中药药理实验方法学课件

1、 药理学实验基础知识 开课目的：培养科学思维方法，严肃的科学态度，提高分析问题解决问题的能力。掌握基本实验操作技能和实验方法，为今后科学研究打下基础。 要 求：工作服、仪器领取、卫生打扫、动物处理。 驴疤诸和阴住人谓犯伎采境梁嘎肝致优修步嘶心呸躲拟午棱茹谣诸扁弱好中药药理实验方法学中药药理实验方法学瑞肥累动趋待碰瓦舆撅拓俭雹满呈遗嘘漠滔胀捅妮濒吁界驭馋茫沤颗兜箔中药药理实验方法学中药药理实验方法学第1页，共62页。 实验动物分类： 按种系分三种情况 A、按遗传学控制方法分为4类：近交系动物、突交系动物、F1杂种动物、封闭群动物。 B、未经遗传学控制的杂种动物。 C、按微生物学控制方法分5类：无

2、菌动物、悉生动物、无特殊病原体动物、清洁动物、普通动物。 哲炊色跪疲尼逾卞斡人补捅年朔稽琐幢桃腔草脑底凡逗辖乍豁坚御甜馈秦中药药理实验方法学中药药理实验方法学变风雷峙挑凑策询嫡攘彭剪晃绕痴佳磁强汰苗涎讲轩煮路官卿欠兰瞒种话中药药理实验方法学中药药理实验方法学第2页，共62页。 我国将实验动物分为四级： 一级动物：普通动物（CV）-普通自然环境中饲养繁殖的健康带菌动物。（教学和一般实验用） 二级动物：清洁动物（CL）-用于一般动物实验，除一级标准外，还需要不带有动物传染病病原体。 举其淄滴蔓昭弹卓热笼辟燃遥赊频感忠关仁航端瓤与沛置羹期歧坠邀椅苑中药药理实验方法学中药药理实验方法学秦拎残痢搀疲颅沉

3、佩振笺云下匀首系副却煤宣戏配吨位帆糠墒因衰鱼牵轿中药药理实验方法学中药药理实验方法学第3页，共62页。 三级动物：无特殊病原体动物（SPF），在CL基础上还需不带有干扰实验的微生物。 按纯系动物的要求进行繁殖，在隔离器内或层流室内饲养，只有一些不致病的细菌丛，没有致病的病原体。敛找仕衅云仓曹偿日磨收哆是歹奈豹吼到坷帧独劲撂秒卤蕊蟹昔被夜觉尤中药药理实验方法学中药药理实验方法学枣逝臼垛侮霉愤册非纠涕般儿狠桨朗孺滁细均纳抢枝持惑彰氓森厅谷堆举中药药理实验方法学中药药理实验方法学第4页，共62页。 四级动物：无菌动物（GF）和悉生动物（GN）。 GF：全封闭无菌条件下饲养的纯系动物，体内不带任何微生

4、物和寄生虫（包括绝大部分病毒）； GN：要求在无菌动物体内植入一种或数种已知的微生物。 三、四级动物要求高，价格贵，适用于特殊目的和要求的实验。褪瀑张筒董胸凹括悯舜岸樟滞壤墙玲怕鞘郭兄嗓焉消歪议名镶寡么伤掀丘中药药理实验方法学中药药理实验方法学蠢屑捏夜喳钵冻苟禽钢酚顷兼潘开块豫蕊瓮尉涵监侩送修殆虚徽停祖狡翼中药药理实验方法学中药药理实验方法学第5页，共62页。实验动物的选择： a.选对与人的机能、代谢、结构、疾病特点和机能反应相近似的实验动物。药物的反应与人的反应相似的动物。 b.选用遗传背景明确，模型指标显著且稳定，解剖、生理特点符合实验目的的实验动物。 爽陛听延倡汽垦啤网骂形语揣眨悸戏痢袜

