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1、第 页共8页第 1页 共 8页课下达标检测(三十八) 基因工程一、基础题点练1. (2020 济南模拟)已知限制性内切酶 Xma和Sma的识别序列分别为CCCGG住口CCC GGG有关这两种酶及应用的叙述,错误的是()A.这两种酶作用的底物都是双链DNADNA中出现这两种酶识别序列的几率不同Xma切割DNA黏成的黏性末端是一GGCCD.使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析:选B限制酶作用的底物是双链DN6子;这两种限制酶作用的核甘酸序列相同,所以这两种识别序列在 DNA中出现的的几率相同;根据碱基互补配对原则,CCCGGG)互补链是GGGCCCf根据Xmal的切割位点可知,切割后的黏性

2、末端是一CCGG温度能影响酶的 活性,所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。2科学家采用基因工程技术将矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因 A 转移到玫瑰中,以培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()A.利用DNA分子杂交技术从矮牵牛的基因文库中选取基因AB.用氯化钙处理玫瑰叶肉细胞,使其处于感受态C.用含四环素的培养基筛选转基因玫瑰细胞D.将基因A导入玫瑰细胞液泡中,防止其经花粉进入野生玫瑰解析:选A 矮牵牛中有控制蓝色色素合成的基因A,利用DN酚子杂交技术,可以从矮牵牛的基因文库中选取目的基因 ( 基因 A) ;将目的基因导入植物细胞时,常采用农杆菌转化法,不能使用Ca处理法;根据标记基因来筛选转基

3、因玫瑰细胞,而标记基因不一定是四环素抗性基因;玫瑰细胞液泡中没有DNA不能将目的基因导入液泡中,应将目的基因导入叶绿体或线粒体中,以防止其经花粉进入野生玫瑰。3下列关于蛋白质工程的叙述,错误的是()A.蛋白质工程的基础是基因工程B.蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构D.蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析:选 C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造,或合成新的蛋白质, 故蛋白质工程的基础是基因工程; 蛋白质工程遵循的原理包括中心法则; 蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的

4、; 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在 过的新型蛋白质分子。 4如图表示的是三种切性末端,下列说法正确的是()AATTC1AATTGHAAGXIII Hill 单乙内A.图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B.若图甲中的G碱基处发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点C.图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物解析:选B产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTCCTTAAG产生乙黏性末端的限制酶的识别序列为CAATTGGTTAAC产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAGGAATTC可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的;

5、 限制酶具有专一性, 能够识别双链DNA分子的某种特定核 甘酸序列,如果甲中的G发生突变,限制酶可能无法识别该切割位点;图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的;质粒是环状DNA分子,噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构,它们都不属于原核生物。5. (2020 滨州期末)基因工程为花卉育种提供了新的技术保障。如图为花卉育种的过 程(字母代表相应的物质或结构,数字代表过程或方法)。下列说法正确的是()供体细胞f H一基因去达我体载体1)八-I Q受体植物一植物细胞工 1L1二转基因植株A.过程需要的酶有限制酶和DN咪合酶B.过程常用的方法是农杆菌转化法C.、过程为分化和再分化,该过程体现了植物细

6、胞的全能性D.转基因生物DNA入是否插入目的基因,可用抗原一抗体杂交技术检测解析:选B过程是基因表达载体的构建,需要的酶有限制酶和DNA连接酶;过程常用的方法是农杆菌转化法;、过程为脱分化和再分化, 该过程体现了植物细胞的全能性,运用了植物组织培养技术;检测转基因生物的DNA_b否插入了目的基因,应采用 DNA分子杂交技术检测。.下列是利用肝脏细胞粗提取DNA实验的两个关键操作步骤,相关叙述错误的是()步臊 1;向8 g捐肝中加入25 mL1 med I.(L。亍mH L柠橇酸钠援冲液f 冰浴、研磨,焉心|步骤显暇沉淀,加入mL级冲液、2 m匚弃茂宗.狼匀|后,谖懂加固体NMI使溶液求度达到2

