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文档简介
1、稳心颗粒对心力衰竭兔心肌细胞钙调控蛋白的影响研究背景心肌细胞收缩/舒张功能与心肌细胞内钙循环密切相关 心衰时心肌细胞钙离子循环异常是心肌舒缩功能障碍的细胞学基础 稳心颗粒抗心律失常时能改善心衰患者和动物的心功能稳心颗粒与西药联合应用治疗CHF具有协同增强心功能的作用Bers (2002) Nature 415: 198-205钙 循 环通过左心容量和压力超负荷方法制作家兔心衰模型及稳心颗粒对心衰家兔心功能的作用探讨稳心颗粒对心衰时钙调控蛋白的影响研究目的实验动物 新西兰大耳白兔,3月龄,雌雄不拘,体 重2.03.0 kg 分组 假手术组 (shame) 8只 假手术稳心颗粒组 (HF-drug
2、) 8只 心衰组 (HF) 10只 心衰稳心颗粒组 (HF-drug) 10只 材料和方法主要器材 多道生理记录仪 (中国四川锦江通用实业) 超声心动图仪 ( Vivid 7,美国GE公司) 基因扩增仪 (Bioneer,EDC-810) DNA电泳仪 ( Bio-RAD ,Sub-Cell Model 96) 酶标仪 (PerKinElmer,Wallac 1420 ) 凝胶成像仪 ( Bio-RAD,Universal Hood ) 材料和方法材料和方法主要药品和试剂 稳心颗粒 (山东步长制药) 肝素钠注射液 (天津生物化学制药) 钙调控蛋白引物 (Invitrogen Biot) 钙调控
3、蛋白一抗 (abcam公司) 组织总蛋白提取试剂盒 (谷歌生物公司) 心衰动物模型制作 新西兰大耳兔主动脉瓣关闭不全腹主动脉缩窄EF 1.20 cm脉压增大50%超声资料左室舒张末内径 LVEDD左室收缩末内径 LVESD左室舒张末容积 LVEDV左室收缩末容积 LVESV左室射血分数 LVEF左室短轴缩短分数 LVFS检测指标RT-PCR和Western blot肌浆网钙泵 SERCA2a雷诺定受体 RyR2受磷蛋白 PLB钠钙交换体 NCX基因和蛋白表达情况检测指标计量数据均以均数标准差表示采用单因素方差分析所有数据均采用SPSS13.0分析P0.05有统计学意义统计学处理稳心颗粒改善心衰
4、家兔的心功能LVEDD (mm)1.300.13 1.310.10 1.840.08 1.550.07LVESD (mm)0.780.07 0.810.08 1.540.12 1.050.07LVEDV (ml)4.181.07 4.080.80 10.341.19 6.680.79 LVESV (ml)1.060.27 1.160.31 5.900.75 3.040.51 LVEF (%)74.472.5074.054.19 44.392.04 55.152.28 LV FS (%)39.722.23 39.493.63 20.391.01 26.351.28 与假手术组相比, P0.05;
5、与心衰组相比, P0.05假手术组(n=8)假手术稳心颗粒组 (n=8) 心衰组 (n=7) 心衰稳心颗粒组 (n=7) 结 果 稳心颗粒能提高心衰家兔的 LVEF 和 LVFS *P0.05, 与假手术组比较,P0.05,与 心衰组比较 结 果心衰组RyR2mRNA表达降低,稳心颗粒对 RyR2表达无影响RyR2-actin 1. shame 2. shame-drug 3 .HF 4. HF-drug149bp184bp 1 2 3 4 1 2 3 4*P0.05 结 果心衰组SERCA2a表达降低,心衰稳心颗粒组 SERCA2a表达水平上调143bp184bpSERCA2a-actin1
6、. shame 2. shame-drug 3 .HF 4. HF-drug*P0.05, 与假手术组比较,P0.05 结 果心衰组NCXmRNA和蛋白水平表达降低 稳心颗粒对NCX表达无影响 133bp184bpNCX-actin*P0.05 vs 假手术组1. shame 2. shame-drug 3. HF 4. HF-drug 1 2 3 4 1 2 3 4结 果本研究采用主动脉瓣返流联合腹主动脉缩窄致左室压力和容量超负荷的方法成功制作家兔心衰模型 稳心颗粒可增加容量和压力超负荷心衰兔的LVEF和LVFS,改善左室收缩功能结 论结 论 稳心颗粒改善心衰心功能的机制 SERCA2a 表达 SR摄钙能力SR钙容量 钙瞬变 稳心颗粒 收缩功能舒张期Ca2+浓度舒张功能胞浆Ca2+清除率PLB表达水平不变SERCA表达水平 PLB / SERCA2a 水平比值 PLB 对SERCA2a 的抑制作用SERCA2a功能 稳心颗粒改善心衰心功能的机制结 论心衰组 NCXmRNA 和蛋白表达减少,可能与心衰分期有关,相关的机制还需要进一步研究 。结 论稳心颗粒可一定程度上改善容量和压力超负合所致家兔心衰
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