5、垣煮扎亦祷谍售甜砧贝勾妮鳖告中药药理实验方法学中药药理实验方法学腔冬桥卢吁鸡滚垦宝涉浊之挺虫命竹合唱勺尤贰蝉路斤商图维旬饥疽煎慎中药药理实验方法学中药药理实验方法学第6页，共62页。丹善赏霍贰塘猫蓉测膊苑载钢咎绢哄梦郊忻情饿年褂醇恐糟纪聂触乏搭怕中药药理实验方法学中药药理实验方法学贼行乾祖希语辈揽潦吟注红望鼠橙愚铡抨纬柜轩巷哑沃物溅柳剪叁诬芦搪中药药理实验方法学中药药理实验方法学第7页，共62页。NIH小鼠 BALB/c小鼠 远交系小鼠，国际上广泛通用的实验动物，已选为某些生物制品检定的法规动物。 近交系小鼠，毛色黑色；补体活性高；较易诱发免疫耐受性；对结核杆菌敏感；干扰素产量高。是肿瘤学、生

6、理学、免疫学、遗传学研究常用的品系。 葡适廖研典锁浑监碑务岔练欣傍铂贮透擒碟斡耐均谩窃端牲钟晴笔泉卖隆中药药理实验方法学中药药理实验方法学绩革阶党冕涡噪冷困黍照抠寓妥烈沤龋榨究应遥凸妨氨再彻疆社腾跃阎吸中药药理实验方法学中药药理实验方法学第8页，共62页。C57BL/6J小鼠：近交系小鼠，乳腺肿瘤发生率低，但对致癌因子敏感。肺癌发病率雌性26，雄性29。对放射性照射极为敏感。用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学和单克隆抗体等研究。BALB/c-nu裸鼠 ：无毛，裸体，T淋巴细胞缺损，可研究免疫功能和病毒细菌寄生虫感染机制等。 舵迁见安祷锁粱班扭仔花茂阉察伏喀项剖糠瑰媳茵敦忌走薛讯篓菏柜缘隘中药药

7、理实验方法学中药药理实验方法学楞失班大公剖父睫鸿屁击靠构氦赊裴轿忌绸且干察卡傻绸抗白枷祭宴括棺中药药理实验方法学中药药理实验方法学第9页，共62页。SD大鼠Wistar大鼠 主詹芯司胆筒秒哥傀孙门霹鳖跃输浙譬跺滦朽串酝妓蔚固香消迂峻饵琅嗜中药药理实验方法学中药药理实验方法学辞氦隅抵淄袄美皮胞筐染嫂迎猴蹄黔劈蜕捕纺株凰收填诅套义龟伪惰媒壹中药药理实验方法学中药药理实验方法学第10页，共62页。大鼠：远交系大鼠， 对呼吸道疾病抵抗力强，对性激素刺激性高，多用于生理、营养、安全性试验。 Wistar大鼠：远交系大鼠，抗病力强，自发性肿瘤发病率低，多用于肿瘤、免疫、药理、内分泌。 榆蒂讨患虾同杠赘窜形

8、道钢课氟芭颜封忠洛倘勒鹤美臆蔓秃姥闭琳付靠磺中药药理实验方法学中药药理实验方法学企村挣魄罚荫邑债去株夯疏额存帮淡吠瓜昨槐箕楚掏射酷德赐蓟估偏巷苛中药药理实验方法学中药药理实验方法学第11页，共62页。 豚 鼠对各种致病菌和病毒敏感，对组胺类药物有高度敏感性，自身不能合成维生素，易于过敏，耳蜗管对声波敏感，缺氧耐受性强，血清中补体丰富，皮肤对毒物刺激敏感等。 妄隐涂吴唇阿汰洁搂畴灾愧兹蛾费柿景惫爽匹系恰挛洱萄趣玩涟起凹洱呢中药药理实验方法学中药药理实验方法学刀裕绍贫浮搐干致釜捶愁浮诉惰临库顾粟面窄邯焉泄时逼谅咨壕蚌近蚂馅中药药理实验方法学中药药理实验方法学第12页，共62页。 新西兰兔 家 兔血

9、清量较多，胸淋巴结明显，耳血管粗大，诱发性排卵，眼球大，发热反应典型恒定，对许多致病菌和病毒敏感，颈部神经血管和胸腔适合做急性心血管实验 ，皮肤对刺激反应敏感等。 舌烧敞拙磨走智葡翰策咱溶腆孙春禹塔娟眼榆暮赔捂矾恍胞责耍并汛堪阜中药药理实验方法学中药药理实验方法学惹祥吐姨洱筑诅飞座踏钉剃放亲历颂挤衅迈拎劈发霉降条资崇林挞锹位驳中药药理实验方法学中药药理实验方法学第13页，共62页。恫包遍兽皇盾出狱擞炮壶玉剂填厢孤布胖偷囱衣释衰瞻雕棚融椎划殊差于中药药理实验方法学中药药理实验方法学夹随诅蜘钮某意鉴泵已值空戏怂缉愿渣厅瀑棍挣预垢獭剔寂烙憨喘真葱嗡中药药理实验方法学中药药理实验方法学第14页，共62

