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文档简介
1、.:.;细胞分子生物学复习题如何了解细胞是生命活动的单位?1.一切有机体都是由细胞组成,细胞是构成有机体的根本单位;每个细胞具有本人独立的一套完好的构造体系,构成有机体的根本构造单位。2.细胞具有独立的、有序的自控代谢体系,细胞是代谢与功能的根本单位;在有机体一切代谢活动与执行功能的过程中,细胞呈现为一个独立的、有序的、自动控制性很强的代谢体系。3.细胞是有机体生长与发育的根底;一切有机体的生长与发育是以细胞的增殖与分化为根底的,这是研讨生物发育的基点。4.细胞是遗传的根本单位,细胞具有遗传的全能型;每一个细胞都含有全套的遗传信息,即全套的基因,也就是说他们具有遗传的全能型。5.没有细胞就没有
2、完好的生命;无数实验证明,任何破坏细胞构造的完好性都不能实现细胞完好的生命活动。真核生物与原核生物的比较构造、功能、遗传安装方面构造与功能方面:原核生物除了有细胞膜外,普通没有核膜、核仁、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器。而真核细胞普通都具有全部的细胞器。原核细胞的染色体是由一个环状DNA分子构成的单个染色体,DNA不与或很少与蛋白结合。核糖体为70S。而真核生物的染色体有2个以上,由现状DNA与蛋白质结合组成。核糖体为80S。原核生物的细胞壁主要成分为氨基酸与壁酸,而动物细胞无细胞壁,植物细胞壁的主要成分为纤维素与果胶。前者细胞分裂为无丝分裂,后者以有丝分裂为主。遗传安装方面:原核生
3、物的DNA分子数、信息量、基因数、基因组数等相对于真核生物较少,前者的DNA分子构造为环状,后者为线状。真核生物具有大量多余的反复的DNA序列,基因中含有内含子,转录翻译后存在大分子的加工与修饰,而原核生物这些都没有。真核生物基因表达的调控比原核生物更复杂多变,转录与翻译具有严厉的阶段性与区域性,原核生物的转录与翻译同时进展。比较光学显微镜和电子显微镜的特点。分辨身手光源透镜真空成像原理光学显微镜200nm可见光玻璃透镜不要求利用样品对光的吸收构成明暗反差和颜色变化100nm紫外光玻璃透镜不要求电子显微镜接近0.1nm电子束电磁透镜1.33*10-5-1.33*10-3Pa利用样品对电子的散射
4、和投射构成明暗反差什么是细胞工程?列举三个例子阐明细胞工程操作的原理。细胞工程:是在细胞程度上的生物工程。是指对细胞进展大规模培育,或在细胞程度上改良生物的遗传质量以满足人类特定需求的技术。1.细胞交融技术:两个或多个细胞交融成一个双核或多核细胞的景象称为细胞交融。动物细胞交融普通要用灭活的病毒或化学物质介导,植物细胞交融时要先用纤维素酶去掉纤维素壁。细胞交融可以在基因型一样的细胞间进展,也可以在基因型不同的种内细胞间甚至种间细胞间进展。2.单克隆抗体技术:是指将骨髓瘤细胞与经免疫的小鼠B淋巴细胞在聚乙二醇或灭活的病毒的介导下发生交融。交融后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,一能分泌抗体,二
5、能无限繁衍,从而分泌单克隆抗体。3.细胞拆合技术:细胞拆合是指将核与质别分开来,然后把不同来源的细胞质和细胞核相互配合,构成核质杂交细胞。可以分为物理法和化学法两种。以克隆绵羊多利的培育过程为例,阐明其中涉及到那些分子细胞生物学原理和技术。涉及到细胞培育、核移植、细胞同步化以及蛋白的翻译与加工等原理和技术。细胞培育:细胞培育包括微生物细胞的培育和细胞培育技术。由一个细胞经过大量培育成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培育本身就是细胞的克隆。核移植:所谓细胞核移植技术,就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁衍即可被激活、