7、 mH L.再离心 |A.步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持pH的稳定B.步骤1中,冰浴处理的主要原理是低温下DNA水解酶容易变性C.步骤2中,异戊醇的作用可能是使与DNA吉合的蛋白质因变性而沉淀D.步骤2中,离心后应取上清液,因为DNA& 2 mol/L NaCl溶液中溶解度比较大解析:选B步骤1中,加入柠檬酸钠缓冲液的目的是维持 pH的稳定;低温不会使酶 变性失活,只能降低酶的活性;步骤 2中,DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度比较大,因 此异戊醇的作用可能是使与 DNA吉合的蛋白质因变性而沉淀; 步骤2中,离心后应取上清液, 因为DNA在2 mol/L NaCl 溶液中溶

8、解度比较大。二、tWj考题型练. (2020 东营模拟)如图1所示为用Pvul限制酶切下的某目的基因及其上DNA片段示意图;图2所示为三种质粒示意图。图中Ap为氨茉青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因。EcoRI、Pvul等为限制酶及其切割的位点。复制原点是在基因组上复制起始的一段序 列,是指质粒在受体细胞中复制时的起点。(1)组成片段D的基本骨架与细胞膜的基本骨架相同的元素是 。(2)图2中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒? (填“能”或 “否”),请 说 明 理 由(3)重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅为10 7,用质粒B构建重组质粒,为了筛选出导入了重组质粒的大肠杆菌

9、,在导入完成后,将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨茉青霉素的培养基中培养,大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是 , 可能性最大的是(4)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物,则需要将重组质粒导入至山羊 的(细胞)中。解析:(1)脱氧核糖和磷酸交替连接构成DNA片段D的基本骨架,脱氧核糖由 G H、O三种元素组成,组成磷酸的元素是H P、O;磷脂双分子层构成细胞膜的基本骨架,磷脂分子是由C、H。N P组成,可见组成片段 D的基本骨架与细胞膜的基本骨架相同的元素是C H、Q P。(2)分析图2可知:质粒A缺少标记基因,质粒 C在用和目的基因相同的限制 酶切割时,复制原点会被限制酶切割,

10、进而影响重组质粒的自主复制,所以质粒A、质粒C均不能作为目的基因运载体最理想的质粒。(3)用质粒B构建重组质粒,当用和目的基因相同的限制酶(Pvul )切割时,Tc(四环素抗性基因)遭到破坏,而Ap(氨茉青霉素抗性基因)结 构完好,因此在重组质粒导入完成后,将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨茉青霉素的培养基中培养,大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是在含四环素的培养基上能正常生 长,在含氨茉青霉素的培养基上不能正常生长。因重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅为10-7,所以可能性最大的是在含氨茉青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生 长。(4)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表

11、达产物,则需要将重组质粒导入山羊的 受精卵中。答案:(1)C、H、Q P (2)否 质粒A缺少标记基因,质粒 C在用和目的基因相同的限 制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制(3)在含四环素的培养基上能正常生长,在含氨茉青霉素的培养基上不能正常生长在含氨茉青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生长(4)受精卵.水稻是一种重要的粮食作物,选育高抗性良种是有效防治病虫危害、增加水稻单位 面积产量的关键措施。转基因技术为得到抗病虫水稻种子开辟了一条新路。下面是水稻某抗 性基因获得的过程。据图回答下面的问题:构电.耳因绯A舍日的总冈文目的-W 的山胞虫 禽型I.曲而平口的基

12、阂 库丽取4文1眸槎通的珊胞茄珥UcDNA文库中的基因在基因组文库中 。(填“都有” “都没有”或“有 一部分”)。(2)B过程需要的酶 (填“存在”或“不存在”)于正常真核生物体内,图示中 含目的基因的细胞群 (填“是”或“不是”)水稻的体细胞。(3)如果不建基因文库,但需要大量的目的基因I和n ,可分别利用图中和为模板直接进行 PCRT增。进行扩增时所使用酶的显著特点是 。(4)抗性基因导入受体细胞后,仅一条染色体含抗性基因,该基因的传递 (填 “遵循”或“不遵循”)孟德尔分离定律,试说明判断依据:解析:(1)cDNA文库是部分基因文库,基因组文库是全部基因文库,所以cDNA文库中的基因在