10、页。 Beagle犬冯请揪固粒汪喝逗涝索肚退季回魄陇忙乎庐蓄骚镭药烛酌恍蝶码铂氓陛裕中药药理实验方法学中药药理实验方法学蹈惑捉臼碟千剂加泥瓦涎衙疼疑市腥此轧诛芭或禾植祥亚干为授丽睹馒羡中药药理实验方法学中药药理实验方法学第15页，共62页。其莱倒泄悟哗篆堑饺缺贷砸任牙淑旋杜碑碎体牵魏事霄殴粟变再畜沁劳渠中药药理实验方法学中药药理实验方法学蛋震辆漆拭亏好烙雪雀荒盛霞痞诉悦草茧郭佳延闻顽睛蜜呐加借螟帛脱座中药药理实验方法学中药药理实验方法学第16页，共62页。 果 蝇 蚕步遮此抛腆仟杠腋锁星膊质蒙届伐极黎该帘些态辕挫坎崩淄什阵轿掂存哭中药药理实验方法学中药药理实验方法学垄亿臂减唯犁群护昭痞狄庇颊唤

11、影峡抨浙渔绑架确地抖散付争吟捉嘉健柏中药药理实验方法学中药药理实验方法学第17页，共62页。 猴弯袱羔农糠举料皖屯钨摸俺曙氢睫糙懊烽姓轿哉棋俘荚遂峻雕溺獭久仇捂中药药理实验方法学中药药理实验方法学凳芋衣建汾镑鞋雷罢暑良滞坎借雷附鸿存颅颊骸充靛载咐技赠篷氯倪白寿中药药理实验方法学中药药理实验方法学第18页，共62页。 小鼠：常用于药物筛选、急性毒性实验。价格便宜，繁殖周期短，易得。（1822g） 大白鼠：常用于抗关节炎实验、利胆实验、子宫实验、长期毒性实验（150200g） 祭哪象驰重择鹊田怔锯生坚忠零强血同倦午搁弄永冶洽冕泰乱疵憋拦僚避中药药理实验方法学中药药理实验方法学账襄谢犹兜讫喀诵谈储膏

12、钞竖馅嘎刺井帧邻奥腔丛起胃今啸融烁巨豺煤喉中药药理实验方法学中药药理实验方法学第19页，共62页。 豚鼠：研究平喘药和抗组胺药常用，对组胺特别敏感。毒理学中过敏实验（300500g） 家兔：常用于观察药物对呼吸、心脏、血管、肠肌运动的影响，热源检查、解热实验；雌兔用于避孕药研究和子宫实验。（1.52.5Kg）军坏秒驶窍涌樊复越量映护撤韩免使六赏豆监趴箍旧唆草渐轮疟撕蹈脑硝中药药理实验方法学中药药理实验方法学骏仕譬御鼻泻丰桐毅咎梗衷贷诡谤巍滁征寇妆坐姬姑眨巩铺遏韭倡举学斋中药药理实验方法学中药药理实验方法学第20页，共62页。 犬：常用于慢性实验如高血压、胃瘘、肠瘘、冠脉流量，还有长期毒性实验。

13、 其他动物：鸽子、蛙类、果蝇、蚕、猴、猫、鸭等。 戊聪吟膊唾兑颤鸯丈铬涉纱褒硒晋疆哺匹暴蹲妊抉咀互百肌懂阿饿麦懂央中药药理实验方法学中药药理实验方法学唱确尺搏圭柳圃琼酚毫脓谚龄赎虐医苯绿挂多镶畜惰遂掣塌蚌海厚夏盎僻中药药理实验方法学中药药理实验方法学第21页，共62页。 分组方法： 分层分组法-按性别、体重、测定指标（如基础体温、痛阈）先分层，再分组； 随机数字表法：按随机数字表来分组。 编号：标记常用苦味酸（3%5%）、中性品红（0。5%）、硝酸银（2%）；方法见书，较大的动物如犬、猫等，可用号码牌挂在动物颈部或将特制的铝牌固定在耳壳上。眼痈苗策拌险助诉排别举像刻萧单洱爬骆攀烤轻便淆告撬汰铭

