15岛津LC2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程

1、云南品斛堂生物科技有限公司文件名称文件类别制定制定日期分发部门文件状态岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程质量部工作标准1/9颁发部门审核年月日审核日期生产部文件编号批准批准日期实施日期S0P0301500质量部、修订口新订口JAklmXjOTCl1/f/1/IW原因：执行2010年版药品生产质量管理规范7111目的：建立岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程，确保仪器的正确操作。.1X1KVIXXXslu1_宀Jf/fsfxJrxJr(rtxJyVHXaV/!zWzlT12范围：本规程适用于岛津LC-2030高效液相色谱仪使用VvVVVxVVnNVMXA

2、lifyVXAXlabrM/X/aAVXVifit/,、维修、保养。/ZMzx?f7FL/IjfZ3责任：化验室负责人，化验员。4内容:本系统由四元低压梯度系统输送泵据工作站和电脑等组成。f勻动进样器、UV检测器、柱温箱、LabSolutions色谱数AjL緻，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱固定相内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别被分离成单个组分依次从柱内4.2原理7流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。4.3技术参数NL流量设定

3、范围最大操作压力外形尺寸mm温控精度Tjffji/ifJrX/jm*iy0.000110mL/min44MPa刘卩/nI410X500X605mmM/VY)土0.1C丿yY；uAN土2.5X10-eAUPl流速精度进样数土1%或2pL/min216个样品4.4设备安装位置波长重现性1,|時波长范围漂移土0.1nm190700nm100XlXAU/h云南品斛堂生物科技有限公司文件名称文件类别岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程工作标准页码文件编号2/9S0P0301500设备名称放置房间in膜过滤。1谱仪自检结束后谱仪开系统自动进行扌眾要选这个择通道进管路排出P”的管扌接通电

4、原，检（器室/Tn行抽气，至到有液4.5.3等度洗兑4.5操作方法参数设定.1波长设定：在数据采集窗口的时间程序视图中检测器A,选择波长输入所需波长。HH.2流速设定：在数据采集窗口的时间程序视图中泵,选择泵总流量，输入所需流速。.3流动相比例设定：在数据采集窗口的时间程序中泵,选择所用泵，输入泵项下所准备所需的流动相，用合适的0.45pm滤膜过滤，超声脱气2030m根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的參m?线、数据线和输夜管道是否连接正yi4.5.2开机4.5.1准备需的浓度比例。云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲

5、线的方法文件;文件名称文件类别岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程工作标准页码文件编号3/9S0P0301500云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;设置好后，点击“下载”系统自动按照设置好的方法，进行走基线。基线平稳后，方可进样。可以进行单次分析或批处理分析。AH#JxWx.1单次分析:单击数据采集窗口助手栏上的“单次开始”图标；设置“样品名”“方法文件”I|X1XYf/yiKrxff、业ZltitifJi/LdMCvX“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击确定，系

6、统即自动进行单次分析。fLTX.xx.vXvXiyIfrs./fAJ1lAVXyvlf1/t/Iz7Zz?jFx-r/1-L/fbfHAAiL-lyjxX/X/.-辿丸4.5.4梯度洗脱排气:打开Purge，点击程序中的洎动排气”，系统自动进行排气，若使用多通道或梯度,根据实际需要选择通道进行排气女口果不出液，用针头接上“P”的管路，进行抽气至到有液体从“Purge”这个管路排出。参数设定.1波长设定：在数据采集窗口的时间程序视图中检测器A,选择波长输入所需波/-一一严/一#/、一-1长。/_-一Jjk,*和、一Jy_j.尺yy?u*.孔_%l、_-x.、rfJ一、VVJ.it.jyx幣桩逐_

7、列礼予乂一、-X.2流速设定：在数据采集窗口的时间程序视图中泵,选择泵总流量，输入所需流速。人乙/InjkW梯度洗脱设置程序:在数据采集窗口的时间程序视图,选择时间程序图标中的LC时间程序;设置程序洗脱的时间及流动相比例；设置完后应以controllerstop（控制仪器停止）为结尾；点击“时间程序”查看设置时间程序是否正确；点击“泵”选择泵，调节压力限制（最大JjFfJ,1IIl.!lIJ9Pi压力设为20.0MPa）;酬加册刖训b冥邇MffllANi七厶4宀一丄-U宀口77、rL中4上7厶人一设置好子后，点击“下载”系fl进行走基线。./AAAAAAA/!i/VVWjfklV基线平稳后，方