6、分裂并发育成新个体,使得核供体的基因得到完全复制。获得供体核获得受体细胞并去核核卵重组细胞交融/激活培育重构胚细胞同步化:在普通培育条件下,群体中的细胞处于不同的 HYPERLINK baike.baidu/view/254458.htm t _blank 细胞周期时相之中,为了研讨某一时期细胞的代谢、增殖、基因表达等,常采取一些方法使细胞处于细胞周期的同一时相,这就是细胞同步化技术。选用DNA合成抑制剂可逆地抑制S期细胞DNA合成而不影响其他细胞周期运转,最终可将细胞群体阻断在G1S期交界处;一些抑制微管聚合的药物,因抑制有丝分裂安装的构成和功能行使,可将细胞阻断在有丝分裂中期,使细胞同步于
7、M期。M期同步:普通有振荡搜集法、秋水仙胺阻抑法、N2阻断法S期同步法普通采用胸腺嘧啶核苷(TdR)双阻断法:该法利用过量TdR能妨碍DNA合成的原理而设计,为了加强细胞同步化效果,常采用两次TdR阻断法,即双阻断法。第1次阻断时间相当于G2、M和G1期时间的总和或稍长,释放时间不短于S期时间,而小于G2+M+G1期时间,这样才干使一切位于G1S期的细胞经过S期,而又不使沿周期前进最快的细胞进入下一个S期。第2次阻断时间同第1次,再释放。以植物或动物细胞培育为例,阐明根本操作环节培育基配制接种培育应留意的问题。培育基的配置:培育基的组成必需满足细胞的生长和代谢产物所需的元素,并能提供生物合成和
8、细胞维持活力所需求的能量。 培育基成分的选择应该遵照如下原那么:菌种的同化才干、代谢的阻遏和诱导、配比适宜C/N、控制pH条件等。同时培育基的灭菌要彻底,以免培育过程中发生杂菌污染。接种:接种过程必需在超净台上完成,接种前应先将超净台紫外杀菌一段时间,确保里面没有杂菌以后方可接种。接种量要视不同的生物的生长情况而定,普通为5%-10%。为了让生物尽快顺应新的外界环境,我们普通选择对数生长期的生物接种。培育过程中要及时检测生物生长的情况,一旦发现染菌或者是出现其他不正常的生长形状,应立刻寻觅缘由并及时处理,以免破坏后续的培育,特别是在工业化消费中这点显得尤其重要,否那么会呵斥原资料和时间的浪费。
9、其次,随着生物的不断生长,培育基耗费,应及时补充新的灭菌的培育基,并排出有害的代谢产物,确保生物的正常生长。细胞间衔接包括哪一些类型?简述突触的构造。在多细胞机体中,细胞衔接根据行使功能不同,可分为三大类:以严密衔接为代表的封锁衔接可阻止溶液中的分子沿细胞间隙进入体内,同时还起到膜蛋白的隔离作用;锚定衔接是经过中间纤维桥粒,半桥粒或微丝粘着带和粘着斑将相邻的细胞或细胞与基质衔接在一同,以构成巩固有序的细胞群体,组织与器官;通讯衔接包括间隙衔接和化学突触那么在细胞之间的代谢偶连,信号转导等过程中起重要作用。高等植物细胞之间经过胞间连丝来进展物质交换与相互联络。电镜下,突触由三部分组成:突触前部、
10、突触间隙和突触后部。突触前部和突触后部相对应的细胞膜较其他部位略增厚,分别称为突触前膜和突触后膜,两膜之间的狭窄间隙称为突触间隙。在突触前膜部位的胞浆内,含有许多突触小泡以及一些微丝和微管、线粒体和滑面内质网等。突触小泡是突触前部的特征性构造,小泡内含有化学物质,称为神经递质。什么是配体和受体?受体按功能分为哪几类?什么是受体上调或下调?配体:同锚定蛋白结合的任何分子都称为配体。在受体介导的内吞中, 与细胞质膜受体蛋白结合, 最后被吞入细胞的即是配体。受体:是一种可以识别和选择性结合某种配体信号分子的大分子,当与配体结合后,经过信号转导作用将胞外信号转换为胞内化学或物理的信号,以启动一系列过程
11、,最终表现为生物学效应。可以分为细胞内受体和细胞外表受体。前者受胞外亲脂性信号分子激活,后者受胞外亲水性信号分子激活。受体下调:是指在长期运用一种药物后,由于受体密度下降从而导致组织或细胞对药物的敏感性和反响性下降的景象。受体上调:是与受体脱敏相反的一种景象,因长期运用拮抗药呵斥受体密度上升,从而导致组织或细胞对药物的敏感性和反响性上升的景象。阐明膜受体介导的主要信号转导通路。细胞外表受体分属三大家族:离子通道偶联的受体、G蛋白偶联的受体、与酶衔接的受体。1.神经递质经过与受体的结合而改动通道蛋白的构象,导致离子通道的开启或封锁,改蜕变膜的离子通透性,在瞬间将胞外化学信号转换为电信号,继而改动