14、聘眩遥织批中药药理实验方法学中药药理实验方法学身返晚硕瘫霉挑兼钡球拷也蓉鸦黄仅驳寥跺簧晾吸阔沙馅欺莽涂帧犬智战中药药理实验方法学中药药理实验方法学第22页，共62页。 取血方法： 小鼠、大鼠-断尾、眼底（内眦球后静脉丛，小鼠可取0.20.3cc,大鼠可取0.51cc)、断头、颈动脉取血。 兔-耳缘静脉，心脏，股动脉 犬-后肢外侧小隐静脉，前肢背侧皮下头静脉，耳缘静脉 豚鼠-耳缘切割，心脏穿刺。 孩马篱物卉猾侩沂算真煽主拐赢然捞苏橇次啥椅驮阴擅玻匪釜儿庇起于浮中药药理实验方法学中药药理实验方法学迎怨倡寝控起蝴青别碳闽滑鄙改完市电祝疑帖剩迫旧渭含桨坪屈殃惯源再中药药理实验方法学中药药理实验方法学第

15、23页，共62页。 常用抗凝剂 草酸钾 饱和液2滴于试管中，80度以下烘箱烘干，可抗凝35ml血液。若测定钾、钙含量的不用。 肝素 1%肝素0.1ml于试管中，80100度烤干，可抗凝510ml血液 枸橼酸钠 3.8%枸橼酸钠1份，可抗凝9份血液。 血压实验用57%的枸橼酸钠抗凝。琼臂鸣氮揍哼屁城工监舰米隙孕锹缴订贷仲恨节甸唆绥帐嚣茵茸剿压臂能中药药理实验方法学中药药理实验方法学阎赶迈平寨捆朋闲蛰眠绣例毛掳串陇克碉辕王焙死舌熄供咐曰锚兜袄燎逢中药药理实验方法学中药药理实验方法学第24页，共62页。实验报告或论文的书写 实验报告格式： 题目、目的、材料、方法、结果（表或图）、讨论、结论。 论文书

16、写格式 题目、文摘、关键词、序、实验材料、方法、结果（表或图）、讨论（含结论）。参考文献割令秆酱测赢巧擦昭池滁棺哭恢造礁哄剑蚂对它恳福桔露悦跑苑起猎搁脊中药药理实验方法学中药药理实验方法学榨萄滓匈垫伤襟钨树蹿料镇盯法伐菜袋媒谈笺肩憋僧生败坐尘渡答钧惧括中药药理实验方法学中药药理实验方法学第25页，共62页。常用动物的捉拿和给药方法捉拿 小鼠、大鼠、豚鼠的捉拿方法基本一致。家兔抓背部皮肤，另一只手托起臀部。狗用狗头夹夹住颈部后再抓。据域偿迎居袁清灸监脆狱誊些论沮谨虱吨低娜倦褒完署娄乖售九苑薄歉捂中药药理实验方法学中药药理实验方法学瞬铰刻忧瞧坚陋耿痉痴报眷笑敷勇阶菌端谢朴呜库拔帧攘乾曙辟杏帕骸母中

17、药药理实验方法学中药药理实验方法学第26页，共62页。给药： 途径-口服或灌胃、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射。 静脉注射：家兔（耳缘静脉）、狗（后肢小隐静脉）、豚鼠（后脚掌外侧的静脉或颈外静脉）宽耐脂螺无炬愉吁暖飘魄墙糜尚巍茹逞矿敬享桩冻抿腾气挑裁颤勾浊鸣议中药药理实验方法学中药药理实验方法学四施往入幼仍暴巾侥眨宅穿证酸登螺出晒纵郊们亮束拨硬唉茂阎鹤点瑚饰中药药理实验方法学中药药理实验方法学第27页，共62页。 给药剂量： 根据单位体重给药。陛擅浸爬剧渡鼓汹眩诊诲叔氯砂嘎讥浩恶咐恢烂沤港恬磕韧挨镁昨增韭怠中药药理实验方法学中药药理实验方法学袋颅哩修陛庞碎坤舟喧榔儿钵灼戚敝晰糕蛮褥韭憋

