全国各省市高考基因工程真题

1、基因工程一、选择题1应用基因工程方法，可将酵母菌制造成“工程菌”，用于生产乙肝疫苗，在制造该“工程菌”时，应向酵母菌导入下列中的()A乙肝病毒的表面抗原B抗乙肝病毒抗体的基因C抗乙肝病毒的抗体D乙肝病毒表面抗原的基因答案：D解析：运用基因工程方法生产疫苗，导入的一定是基因。抗乙肝病毒抗体的基因是人体内已存在的基因，制作疫苗选用的是乙肝病毒表面抗原的基因，这样就可以在酵母菌体内表达出大量的乙肝病毒表面抗原，从而可以制作成疫苗。2科学家将比目鱼的抗冻蛋白基因转移到西红柿细胞内培育出“抗冻西红柿”，在“目的基因的检测与鉴定”环节，不需要进行的是()A利用标记基因，将含有比目鱼抗冻蛋白基因的西红柿细胞

2、筛选出来B利用分子探针，检测“抗冻西红柿”的DNA上是否插入了抗冻蛋白基因C利用相应的抗体，检测“抗冻西红柿”细胞中是否形成抗冻蛋白质D进行抗寒栽培实验，检测“抗冻西红柿”是否能在寒冷环境中生存答案：A解析：目的基因的检测与鉴定可使用基因探针检测受体细胞中是否含有目的基因，也可使用抗原抗体杂交法检测目的基因是否翻译出蛋白质，还可在个体水平进行检测，看其是否表现出相应性状。利用标记基因，将含有比目鱼抗冻蛋白基因的西红柿细胞筛选出来不属于目的基因的检测与鉴定环节。3如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制“工程菌”的示意图，已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，下列说法正确的是()A

3、将重组质粒导入细菌B细胞常用的方法是显微注射法B将完成导入过程后的细菌涂布在含氨苄青霉素的培养基上，能生长的只有导入了重组质粒的细菌C将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的只有导入了质粒A的细菌D目的基因成功表达的标志是在受体细胞中能检测到目的基因的存在答案：C解析：将基因表达载体导入细菌B细胞常用的方法是转化法，A错误；质粒A中含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，而重组质粒中含抗氨苄青霉素基因，则在含有氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入质粒A或重组质粒的细菌，B错误；质粒A含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，所以完成导入过程后的细菌能在含有四环素的培养基上生长，而重组质粒

4、中的抗四环素基因已经被破坏，所以导入重组质粒的细菌不能在含有四环素的培养基上生长，C正确；根据题干信息分析，目的基因(人的生长激素基因)成功表达的标志是受体细胞能产生人的生长激素，D错误。4下表有关基因表达的选项中，不可能的是()选项基因 表达的细胞 表达产物A细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白B人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶C动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素D兔血红蛋白基因兔成熟红细胞 兔血红蛋白答案：D解析：细菌抗虫蛋白基因可通过转基因技术转入棉花体细胞内，在棉花的叶肉细胞中表达产生细菌抗虫蛋白，使棉花具有抗虫能力，A正确；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人

5、酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶，B正确；动物胰岛素基因可通过转基因技术转移到大肠杆菌体内，在大肠杆菌工程菌细胞中合成动物胰岛素，C正确；兔属于哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器，所以不可能表达出血红蛋白，D错误。5(2016北京朝阳区期末)下面是质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，ampr为氨苄青霉素抗性基因，tetr为四环素抗性基因，箭头表示限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择合适的酶切位点是()答案：C解析：要得到能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，

6、限制性核酸内切酶的酶切位点应在氨苄青霉素抗性基因内，破坏氨苄青霉素抗性基因，保留四环素抗性基因，C正确；ori为复制必需的序列，不能有酶切位点，A错误；B的切割会得到既能在四环素培养基上生长也能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，B错误；D的切割会得到不能在四环素培养基上生长而能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组质粒的细胞，D错误。二、非选择题6(2015全国卷)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题

7、：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_进行改造。(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰_基因或合成_基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即_。 (3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_和_，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。答案：(1)氨基酸序列(或结构)(2)PP1DNA和RNADNARNA、RNADNA、RNA蛋白质(或转录、逆转录、翻译)(3)设计蛋白质结构推测氨基

8、酸序列功能7我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答有关问题。(1)铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用_法获得此目的基因或用_技术扩增目的基因。(2)构建重组Ti质粒时，通常要用_分别切割_。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用_处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得_；培养基3与培养基2的区别是_。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻_。(4

