载脂蛋白B测定试剂盒

1、载脂蛋白B测定试剂（盒）技术审评规范（征求意见稿）一、前言本审评规范旨在指导注册申请人对载脂蛋白B测定试剂（盒） 注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报 资料的技术审评提供参考。本审评规范是对载脂蛋白B测定试剂（盒）的一般要求，申 请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用， 需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注 册申报资料的内容进行充实和细化。本审评规范是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括 注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能 够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细 的研究资料和验证资料，相关人员应

2、在遵循相关法规的前提下使 用本审评规范。本审评规范是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制 定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展， 本审评规范相关内容也将适时进行调整。二、适用范围载脂蛋白B测定试剂（盒）用于体外定量测定人血清和/或血 浆中的载脂蛋白B的含量。从方法学考虑，本文主要指采用分光光度法原理，利用全自 动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室进行载脂蛋 白B定量检验所使用的临床化学体外诊断试剂。本规范不适用于 干式载脂蛋白B测定试剂（盒）依据体外诊断试剂注册管理办法（试行）（以下简称办法）载脂蛋白B测定试剂盒管理类别为II类，分类代号为6840。三、基本要求

3、（一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、临床意义、产品描述、有 关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情 况介绍等内容，应符合办法和体外诊断试剂注册申报资料 基本要求（国食药监械2007609号）的相关要求。下面着重 介绍与载脂蛋白B测定试剂（盒）预期用途有关的临床背景情况。正常情况下，大约有90%的载脂蛋白B分布在低密度脂蛋白 （LDL）中，故血清载脂蛋白B主要代表LDL水平，它与低密度脂 蛋白胆固醇（LDL-C）成显著正相关。但当高TG血症时（VLDL极 高），载脂蛋白B也会相应地增高。在流行病学与临床研究中己确认，高载脂蛋白B是冠心病的危 险因素，但还很少有前瞻性研究

4、表明载脂蛋白B对冠心病风险的 估计价值。多数临床研究指出，载脂蛋白B是各项血脂指标中较 好的动脉粥样硬化标志物。在冠心病高载脂蛋白B血症的药物干 预实验中表明，降低载脂蛋白B可以减少冠心病发病及促进粥样 斑块的消退注：若注册申报产品声称临床意义超出此内容范围，应提供 相关文献或临床研究依据。（二）产品说明书说明书承载了产品预期用途、试验方法、检测结果解释以及 注意事项等重要信息，是指导实验室工作人员正确操作、临床医 生针对检验结果给出合理医学解释的重要依据。因此，产品说明 书是体外诊断试剂注册申报最重要的文件之一。产品说明书的格 式应符合体外诊断试剂说明书编写审评规范的要求，结合体 外诊断试剂

5、说明书编写指导原则的要求，下面对载脂蛋白B测 定试剂（盒）说明书的重点内容进行详细说明，以指导注册申报 人员更合理地完成说明书编制。【产品名称】（1）试剂（盒）名称由三部分组成：被测物名称、用途、方 法或原理。例如：载脂蛋白B测定试剂（盒）（免疫比浊法）。（2）英文名称（如有）应当正确、完整、直译，不宜只写缩 写。【包装规格】（1）不得多于标准中所列的包装规格；（2 ）注明装量或可测试的样本数，如xx测试/盒、xxmL。【预期用途】应至少包括以下几部分内容：（1 ）说明试剂盒用于体外定量测定人血清和/或血浆中载脂 蛋白B的含量。（2）与预期用途相关的临床适应症背景情况，如临床适应症 的发生率、

6、易感人群等，相关的临床或实验室诊断方法等。4 .【检验原理】本规范适用于对人血清和/或血浆中的载脂蛋白B进行定量检 测的试剂（盒），以下简要介绍典型反应原理：免疫比浊法（免疫透射比浊法）：血清载脂蛋白B与试剂中的特异性抗人载脂蛋白B抗体相结合，形成不溶性免疫复合物，使反 应液产生浊度。在特定波长（如340nm处）测定吸光度，浊度高低， 反映血清标本中载脂蛋白B的含量。载脂蛋白B抗原+抗载脂蛋白B抗体t抗原抗体复合物【主要组成成份】(1 )说明试剂盒包含组分的名称、数量、比例或浓度等信息， 如果对于正确的操作很重要，应提供其生物学来源、活性及其他 特性；明确说明不同批号试剂盒中各组分是否可以互换

7、。(2)试剂盒内如包含校准品和/或质控品，应说明其主要组 成成分及其生物学来源，校准品应注明其定值及溯源性，溯源性 至少应写明溯源到的最高级别，包括：标准物质的发布单位及编 号，质控品应有合适的靶值范围。【储存条件及有效期】对试剂盒的效期稳定性、复溶稳定性、开瓶稳定性等信 息做详细介绍。包括环境温湿度、避光条件等。不同组分保存条件及有效期不同时，应分别说明，产品 总有效期以其中效期最短的为准。注：保存条件不应有模糊表述，如“室温”。稳定期限应以月 或日为单位。【适用仪器】说明可适用的仪器，并提供与仪器有关的必要信息以便 用户能够作出最好的选择。应写明具体适用仪器的型号，不能泛指某一系列仪器。【