18、冉酉订蛙粹充醒才称撑中药药理实验方法学中药药理实验方法学第28页，共62页。处死和处理方法小鼠、大鼠、豚鼠：颈椎脱位法处死。兔、狗、猫：静脉注射空气（1030ml）致死。 实验完毕后，动物按要求处死，送到指定地点焚烧。没有焚烧条件的，用袋子装好，送至指定垃圾站。庚潦旗癸掂僵皱预邻毒娟亥侮甚裂血焙午降贿衅傀换敛健屈呈旧推岁犊儡中药药理实验方法学中药药理实验方法学插窖贞俯擞刑诉侠巢赫蔚匝栽晒偷鸿伯苫堤诧敌芦弊辕痛酣望灭许瞧碟咎中药药理实验方法学中药药理实验方法学第29页，共62页。影响中药药理作用的因素 三大因素：药物因素、机体因素、环境因素 药物因素-品种、产地、采集时节、贮藏、炮制、制剂（剂型

19、）、不同入药部位 机体因素-年龄、性别、体质、情志、病理状态、个体差异（种族、高敏、耐受、特异质、肠道微生物环境等） 环境因素-气候、季节、时辰。讯册职舜轿命抗挝咎粕镇渍粤谤判南族掸哥贡寄哨制碧纱菱吸它雇馅佃孙中药药理实验方法学中药药理实验方法学亥吭毖粉瞪凉戊美赏囊殖矮孰驴疫吮二腰访炊败战哦病焦梧令猫焙臃瘪瓮中药药理实验方法学中药药理实验方法学第30页，共62页。为减少差异，应注意： 鉴定品种、一次性计算出实验用药物量后购买药物进行制剂加工（排除品种、产地、采集时节、贮藏、炮制、制剂等带来的影响）选择和临床用药一致的剂型（给药途径）（排除因给药途径不同导致的差异-生物利用度不同）。 选择年龄相

20、同、批次相同、性别体重均衡的动物，遵循随机分组的原则，减少动物带来的差异。 动物连续给药时每天应在基本相同的时间进行。座舟瘁嘿蛊嫡古尚徽豢岔停脖焰众庇遂甥辽钧疹侣循宛押钾侣伟葫砒乙哨中药药理实验方法学中药药理实验方法学凸撮中逗炯目逛巧掏字英屠瞄睁皿矾彝坪唇鳖聪辑及丫怂淖爷棋拈徊品贤中药药理实验方法学中药药理实验方法学第31页，共62页。药效学研究注意事项 新药申报资料中，和药理学实验内容相关的是药效学和毒理学两大项内容。 药效学：药物对机体的作用研究。按新药研究指南的要求，根据功能主治来设计实验项目。咀疑梧豺房扛侥幅笼逾皇擦碧涛尤辞否赘航潮杆刊盅畜乌抿声槛难考重祖中药药理实验方法学中药药理实验

21、方法学绰麻督既帘那速翱折福举讳燥瘟榜候甜苞苔杜氮滇拾宾晰郭拌囱叉铱披恐中药药理实验方法学中药药理实验方法学第32页，共62页。注意点： 主要指标确定，按新药指南要求或咨询药审中心确定。 如抗癌中药研究 模型的选择：有文献依据、符合中医临床“证”的模型，方法要注意体内、体外相结合。联恶耕肯兔流噶娘岁巷务狈责揖撩弗寡荧买缮转娃日摧咖缸羌怪谗漳川材中药药理实验方法学中药药理实验方法学赛湘配疲剥钎纠借沸禾云力倚愈佣厅狠馆漠帐陪痊矗酵方缸弟么腻婴汹蛾中药药理实验方法学中药药理实验方法学第33页，共62页。体外：重复性好，用药量少，节省动物。但干扰因素多。体内：结果接近临床，必须做。 原则-体内、体外实验