12、突触后细胞的兴奋性。2.由G蛋白耦联受体所介导的细胞信号通路主要包括:cAMP信号通路和磷脂酰肌醇信号通路。G蛋白耦联型受体为7次跨膜蛋白,受体胞外构造域识别胞外信号分子并与之结合,胞内构造域与G蛋白耦联。经过与G蛋白耦联,调理相关酶活性,在细胞内产生第二信使,从而将胞外信号跨膜传送到胞内。3. 酶偶联型受体分为两类,其一是本身具有激酶活性,如肽类生长因子EGF,PDGF,CSF等受体;其二是本身没有酶活性,但可以衔接非受体酪氨酸激酶,如细胞因子受体超家族。这类受体的共同点是:通常为单次跨膜蛋白;接受配体后发生二聚化而激活,起动其下游信号转导。什么是自动运输?阐明细胞膜钠钾泵的任务原理。自动运
13、输时由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向浓度高的一侧进展跨膜转运的方式。其任务方式是在细胞内侧亚基与Na+相结合促进ATP水解,亚基上的一个天门冬氨酸残基磷酸化引起亚基构像发生变化,将Na+泵出细胞,同时细胞外的K+与亚基的另一个位点结合,使其去磷酸化,亚基构象再度发生变化将K+泵进细胞,完成整个循环。什么是基因组、C值矛盾、常染色质和异染色质?基因组: HYPERLINK baike.baidu/view/15182.htm t _blank 单倍体 HYPERLINK baike.baidu/view/3687.htm t _blank 细胞中的全套 HYPERLI
14、NK baike.baidu/view/6633.htm t _blank 染色体为一个基因组,或是单倍体细胞中的全部基由于一个基因组。包括编码序列和非编码序列在内的全部 HYPERLINK baike.baidu/view/758.htm t _blank DNA分子。C值C-value悖理:普通来说,其基因组和DNA含量随生物进化复杂程度的添加而稳步上升;但在真核生物中,生物进化的复杂程度与C值的大小并非完全一致。常染色质:是指间期核内染色质纤维折叠紧缩程度低,处于伸展形状,用碱性燃料染色时着色浅的那些染色质。异染色质: 在细胞周期中,间期、早期或中、晚期,某些 HYPERLINK bai
15、ke.baidu/view/6633.htm t _blank 染色体或染色体的某些部分的固缩常较其他的染色质早些或晚些,其染色较深或较浅,具有这种固缩特性的染色体称为异染色质。绘制染色体方式图标明各部分称号。请问染色DNA包括哪三种主要元件?各自功能是什么?p272三种功能元件:DNA复制起点,确保染色体在细胞周期中可以自我复制,维持染色体在细胞世代传送中的延续性。着丝粒,使细胞分裂时已完成复制的染色体能平均分配到子细胞中。最后在染色体两端必需有端粒,坚持染色体的独立性和稳定性。什么是细胞周期?各时期有何重要事件?如何使培育细胞同步化?细胞周期:细胞周期指由细胞分裂终了到下一次细胞分裂终了所
16、阅历的过程。可分为四个阶段:G1期,指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间隙时间;S期,指DNA复制的时期,只需在这一时期H3-TDR才干掺入新合成的DNA中;G2期,指DNA复制完成到有丝分裂开场之前的一段时间;M期,细胞分裂开场到终了。细胞同步化方法:可以分为自然同步化和人工同步化。人工诱导同步化的方法包括DNA合成阻断法和分裂中期阻断法。DNA合成阻断法是一种采用低毒或无毒的DNA合成抑制剂,特异地抑制DNA合成,而不影响处于其他时期的细胞进展细胞周期运转,从而将被抑制的细胞抑制在DNA合成期的实验方法。某些药物,如秋水仙素。秋水酰胺等可以抑制微管聚合,因此能有效地抑制细胞分裂器的构成,将