8、样本要求】重点明确以下内容：样本采集前对患者的要求：如采集时间、采集顺序等， 是否受临床症状、用药情况等因素的影响。样本采集：说明采集方法及样本类型，如有血浆样本， 应注明对抗凝剂的要求。样本处理及保存：样本处理方法、保存条件及期限、运 输条件等。冷藏/冷冻样本检测前是否须恢复室温，冻融次数。对 储存样本的添加剂要求等。应明确当测定值超出线性上限时的稀释方法，并给出稀 释最大倍数说明。【检验方法】详细说明试验操作的各个步骤，包括：(1 )试验具体操作步骤。试剂配制方法、注意事项。试验条件：温度、时间、仪器波长等以及试验过程中的 注意事项。校准：校准品的使用方法、注意事项、校准曲线的绘制。 应注

9、明推荐的仪器校准周期。质量控制：质控品的使用方法、对质控结果的必要解释 以及推荐的质控周期等，如质控不合格应提供相关的解决方案。【参考值(参考范围)】应注明常用样本类型的正常参考值(范围)，如：0.8 1.lg/L,并简要说明参考值确定的方法。(血脂指南)简单介绍设定该参考值(范围)所选健康人群的区域特 征，建议注明以下字样“由于地理、人种、性别及年龄等差异， 建议各实验室建立自己的参考值(范围尸。1L【检验结果的解释】说明可能对试验结果产生影响的因素；说明在何种情况下需 要进行确认试验。【检验方法局限性】说明检测结果仅供临床参考，不能单独作为确诊或排除 病例的依据。说明该检验方法由于哪些原因

10、会使测量结果产生偏离， 或测量结果还不能完全满足临床需要。如：干扰(胆红素、血红 蛋白、甘油三酯等)，交叉反应等。【产品主要性能指标】产品性能指标应符合企业标准要求。说明该产品主要性能指 标，应至少包括：外观、装量、试剂空白吸光度、试剂空白吸光 度变化率、分析灵敏度、线性范围、重复性、批间差等。【注意事项】应至少包括以下内容：（1）本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床诊治 应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查及治疗反应等情况综 合考虑。（2 ）使用不同生产商的试剂对同一份样本进行检测可能会存 在差异。（3）对所有样本和反应废弃物都应视为传染源对待，提示操 作者采取必要的防护措施。【

11、参考文献】注明引用参考文献，其书写应清楚、易查询且格式规范统一。【生产企业】包括企业名称、地址（注册地址和生产地址不同的应分别列 出）、邮政编码、电话和传真号码、网址等。【其他】如医疗器械生产企业许可证编号、医疗器械注册证书编号、 产品标准编号、说明书批准日期及修订日期等。（三）拟定产品标准及编制说明拟定产品标准应符合体外诊断试剂注册管理办法和体 外诊断试剂注册申报资料基本要求的相关规定。如已有相应的 国家/行业标准发布，则企业标准的要求不得低于其相关要求。下面就标准中涉及的产品适用的相关标准、主要性能指标、 标识标签说明书以及检验规则等相关内容做一简要叙述。产品适用的相关标准GB/T 191

12、-2008包装储运图示标志GB/T 21415 2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测 量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性GB/T 26124-2011临床化学体外诊断试剂(盒)YY/T 0316-2008医疗器械风险管理对医疗器械的应用YY/T 0466.1 - 2009医疗器械 用于医疗器械标签、标记和 提供信息的符号第1部分：通用要求主要性能指标：外观试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应清晰。装量液体试剂的净含量应不少于标示量。试剂空白吸光度用指定空白样品测试试剂(盒)，在说明书规定的测试条件下， 记录反应结束(T)后的吸光度(A),测试结果即为试剂空白吸光度

13、测定值，应符合企业给定范围。(4 )分析灵敏度用浓度在(1.00 士 0.50) g/L的样本进行测试，记录在试剂(盒)规定参数下的吸光度差值。换算为1.00 g/L的吸光度差值， 吸光度差值()应不小于0.15。注：测试波长为340nm，其他测试波长或通过样本预稀释测试 的可做相应调整。(5 )线性用达到线性区间上限的高浓度样本和接近线性区间下限的低浓 度样本，混合成至少5个稀释浓度(xi)。用试剂(盒)分别测试以上样本，每个稀释浓度测试3次，分别求出每个稀释浓度检测结 果的均值（yi）。以稀释浓度（xi）为自变量，以检测结果均值（yi） 为因变量求出线性回归方程。按公式（1）计算线性回归的