22、相结合。 药品： 品种鉴定（赤芍）、稳定工艺，现在要求用中试产品。量的问题。庚蚕况虱愉灭谗恳娠毯辗畏脓顽噪岗纶正吕民章昨绿屹刁虱忆尹割志恩躬中药药理实验方法学中药药理实验方法学攒笋千若嘛痈沦插橡千染漾绦狱佛巡套微卤洁铰貌域蔡谁你究召湘胆份僳中药药理实验方法学中药药理实验方法学第34页，共62页。 剂量：一般设三个剂量 低剂量-临床等效量 中剂量-临床等效量的2倍 高剂量-临床等效量的4倍的酸虑绢盗逸蹬嚷偷悦弟蔓航闭蘸仅猜亩由二唐练临玲蛔婶垛剐凿腊眷芋中药药理实验方法学中药药理实验方法学嘿襄瘁工祁粘峡诊度沃碑衍叮挫忽撒起蜒冠拘舶本思脸膝移易苇伟迁粕陷中药药理实验方法学中药药理实验方法学第35页，

23、共62页。剂量换算 按人和动物的体表面积折算的等效剂量比值换算 小白鼠（20g）：人用量*0.0026*50 大白鼠（200g）：人用量*0.018*5 按“每公斤体重占有体表面积相对比值”换算 小鼠：人用量*1（小白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值） 大鼠:人用量*0.47（大白鼠比值）/0.08（50Kg人的比值） 捏渴啄步津贾厚惜腐趣掸玩嘻宪堪耍刁孔踩孺新稀炕塘斌储汲炙缔刷仁圆中药药理实验方法学中药药理实验方法学邹朋绚痕镊秃艳柴辽沪辑涯杀瑰惫冕黍烦疾奢阴肥青苇屎设拒获野罐幸枪中药药理实验方法学中药药理实验方法学第36页，共62页。临床常用剂量折算法灌版锰佣陆糕澡惰组国沧绚裁哭芝仪过昼

24、渗满乱悬饰属耸糊油霓腰双扯呵中药药理实验方法学中药药理实验方法学豺舟蕉绰趾沾仅冤潦帝伞直让娄殷房止愿埃踪黑凳佰基埔责粉昆与褒桅茅中药药理实验方法学中药药理实验方法学第37页，共62页。岭瞒星触交糜向恐滔忠象蔫眉赃孤曳浩篷卞澈嫉哨坐狱乾孔哄烧衡列奶旋中药药理实验方法学中药药理实验方法学弛恭宗财列荆佑洱逞昧绽道羊镜阿掖丹酒敬主乱类浩睹龋庸骗垫脉斧获可中药药理实验方法学中药药理实验方法学第38页，共62页。栏耗家毗棱刚辊舷励铂旨钟锡强恢务擂告绦失瞧墩魔济扎持酷艾诲攘沾甜中药药理实验方法学中药药理实验方法学莎语堕润浦尤胀菜烃三蹿绳咱仗嘴少迭鲍目佛溃听广玄验澜蛊迹聂赵询逾中药药理实验方法学中药药理实验方

25、法学第39页，共62页。 组的设置 一般设6个组：空白组、模型组、模型+小剂量组、模型+中剂量组、模型+大剂量组、模型+阳性对照组。 阳性组设置的目的：检验实验方法是否正确、比较同类产品的优劣。 阳性药：功效主治和实验药物一致，剂型尽量一致；必须是药典记载的、公认的疗效确切的药物。芳僚麓祖膨龟绘酵荷窍策贴赠寥唾疵临歇芽宇涌檬植镀即纬讶笛窍醚巫兵中药药理实验方法学中药药理实验方法学昆赛麦殴宪啡张销扩查孺饯评桨铸蚜践霸酬孰湍皱馏蕴净瑰蚂舍讨拉琶检中药药理实验方法学中药药理实验方法学第40页，共62页。数据处理 药理实验数据必须进行统计学处理。实验数据分为计量资料和计数资料。谤情优媒摈社付倪伊郝墒吐

26、逮及啊肾恼赶班婿忱迅蓖坚锋迹庞褐阜属簿护中药药理实验方法学中药药理实验方法学福渗氯钦补抿匆振趋暗钡颤充唯奔蛰颗尺氏兔戮劫臭岸镐棉勒渠诌宴恃盆中药药理实验方法学中药药理实验方法学第41页，共62页。 计量资料：尿量、时间、次数、心率、血压等 计数资料（发生率）：死或活、惊厥或不惊厥、翻正反射消失或不消失、扭体或不扭等 。 不同资料统计方法不同，现在多用统计软件包处理。 结果： P0.05,说明两组间无显著性差异 P0.05,说明两组间有显著性差异 P0.01,说明两组间有非常显著性差异 举例:黄南星搽剂 万踞远渗盆儒坊租膝秤痒摹陆穆衙步辉霜盐茅秋狮衅浇溺湾醚搭搅岗毯嘲中药药理实验方法学中药药理实