17、细胞阻断在细胞分裂的中期。什么是细胞分化?如何经过实验证明是细胞分化是基因选择性表达的结果?细胞分化:在个体发育中,由一种一样的细胞类型经细胞分裂后逐渐在形状、构造和功能上构成稳定性差别,产生不同的细胞类群的过程。细胞总DNA细胞总RNA 输卵管细胞 成红细胞 胰岛细胞输卵管细胞 成红细胞 胰岛细胞卵清蛋白基因 + + +珠蛋白基因 + + +胰岛素基因 + + + + +实验方法 Southern杂交 Northern杂交由上图可见,不同类型的细胞在发育过程中表达一套特异的基因,其产物不仅决议细胞的形状构造,而且执行各自的生理功能。由此也证明了细胞分化是基因选择性表达的结果。什么是细胞全能性
18、、持家基因、奢侈基因、原癌基因、抑癌基因?细胞全能性:是指细胞经分裂和分化后仍具有产生完好有机体的潜能或特性。持家基因:又称管家基因,是指一切细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞根本生命活动所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等。奢侈基因:在特别细胞类型中大量(通常)表达并编码特殊功能产物的基因。原癌基因:是细胞内与细胞增殖相关的基因,是维持机体正常生命活动所必需的,在进化上高等保守。抑癌基因:是正常细胞增殖过程中的负调控因子,它编码的蛋白往往在细胞周期的检验点上起阻止周期进程的作用。什么是顺式作用元件和反式作用因子?举例阐明。顺式作用元件:是同一DNA分子中具有转
19、录调理功能的特异DNA序列。启动子存在着很多顺式元件,可分为以下四种类型:中心启动子成分,如TATA框;上游启动子成分,如CAAT框,GC框,ATF结合位点;远上游元件:如加强子,沉默子等; 特殊启动子成分:如淋巴细胞中的Oct(octamer)和 HYPERLINK baike.baidu/view/1617853.htm t _blank kB。这些元件都为不同的转录因子及蛋白质识别和结合来调理转录。反式作用因子:是指能直接或间接地识别或结合在各类 HYPERLINK baike.baidu/view/299727.htm t _blank 顺式作用元件中心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋
20、白质。主要包括:DNA结合域、螺旋-转角-螺旋、锌指构造、亮氨酸拉链、螺旋-突环-螺旋。真核细胞基因有何特点?真核细胞基因转录后加工调理包括哪些?真核生物基因组的特点:1.大部分位于细胞核中,普通由多条染色体组成;少量存在于细胞器内线粒体或者叶绿体。2.多个复制起点。3.大量的反复序列。4.基因的转录和表达遭到“编辑。5.多转录成单顺反子mRNA。6.绝大多数编码蛋白质的基由于断裂基因外显子、内含子。7.假基因。8.基因家族基因簇。真核细胞基因转录后加工调理包括:1、hnRNA的修饰加工a、5末端“戴帽,阻止5末端继续添加核苷酸,不受磷酸酶和核酸酶降解,起稳定mRNA的作用,并利于同核糖体小亚
21、基结合,构成起始复合物。b、3-末端加“尾:即在3末端加上多个200-250个腺苷酸,构成PolyA“尾。促使3末端与内质网结合,而使3末端稳定,另外能够有延伸mRNA寿命的作用。利于从核孔中输出。c、部分核苷酸甲基化:某些腺苷酸的第6位碳被甲基化构成m6A。2、mRNA的选择性拼接修剪拼接:切去内含子,将外显子衔接的过程。内含子序列的准确切除是一种高度专注的作用过程,它需求mRNA前体中特异的识别信号,也需求细胞中识别这些信号的特定因子。3、mRNA的选择性运输细胞可以在不同情况下选择地将不同的hnRNA加工成mRNA,经过核孔的自动运输方式把它们运至细胞质。18、简述核小体的构造和从DNA到染色体的装配要点。H2A、H2B、H3和H4各两分子组成组蛋白八聚体,构成中心组蛋白。双螺旋DNA以左手超螺旋的方式绕中心颗粒1.75圈,缠绕在中心组蛋白外表,构成中心颗粒。中心颗粒、 衔接区DNA
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