9、)为研究外源基因的遗传方式，将T0代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的青霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗青霉素植株与青霉素敏感植株的比例为31，此结果说明外源基因的遗传符合_。有少数T1代株系的所有植株都表现为对青霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是_。答案：(1)化学合成(从基因文库中获取目的基因)PCR(2)(同种)限制性核酸内切酶含目的基因的DNA片段和质粒CaCl2(3)含有重组质粒(有青霉素抗性)的愈伤组织生长素和细胞分裂素的浓度比例(成熟)种子中铁含量(4)基因分离定律青霉素抗性基因没有表达(或青霉素抗性基因丢失)8.(2016贵阳

10、期末)下图是利用基因工程方法培育抗虫棉的过程。请据图回答相关问题：(1)从苏云金芽孢杆菌的DNA上获取抗虫基因，需要用到的工具是_，此工具主要是从_生物中分离纯化出来的，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的_键断开。(2)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有_，它能把目的基因整合到受体细胞的_上。(3)E过程是利用_技术完成的，要确定抗虫基因导入棉花细胞后，是否赋予了棉花抗虫特性，在个体水平上还需要做_实验；若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白，在分子水平上可利用_方法进行检测。(4)将目的基因导入植物细胞

11、，除采用上图中的方法外，还可采用_法和花粉管通道法。答案：(1)限制性核酸内切酶(限制酶)原核磷酸二酯(2)TDNA(可转移的DNA)染色体DNA(3)植物组织培养抗虫(或抗病)接种抗原抗体杂交(4)基因枪9组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制酶作用位点已标识)，据图分析：(1)人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入_。(2)人工改造时用限制酶处理，其目的是：第一，去除质粒上的_，保证TDNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于_。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。(3)若用

12、限制酶分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到细胞生长的现象是在含_中能够生长，而在含_中不能生长。答案：(1)启动子(2)产生吲哚乙酸的基因和合成细胞分裂素的基因(tet和tmr)目的基因(或外源DNA)准确插入(3)卡那霉素的培养基四环素的培养基解析：(1)基因表达载体应含有启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点。图中的四环素抗性基因和卡那霉素抗性基因属于标记基因，目的基因尚未插入，所以很容易判断出质粒中没有启动子。(2)从图可以看出限制酶将产生吲哚乙酸的基因完全切除，破坏了合成

13、细胞分裂素的基因，从而保证TDNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。同时限制酶还切掉了一处限制酶的切点，使整个质粒只有唯一的限制酶作用位点，这样就保证了目的基因的准确插入。(3)限制酶会切掉四环素抗性基因，而卡那霉素抗性基因仍然完好，所以成功导入抗虫基因的水稻胚细胞在含卡那霉素的培养基中可以生长，而在含四环素的培养基中不能生长。10(2016石家庄二模)请据图回答下列问题：(1)在培育转基因牛过程中，过程常用的方法是_。转基因牛可通过分泌乳汁来生产人类生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_，其作用是能够被_识别并结合，从而启动转录过程。(2)prG能激发细胞不断分

14、裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，最可能是_细胞，代表的细胞具有_和_的特点。(3)在抗虫棉培育过程中，需将抗虫基因(Bt毒蛋白基因)插入到Ti质粒的_上，通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入棉花细胞。要检测抗虫基因是否翻译成Bt毒蛋白，应从抗虫棉中提取蛋白质，并用_方法进行检测。答案：(1)显微注射法启动子RNA聚合酶(2)B(浆)无限增殖产生特异性抗体(3)TDNA抗原抗体杂交解析：(1)过程是将重组基因表达载体导入受体细胞的过程，将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。在转录过程中，RNA聚合酶识别基因序列上首端的启动子并与之结合后开始转录，故基因的首端要有启动子。(2)

15、浆细胞能分泌特异性抗体，但不能无限增殖，故导入prG的浆细胞既能分泌特异性抗体，又能无限增殖。(3)农杆菌中的Ti质粒上的TDNA可转移到受体细胞中并整合到受体细胞的染色体DNA上，故将抗虫基因插入到Ti质粒的TDNA上，通过农杆菌的转化作用就可以使抗虫基因进入棉花细胞。可利用能与抗虫基因表达的蛋白质发生特异性结合的抗体，发生抗原抗体反应，对目的基因表达的产物进行检测。 (2016全国卷1)40生物选修3：现代生物科技专题（15分）某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用Ba