8、可进样。可以进行单次分析或批处理分析。www叭八roff/yyIAAXyVu.1单次分析:单击LC实时分析窗口助手栏上的“单次开始”图标；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击确定，系统即自动进行单次分析。1/云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;文件类别工作标准文件编号S0P0301500云南品斛堂生物科技有限公司文件名称岛津七修0高效液作色谱仪使用、页码云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;.6.2批处理分析:单击数据

9、采集窗口助手栏上的“批处理”图标；从文件菜单中选择新建批处理文件；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进羊体积”等信息点击保存，保存批处理文件；点击批处理助手栏中的“批处理开始”，系统即执行批处理程序。4.5.5泵的清洗检测完毕后，如流动相无盐、酸及缓冲液，可直接用甲醇或乙腈冲洗30分钟艮呵，如流动相含有盐、酸及缓冲液，先用甲醇:水=10:90冲流30分钟，再用甲醇冲洗30分钟艮呵。XX/xXVxAitVvih.tv.iX.hQh/A.(Ai1ir/r；丿i/i/iz/_-y/4.5.6样品测试完毕后，绘制标准曲线。方法如下：点击“LabSolutions”中的再解析图

10、标，LC再解析开始；单击再解析助手栏中的LC数据分析图标，出现LC数据分析窗口选择文件菜单中的打开数据文件,然后选择与测量的数据文件，数据文件打开;单击助手栏中的向导图标，出现化合物向导;请确保设置了正确的积分参数然后单击下一步；记录要识别的峰的保留时间，然后单击下一步；指定定量计算方法和校准曲线类型，然后单击下一步4.5.6W然后单6.9提供化合物表的详细设置，然后单击完成10单击LC数据助手栏中的应用至肪法图标；1肿Zmy,1命名方法文件并单击保存；WmWiM2单击确定而不进行任何更改；InanW3单击再解析助手栏中的校准图标；fjAaA/V云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准

11、曲线的方法文件;云南品斛堂生物科技有限公司4i4打开用于生成校准曲线的方法文件;文件名称岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、文件名称维修、保养操作规程工作标准5/9文件类别文件编号S0P-03-015-005拖入需要作校准曲线的数据，即得出校准曲线。4.5.7使用校准曲线计算数据浓度厂T、1/ytzT选择文件菜单中的打开数据文件，然后指定数据文件名；选择文件菜单中的加载方法参数,然后指定方法文件名，出现方法参数屏幕;jCTSCwHTKAamTSsHZX使用方法文件中的校准曲线计算数据的浓度。A77/iMxzvA4.5.8出具报告根据需要设置相应的报告格式；VTKj_y把测定的数据拖入设置好的

12、报告模块中，即得报告。_亠l“AIt4.5.9关机全部分析完毕后，先关检测器和柱温箱电源，再用适宜的溶剂清洗色谱系统。依次关闭系统空制器、泵和微机电源，拔下各插头，做好使用记录。_亠-4.6泵的使用和维护注意事项*4.6.1为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性，必须按照下列注意事项进行操作：*_-丿*二防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微粒，而常用的方法是滤过，可采用微孔滤膜（0.2pm或0.45pm）等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒（或片）。输液泵的滤器应经常清洗或更换。流动相不应含有任何腐性物质，含有缓

13、冲液的流动相不应保留在柱内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内，由于蒸发或泄漏，甚至是由于溶液的静置,就可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此，必须泵入加入少量甲醇或乙腈和纯水将泵充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂TTAAAAaAAP（对于反相键合硅胶固定相，可以是甲醇或甲醇水）。aH/ia人/VVMa卜5tysyi/,/VIIV/Yrj泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事

14、项4.6.5色谱柱的注意事项云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事项4.6.5色谱柱的注意事项文件名称岛津LC维修0高效操作色谱仪使用、页码维修、保养操作规程工作标准6/9文件类别文件编号S0P0301500云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事项4.6.5色谱柱的注意事项云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事项4.6.5色谱柱的注意事项输液泵的工作压力决不要超过规定的最高压力，否则会使高压密封环变形，产生漏夜。流动相应该先脱气以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性如果有大量气泡，泵

15、就无法4.6.2如果输液泵产生故障，须查明原因，采取相应措施排除故障。Ah正常工作。因是密封环磨损，需更换。没有流动相流出，又无压力指示。原因可能是泵内有大量气体，这时可打开泄压阀，使泵在较大流量下运转，将气泡排尽，也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原ixvKXWiakVir/YX/aMY压力和流量不稳。原因可能是气泡，须要排除；或者是单向阀内有异物，可卸下单向阀，进入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡，或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞，这时，可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡，或将纱滤棒浸入稀酸内迅速除去微生物，或将盐溶亍j*3!尸严*1二解，再立即清洗。云