14、相关系数（r ）。_&x -x）（y y）(1).2（x-x）2 Hy-y）2(1)七ii稀释浓度（xi ）代入求出线性回归方程，计算yi的估计值及 yi与估计值的相对偏差或绝对偏差。试剂（盒）至少在0.40，2.00 g/L的线性范围内分析性能 应符合如下要求：线性相关系数（r）应不小于0.990；0.40，2.00 g/L区间内，线性偏差应不超过10%。（6）重复性批内重复性：测试浓度在（1.00 0.50） g/L的血清样品或 质控样品，重复测试10次，计算测量值的平均值怎）和标准差（s）。所得结果的变异系数（CV）应不大于3%。批内瓶间差（干粉或冻干试剂适用）用（1.00 0.50）

15、g/L的血清样品或质控样品测试同一批号的 10个待检试剂（盒），并计算10个测量值的平均值（亍1）和标准 差（s1 ）。(2)(3)用（1.000.50） g/L的血清样品或质控样品对该批号的1个待 检试剂（盒）重复测试10次，计算结果的均值3 2 ）和标准差（s2 ）。 按公式（2）、（3 ）计算瓶间差的变异系数（(2)(3)当 s10.95）,同时应给出b的95% （或99% ）置信区间。（对于理 想的可信区间，回归系数应涵盖“1”，截距应涵盖“0”）。给出考核试剂与参比试剂之间的差值（绝对偏倚/偏差）及比 值（相对偏倚/偏差）散点图，观察并分析各点的偏倚分布情况。 计算医学决定水平处相对

16、偏倚/偏差及95%置信区间。其医学决定 水平处允许相对偏倚/偏差限值应不大于10%。讨论和结论对总体结果进行总结性描述并简要分析试验结果，对本次临床研究有无特别说明，最后得出临床试验结论。四、名词解释准确度（accuracy ）: 一个测量值与可接受的参考值间的一 致程度。分析灵敏度（Lower detection limit ）:以足够置信度可 检测的最小浓度差异，按照IUPAC （国际理论（化学）与应用化学 联合会）定义分析灵敏度代表校准曲线的斜率。线性（linearity）:在给定测量范围内，给出的测量结果 与样品中实际存在的被测量物的值成比例的能力。线性是描述一 个测量系统的测量示值或

17、测量结果相关于样本的赋值符合直线的 属性。精密度（precision ）：在规定条件下，相互独立的测试结 果之间的一致程度。精密度的程度是用统计学方法得到的测量不 精密度的数字形式表示，如标准差（SD）和变异系数（CV）。正确度质控物质（trueness control material ）:用于评 价测量系统测量偏倚的参考物质。参考物质（reference material ）: 一种或多种指定特性足 够均匀和稳定，已被证明适合在测量过程中或名义特性检验中预 期应用的物质。注：只有具有指定量值的参考物质可用于校准或测量正确度 控制。五、参考文献 体外诊断试剂注册管理办法（试行）（国食药监械

18、2007 229 号） 体外诊断试剂临床研究技术指导原则（国食药监械 2007 240 号）体外诊断试剂说明书编写指导原则（国食药监械2007 240 号）4 .北京市第二类体外诊断试剂临床试验指导原则5.全国临床检验操作规程（第3版），中华人民共和国卫生部 医政司GB/T21415-2008体外诊断医疗器械生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性载脂蛋白B测定试剂（盒）技术审评规范编制说明一、编写目的2007年体外诊断试剂注册管理办法（试行）、体外诊断试 剂临床研究技术指导原则、体外诊断试剂说明书编写指导原则 均已发布，编制本指导原则旨在指导和规范载脂蛋白B测定试剂 （盒）产品

19、的技术审评工作，帮助审评人员理解和掌握该类产品 原理、组成、性能、预期用途等内容，把握技术审评工作基本要 求和尺度，对产品安全性、有效性作出系统评价。由于载脂蛋白B测定试剂（盒）产品仍在不断发展，审查员 仍需从风险分析的角度认真确认申报产品的预期用途与风险管理 是否相当；由于我国医疗器械法规框架仍在构建中，审查员仍需 密切关注相关法规、标准及最新进展，关注审评产品实际组成、 原理、预期用途等方面的个性特征，以保证产品审评符合现行法 规安全、有效的要求。二、编写依据（一）医疗器械监督管理条例（国务院令第276号）（二）体外诊断试剂注册管理办法（试行）（国食药监械 2007229 号）（三）体外诊断试剂临床研究技术指导原则（国食药监械 2007240 号）（四）体外诊断试剂说明书编写指导原则（国食药监械 2007240 号）（五）GB/T 26124-2011临床化学体外诊断试剂（盒）（六）载脂蛋白B测定试剂（盒）（报批稿）行业标准（