16、mHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_（答出两点即可）。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_；并且_和_的细胞也是不能区分的，其原因是_。在上述筛选的基础上

17、，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有原因是_的固体培养基。（3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_(2016全国卷 = 3 * ROMAN III)40图（a）中的三个DNA片段上以此表示出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的）。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是_。（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得

18、了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_，不能表达的原因是_。（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。【参考答案】（1）Sau3A 限制酶Sau3A与BamH切割后形成的黏性末端相同（2）甲、丙 在基因表达载体中，启动子应位于目的基因的首端，终止子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才能表达。图中甲、丙均不符合，所以不能表达目的基因的产物（3）EcoliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶（2016江苏卷）33.（9分）下表是几种限制酶识别序列及其切

19、割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题： （1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于_态的大肠杆菌。（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中_。（3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 （填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开。（4）若用Sau3A I切图1质粒

20、最多可能获得 种大小不同的DNA片段。【答案】（1）BclI和Hind 连接 感受 （2）四环素 引物甲和引物丙（3） 都不能 （4）7【解析】（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamH I可能使质粒中启动丢失，因此可能选Bcl I和Hind。酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于感受态的大肠杆菌。（2）为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌，根据质粒上的抗性基因，应在筛选平板培养基中添加四环素。PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链。（3）根据BamHI和Bcl I的酶切点，BamHI酶切的

21、DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，与两种酶的酶切位点均不同。(4)根据BamH I、Bcl I和Sau3A I的酶切位点，Sau3A I在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为A、B、C三种片段，若部分位点被切开，可得到AB、AC、BC、ABC四种片段，所以用Sau3A I切图1质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。（2015重庆卷，6，6分）6.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点【答案】C【解析】由于胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此在肝细胞中无胰岛素基因的转录产物mRNA，A

22、项错误；胰岛素基因的转录启动于启动子，而不是复制原点，B项错误；抗生素抗性基因可作为标记基因在含有抗生素的培养基中将受体细胞筛选出来，C项正确；终止密码子位于信使RNA，不位于DNA上，启动子和终止子均在胰岛素基因转录中起作用；（2015年北京，5）在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ） A、用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B、用选择培养基筛法导入目的基因的细胞 C、用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生物质融合 D、用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽【答案】C（2015年广东，25双选） 图9为培育转基因山羊生产人贝塔B-酪蛋白的流程图下列叙述正确的

23、是ACA过程 = 1 * GB3 所用的人贝塔B-酪蛋白基因可从人C-DNA文库中获得B. 过程 = 2 * GB3 可选用囊胚期或原肠胚期的胚胎进行移植C过程 = 3 * GB3 可使用胚胎分割技术扩大转基因山羊群体D过程 = 4 * GB3 人贝塔B-酪蛋白基因在细胞质内进行转录、翻译（2015新课标卷，40，15分）40.【生物选修3：现代生物科技专题】(15分)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题

24、： = 1 * GB2 从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的 进行改造。 = 2 * GB2 以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰 基因或合成 基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括 的复制；以及遗传信息在不同分子之间的流动，即： 。 = 3 * GB2 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过 和 ，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物 进行鉴定。【答案】（1）氨基酸序列（或结构）（1分，其他答案合理也给分） （2）P P1 （每空2分，共4分）

25、DNA和RNA（或遗传物质）（2分） DNARNA、 RNADNARNA蛋白质（或转录、逆转录、翻译）（3分） （3）设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列（每空2分，共4分） 功能（1分）【解析】本题考查蛋白质工程相关知识，难度较小。对蛋白质的氨基酸序列（或结构）进行改造，可达到改变蛋白质的功能的目的。（2）以P基因序列为基础，获得P1基因，可以对P基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法则的全部内容包括DNA的复制、 DNA RNA、RNADNA、RNA蛋白质（或转录、逆转录、翻译）。（3）蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列，推测相应的核

26、苷酸序列，并获取基因。经表达的蛋白质，要对其进行生物功能鉴定。（2015新课标卷，40，15分）40.生物选修3：现代生物科技专题 HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：（1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白（目的蛋白）时，可先提取HIV中的 ，以其作为模板，在 的作用下合成 。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。（2）从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是 。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是 。（3）已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这

