆虫病毒有1600多种,几乎涉及昆虫纲所有的目,这些昆虫病毒分属于13个病毒科、2个病毒亚科和21个病毒属。按病毒核酸类型划分,可分为:双链DNA病毒;单链DNA病毒;双链RNA病毒;单链RNA病毒;DNA和RNA的反转录病毒科。(3)意义:研究昆虫病毒的直接目的,是为了保护有益昆虫、杀灭农业害虫和卫生害虫。这在发展农业生产、加强公共卫生以及人类环境保护方面有重要意义。此外,昆虫病毒的种类很多,在发展比较病毒学和分子生物学的基础理论、加深对病毒及生命
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