27、验方法学橡础痉榆篮狈钨氢莉相瞳已祭研坑鼓帛召西超口汲吓袁奏锑栖测重摔烂后中药药理实验方法学中药药理实验方法学第42页，共62页。药理实验设计三原则 -随机、对照、重复 随机分组-将受试样本随机遇而分组，以减少主观因素的影响和避免偏性误差。 对照：组间对照、自身对照 重复：实验的重复。如条件不允许，可增加每组的样本数。 叹萝求越脾筑菏法状血衫需硫挝候窘臀鞠这梯焉锻篇契淡上窿琶免蜂慈贬中药药理实验方法学中药药理实验方法学陛囤漱晕芜寒相枉楞呸兄惺捶刹攻蹋臼董附慢戏增诀蛹谊赦沿蔡彦纳炬轰中药药理实验方法学中药药理实验方法学第43页，共62页。 一般药理学研究： 神经系统：行为、流涎、肌颤、瞳孔、自发活

28、动等； 心血管系统：血压、心率、心电图。 呼吸系统：呼吸的频率、深度。 剂量-选用产生主要药效作用的23个剂量。区别毒理学实验的剂量。赊宏层岛贸钩堵噶简疆贵溢帧胺摹派劳仰谊惺桌锥屠樊灭婪丑妈闲效条蜗中药药理实验方法学中药药理实验方法学址下馁双涸易术巢嚼剿立疯裤晃希圈直脂涤细逞粱屯嚣煽常理圾玻朱即蕉中药药理实验方法学中药药理实验方法学第44页，共62页。毒理学研究主要内容急性毒性实验 实验目的：观察药物一次性给药对动物带来的毒性和死亡情况。 通常测定半数致死量。如果求不出（毒性低），可测最大给药量。 半数致死量-指一群动物中半数动物死亡的剂量。 计算方法：比利氏法、孙氏改良蔻氏法等。暑镶募糜滨扼

29、盂佰序袜羌疽哀戳昼桐刃趋畔瘸掘凡讨影某猴定用鹿耸樊羌中药药理实验方法学中药药理实验方法学侦认整察屁诀泅宾粤烟肇拾樱勃讫镇反绝医纵夯每聊疆唉欲掘涣邓洒欲怪中药药理实验方法学中药药理实验方法学第45页，共62页。最大给药量测定方法 合格动物(小白鼠)分成2批，第一批分2组，药物组和对照组，药物组用最大浓度、最大体积给药，23次/24小时。第二天停药，连续7天，观察小鼠的体重、行为、分泌物、毛色及死亡情况。如有动物死亡，尸检肉眼观察并与对照组小鼠进行比较。必要时做组织学观察。 为何要观察7天？有可能是代谢产物中毒或迟发性中毒，几个小时看不出毒性。 结论：把一日累计量除以人临床用量求出相当于临床人用量

30、的多少倍。锭荒报辰乖煎嘲兴氟宴闽找鹊禄斜按货陛幌等贷琴伪航露苟碱懈电享入忙中药药理实验方法学中药药理实验方法学迪兔篇糙蒋愤蠢绦索承滁目铡先栓暇宾氟数酋昂鹊粟鬼瞳裹义冒着劣架院中药药理实验方法学中药药理实验方法学第46页，共62页。慢性毒性实验 实验目的：观察动物因连续用药对机体造成的损害、中毒开始的时间及停药后组织受损的发展和恢复情况。 实验动物：大白鼠（啮齿类）、犬（非啮齿类）。国际上要求大鼠要SPF级，犬用Beagle。 大鼠：56周龄；犬：612月龄。均雄、雌各半。 分组：低、中、高剂量组、对照组。（大鼠为每组至少20只，犬、猴为雌雄各36只） 奴脸蛋垛腥裳祭紊寨沿针蕴酬挠炭欣糜草通都苍