27、种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分 细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。（4）人的免疫系统有 癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。【答案】（1）RNA 逆转录酶 cDNA（或DNA）（2）抗体 抗原抗体特异性结合（3）T（或T淋巴）（4）监控和清除【解析】（1）HIV属于逆转录病毒，它的遗传物质是RNA，在逆转录酶的作用下可以逆转录为cDNA，用于构建基因表达载体，从而制备HIV的某蛋白。（2）HIV的某蛋白作为抗原进入机体后，能刺激人体产生针对该抗原的一种特殊的分泌蛋白抗体；可用该抗体进行抗原抗体进行杂交来检测血清中是否含有HIV。（3）HIV病毒营寄生

28、生活，寄生在T淋巴细胞内，T细胞参与体液免疫和细胞免疫，因此少了T细胞，特异性免疫几乎全部丧失，降低了机体的免疫功能。（4）人体的免疫系统具有防卫、监控和清除的功能，可及时清除体内产生的癌细胞，艾滋病患者的整个免疫功能缺陷，机体会发生一系列顽固性机会感染和肿瘤的发生。（2015年海南，31【生物选修3：现代生物科技专题】（15分）在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛素原经酶乙切割去除中间片段C后，产生A、B两条肽链，再经酶丙作用生成由51个氨基酸残基组成的胰岛素。目前，利用基因工程技术可大量生产胰

29、岛素。回答下列问题：（1）人体内合成前胰岛素原的细胞是，合成胰高血糖素的细胞是。（2）可根据胰岛素原的氨基酸序列，设计并合成编码胰岛素原的序列，用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体。再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成的基因工程菌。（3）用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，则用该工程菌进行工业发酵时，应从中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便可转变为胰岛素。【答案】（1）胰岛B细胞 胰岛A细胞 （2）DNA序列 胰岛素原 （3）菌体【解析】（1）由题意可知，前胰岛素原在细胞内经加工后成为胰岛素，人体合成胰岛素的细胞是胰岛B细

30、胞，所以合成前胰岛素原的细胞也是胰岛B细胞；合成胰高血糖素的细胞是胰岛A细胞。（2）根据胰岛素原的氨基酸序列，可设计并合成编码胰岛素原的DNA序列（即目的基因）；用该序列与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体，再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能稳定合成人胰岛素原的基因工程菌。（3）根据题意，培养液无抗原抗体反应，菌体有抗原抗体反应，所以用该工程菌进行工业发酵时，应从菌体中分离、纯化胰岛素原，经酶处理便可转变为胰岛素。（2015安徽卷，31，9分）（9分）科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。由过程获得的A为_。

31、在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_。受体应选用_期卵母细胞。进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_。31、答案含目的基因的表达载体。（2）保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 M （3）免疫排斥反应（4）整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 解析（1）根据题意可知，要将人凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞，必须构建基因表达载体，所以由过程获得的A为基因表达载体。（2）为保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，在核移

32、植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分裂中（M中）期卵母细胞。（3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养。（2015年天津，8）纤维素分子不能进入酵母细胞，为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含3种不同基因片段的重组质粒，下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答：（1）本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶

33、切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是_或_设置菌株为对照，是为了验证_不携带纤维素酶基因。纤维素酶基因的表达包括_和_过程，与菌株相比，在菌株、中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有_。（4）在以纤维素为唯一C源的培养基上分别培养菌株、，菌株_不能存活，原因是_。(5)酵母菌生产酒精的细胞部位是_，产生酒精时细胞的呼吸方式是_，在利用纤维素生产酒精时，菌株更具有优势，因为导入的中重组质粒含有_。使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新二造成的酶的流失，提高酶的利用率。【答案】（1）B (或C) C (或B) (2)质粒DNA和酵母菌基因组转录 翻译 内质网、高尔基体 = 4 * GB2

34、* MERGEFORMAT = 2 * ROMAN * MERGEFORMAT II 缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到胞外，细胞无可利用的碳源（5）细胞质基质 无氧呼吸 A基因片段（天津卷）4.为达到相应目的，必须通过分子检测的是B.产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选【答案】B【解析】可通过将受体菌接种在含链 HYPERLINK 霉素的培养基中筛选携带链霉素抗性基因的受体菌，A错误；抗人白细胞介素的杂交瘤细胞应通过抗原-抗体杂交技术筛选产生，B正确；在棉花田中人工放入害虫可检验转基因抗虫棉的抗虫效果，C错误；可利用显微镜检测21三体综合征，D错误。（广东卷）25利用基因工程