16、南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事项4.6.5色谱柱的注意事项云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司4.6.5色谱柱的注意事项4.6.5色谱柱的注意事项压力过高的原因是管路被堵塞,检查堵塞或泄漏时应逐段进行。压力降低的原因贝何能是管路有泄漏。aP%?zS/j品斛堂试剂类别：有机溶剂、无机化合物、水4.6.3关于试试齐啲要求：.1有机溶剂的级别优级纯以上专用侖瞩.2无机化合物要求分析纯以上。.3水要求是去离子纯净水。uJ.L1YSiWWWw伽I/AAAAryCNaX7NMWonwvwHNWfMnHANiI/yWmK无气泡，通过超声月兑气，通氦

17、气等方法进彳亍月兑气。/HTyvnYvVsjfIaf1fljnftii纯净无杂质，常用方法为用0.45pm微孔过UA4.6.4流动相l4J/IufKAlKNfrf云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司文件名称岛津弋修0高效操相作色谱仪使用页码工作标准7/9文件类别文件编号S0P0301500压力：注意每根柱的耐压（最大使用压力）。pH的范围：不同柱子的pH值范围有所不同。清洗：柱子需要必要的清洗，请用户参考柱子的说明书。保存：长时间不使用柱子时需要用合适的试剂进行保存，请参考柱子的说明书。KJKMVOzIXHwLVMLI1M仙J

18、/9UaVl/fUfl/lMlaW7Zikf/rl/XZ/Y/f/4.6.6关于吸滤过滤器堵塞IsTmX-LVxNV1KW现象：塞吸现象、管路中不断产生气泡处理方式：将吸滤头1从溶剂管中拔出，放在正己烷或稀硝酸（一殳10%中超声清洗。4.6.7在线过滤器堵塞现象：不连接柱子及管路、混合器（松开泵进混合器或柱子的管路接头），设定泵流速为1ml/min，泵压力大于0.3MPa，说明在线过滤器堵塞。处理方式：一殳建议用户更换新的过滤器，也可以将在线过滤器拆下，用稀硝酸（浓度小于10%）,进行超声清洗。4.6.8压力波动的原因及处理方法丄二一产生波动的原因：有气泡；密封圈有磨损，产生微量的泄液；进口单

19、向阀中有异物（较常见）；在线过滤器，管路，柱子进口处有盐析出或杂物；处理方法：流动相进行脱气排除流路中的气泡；更换密封圈；清洗进出口单向阀，将/sc/厶N恣川1rmuiVSBWtKWfW单向阀置于烧杯中，用异丙醇进行超声清洗；检查并清洗过滤器及流路。4.6.9引起柱压升高的原因弋也专NW/iVuNikN取x卜色谱柱长时间使用后用户发现柱压比以往要高出许多，造成此田l/In11IJJI凶在线过滤器堵；高压混合器堵；进样器堵；流路中部分细管堵；流通池堵；柱子内部吸附样/kKhWkiW品产生堵。mWaAMVaNh确认方法进行分段检测，确认的确是柱子压力高还是以上5点原因中某个引起的。.此情况可能由以

20、下几个因素引起。LIuW云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司整个流路系统不干净整个流路系统不干净文件类别岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程工作标准文件编号8/9S0P0301500云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司整个流路系统不干净整个流路系统不干净云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司整个流路系统不干净整个流路系统不干净柱的出口到检测池的管路偏长或管路内径宽所致（常用内径0.3mm以下），导致样品扩散造成峰分叉。k1/ft,显示DLampERROR时，一般殳情况下认为氘灯不良需更换。WxXi.AX.tmh胆VlIl/A/1IAs光各系统受到污染或老化。Fr.一殳情况下，很小的气泡会停留在检测池中，所以需要在池管路出口1处加一个背压管，池中/I/1/!/TiAx/invf/IAItnSA.Myl4.6.13检测池中有气泡如何排除/说明：检测池能量高低以参比池为准。4.6.10进样峰分叉的原因流路及柱子等没有做任何改变的情况下，分析样品时，被检测峰产生分叉，J则说明保护柱或分析柱柱效下降，需再生保护柱或分析柱。4.6.11什么情况下需更换DLamp（氘灯）2（lx.xxMxl灯老化所致。氘灯使用时间过长（大于2000小时）,云南品斛堂生物科技有限公司云南品斛堂生物科技有限公司整个流路系统