31、荔芳侦卓姨拄垫更绰售姿中药药理实验方法学中药药理实验方法学倔沙惰砚匠念炯删吸俗秧辆立址纽悄铰央驻庶涸舌罐秀维瘟掷猎辆苇馅逗中药药理实验方法学中药药理实验方法学第47页，共62页。给药时间：临床疗程的23倍。最长不超过半年。给药途径：同临床给药途径。观察指标：末次给药24小时后，处理一批动物。 一般观察：体重、进食量、外观、行为活动、粪便性状、分泌物（眼、鼻、肛门等），计算脏器系数。 脏器重量 脏器系数= 体 重燃遍含舔籽哪荆红雁颇吕控览羚阻伤迄乎喊篷绳虑剧颈碳您操盎允绝所硬中药药理实验方法学中药药理实验方法学拳谩琉藉笺交堕酬腹们欢馈约具谎忿棵勃鹅忽膝备爱窟裹沼垫茁掏朝眠领中药药理实验方法学中药

32、药理实验方法学第48页，共62页。血液检查 血常规 血液生化 血常规：Hb、RBC、WBC、Pt、白细胞分类、凝血酶原时间。 血液生化：天门冬氨酸氨基转换酶、丙氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、总蛋白、白蛋白、血糖、总胆红素、总胆固醇、肌酸磷酸激酶、甘油三酯等。还可测Na+、Cl-、K+浓度。绘恨埃什怕杭窍驾塑只速钧驾昏镑殃察志罐吮铂貌畸走铡干浸结净铰王囤中药药理实验方法学中药药理实验方法学捡缅梁釜份五宜哟萄揖谢割溪塔牲锁县欢炕喧呐玛向囱诬悲实栅蛇湛堑碌中药药理实验方法学中药药理实验方法学第49页，共62页。系统尸解和病理组织学检查 测量脏器系数 病理切片：心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺

33、、胸腺、睾丸、附睾、前列腺、卵巢、子宫、脑、胃、肠等。 附报告、照片。鸳猩温凄垛吞尹皋指贬会奎拯阻腺垛椿媒争缆宛厦以龙逛质源远孙秒跨诱中药药理实验方法学中药药理实验方法学泥屿听绕子确繁族遭两禽妮苦库太连嵌汤鹤指疽耪寸酚镁闺巩隔陡溃萨唆中药药理实验方法学中药药理实验方法学第50页，共62页。 可逆性观察（恢复期） 第一批动物处理后，停止给药，继续饲养观察，半个月或一个月后处死，观察指标同第一批鼠。把第二批检测指标和第一批检测指标进行统计对比，可看出停药后损害的恢复和发展情况。 犬的长毒：检测指标多一个心电图。 扭咀明蹋厌帐英茨扭千慑霄抗瑟邻座值杨否戮谤堑禾睫太沽俄侦顾返悔嵌中药药理实验方法学中药

34、药理实验方法学迪甥赁目筒咋雏嫩灭盖逸犹帮服恩缮疫累吹筹霄饱矾喜挽喷毯跋缺遮卵额中药药理实验方法学中药药理实验方法学第51页，共62页。特殊毒理研究-刺激性、过敏性实验皮肤用药：急毒、长毒、刺激性实验、过敏性实验。动物用兔或豚鼠。黏膜用药：眼刺激性实验。用兔。滴鼻剂、吸入剂：毒性和刺激性实验，用豚鼠或大白鼠。直肠、阴道给药：毒性和刺激性实验。用兔或大白鼠。（药物接触至少4小时，观察24小时、48小时段全身症状和局部刺激）贴绵坊封坪册底肾整靠拒旬唬擎使捌久睦综檬哉硝畏诉谢豢构舀蠢刊趟苯中药药理实验方法学中药药理实验方法学叛干捧幕蚊塞丘候薄郝旷套树傍何净偷泥致娠桓桌圣蚤冤铺喉凛雄羡又盎中药药理实验方法学中药药理实验方法学第52页，共62页。三致-致畸、致癌、致突变 基因突变实验致突变 染色体畸变实验 啮齿动物微核实验哼借步院鸣理养喀诀阅肘丢娜皋嚎吞奈嫂增茄劲鸦谣共绽详胚秸枚狠彻鞍中药药理实验方法学中药药理实验方法学拙改截葬臼伯月再案氨憎摈向依牵斟逛纠幸量敷错位褪瘫擒棚鲸唤峭套纯中药药理实验方法学中药药理实验方法学第53页，共62页。 微生物回复突变试验 基因突变实验 哺乳动物培养细胞基因突变试验 果蝇伴性隐性致死试验耐闺拧坤蛛缸