35、技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图14所示，下列叙述正确的是（ ） A、过程需使用逆转录酶B、过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C、过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D、过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞【答案】AD【解析】过程是以RNA为模板 HYPERLINK 合成DNA的过程，即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；过程表示利用PCR扩增目的基因，在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；利用氯化钙处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，故C错；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中，可以采用DNA分子杂交技术，故D

36、正确（课标卷）40生物选修3：现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：（1）理论上，基因组文库含有生物的 基因；而cDNA文库中含有生物的 基因。（2）若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中 出所需的耐旱基因。（3）将耐旱基因导入农杆菌，并通 HYPERLINK 过农杆菌转化法将其导入植物 的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的 ，如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检

37、测植株的 是否得到提高。（4）假如用得到的 HYPERLINK 二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为31时，则可推测该耐旱基因整合到了 （填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”）。【答案】（1）全部 部分（2）筛选（3）乙 表达产物 耐旱性（4）同源染色体的一条上【解析】（1）基因文库包括基因 HYPERLINK 组文库和cDNA文库，基因组文库包含生物基因组的所全部基因，cDNA文库是以mRNA反转录后构建的，只含有已经表达的基因（并不是所有基因都会表达），即部分基因。（2）从基因文库中获取目的基因需要进行筛选。（3）要提高植物乙的耐旱 HYPERLINK 性

38、，需要要利用农杆菌转化法将耐旱基因导入植物乙的体细胞中。要检测目的基因（耐旱基因）是否表达应该用抗原抗体杂交检测目的基因（耐旱基因）的表达产物（即耐旱的相关蛋白质）；个体水平检测可以通过田间实验，观察检测其耐旱性情况。（4）如果耐旱基因 HYPERLINK 整合到同源染色体的两条上，则子代将全部表现耐旱，不会出现性状分离。或“如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上，则转基因植株的基因型可以用A_表示（A表示耐旱基因，_表示另一条染色体上没有相应的基因），A_自交后代基因型为AAA_ _=121，所以耐旱不耐旱=31，与题意相符（天津卷）8.（12分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的-葡萄糖苷酶（BglB）

39、是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：.利用大肠杆菌表达BglB酶PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。右图为质粒限制酶酶切图谱。b HYPERLINK glB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 。.温度对BglB酶活性的影响据图1、2可 HYPERLINK 知，80保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。A.50 B.

40、60 C.70 D.80.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞 HYPERLINK 杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变【答案】（1）嗜热土壤芽孢杆菌（2）Nde BamH（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶（4）失活 B（5）A、

41、C【解析】（1）bglB基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌基因组中，故应以该菌的基因组DNA为模板进行基因扩增。（2）目的基因与质粒进行重组时 HYPERLINK ，需将目的基因插入到启动子和终止子之间，且应靠近启动子和终止子，结合示意图可知，应在扩增的bglB基因两端分别引入Nde和BamH两种限制酶的识别序列。（3）该基因表达载体中含有bglB基因，其可表达产生-葡萄糖苷酶，其可分解纤维素，这样大肠杆菌就获得了分解纤维素的能力。（4）由图2可知，BglB HYPERLINK 酶在80保温30分钟后，该酶就会失活；由图1可知，当温度为6070时，酶活性较高，而由图2可知70时保温30分钟，酶活性开始

42、减弱，而60保温30分钟后酶活性基本不发生变化，由此可知为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好应控制在60，故选B。（5）在bglB基因扩增过程 HYPERLINK 中加入诱变剂进行诱变处理，相比于诱变剂直接处理嗜热土壤芽孢杆菌，针对性更强；基因突变是不定向的；由于PCR过程基因扩增即DNA复制快速进行，发生突变后可进行快速积累，进而便于筛选；基因突变可能导致氨基酸数目的改变，如突变后的密码子变为终止密码子，可导致蛋白质合成提前终止，进而导致氨基酸数目变少。（2014重庆卷）4.题4图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是A的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与

43、B侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异【答案】D【解析】构建载体需要限制酶和 HYPERLINK DNA连接酶，A错误；侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到的染色体上，B错误；染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误；植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确。（江苏卷），错误的是【答案】ABC【解析】限制性核酸内切酶 HYPERLINK 大多是特异性识别6个核苷酸序列，但也有识别序列由4、5或8个核苷酸组成的，A错误；PCR中耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用，B项错误；载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，C错误；目的基因导入了受体细胞不一定就都能正常表达，D正确。（2014山东卷）36.（1