13、基因组文库中都有。(2)B过程是由mRN峨取cDNA的过程,需要逆转录酶的催化, 逆转录酶在正常真核细胞中不存在,图示中含目的基因的细胞群不是水稻的体细胞。(3)如果不建基因文库,但需要大量的目的基因I和H ,可分别利用图中DN用口 cDNA为模板直接进彳T PCRT增。进行扩增时所使用酶白显著特点是耐高温。(4)抗性基因导入受体细胞后,仅一条染色体含抗性基因,该基因的传递遵循孟德尔分离定律,因为仅一条染色体含抗性基因,另一条没有其等位基因,相当于杂合子。答案:(1)都有(2)不存在 不是(3)DNA cDNA耐高温 (4)遵循 仅一条染色体 含抗性基因,另一条没有其等位基因-GCATCC-&

14、池 TC-tlTAGG-TAG-.为增加菊花的花色类型, 研究者从其他植物的 cDNA文库中提取出花色基因 C(图1), 拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花细胞中。图 3表示EcoRI、BanHI和 Sa13Al三种限制酶的识别序列与切割位点。请分析回答:J.WiktA I图3(1)利用PCR技术扩增目的基因 C的原理是 。(2)图2所示质粒被 切割获得的产物可与图1所示基因C连接,理由(3)经Bamn处理后构建的重组质粒导入菊花细胞后,基因 C不能表达,原因是质粒酶 切部位的两端无 ,导致基因 C不能。(4)在添加四环素的固体培养基上, (填“能”或“不能”)筛选出含有插入基 因

15、C的重组质粒的农杆菌单菌落,原因是解析:(1)利用PCR技术扩增目的基因 C的原理是DNA双链复制。(2)据图3可知,由于 BanHI和Sa13Al两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端,因此图2所示质粒被BanHI和SaiBAI切割获得的产物可与图1所示基因C连接。(3)据图可知,经 BanHI处理后构建的重组质粒导入菊花细胞后,基因C不能表达,原因是质粒酶切部位的两端无启动子和终止子,导致基因 C不能转录。(4)由于含质粒的农杆菌和含重组质粒的农杆菌均含有抗 四环素基因,在含四环素的培养基上均能生长,所以在添加四环素的固体培养基上,不能筛选出含有插入基因 C的重组质粒的农杆菌单菌落。答案

16、:(1)DNA双链复制 (2) BanHI和SaU3AI 两种酶切割后产生的片段具有相同的 黏性末端 (3)启动子和终止子 转录(4)不能 含质粒的农杆菌和含重组质粒的农杆菌 均含有抗四环素基因,在含四环素的培养基上均能生长mRNA转录形成的 DNAW为cDNA.人胰岛素基因的克隆操作过程如图所示,其中回答下列问题:niHNA(1)提取分离组织细胞中的人胰岛素mRNA寸,最应选择 细胞,过程需要原料是。(2)通过将所有的cDNA构建基因表达载体, 去感染细菌,可以建立包括目的基因在内的 ,若使用质粒载体,其上存在 基因,有助于质粒进入受体细胞中。此过程还可以使用 作为载体。(A.动物病毒 B.

17、植物病毒 C.噬菌体)。(3)除了上述方法外,还可以使用 方法扩增目的基因。不同的是,后者的 目的基因若为人胰岛素原基因,需要导入 (填“真核”或“原核”)受体细胞中。解析:(1)人体细胞中只有胰岛 B细胞可表达胰岛素基因, 提取人月K岛素 mRNA寸,最应 选择月K岛B细胞,过程为合成 DNA勺过程,需要(四种)脱氧核糖核甘酸为原料。(2)通 过将所有的cDNA构建基因表达载体,去感染细菌,可以建立包括目的基因在内的基因(cDNA)文库;若使用质粒载体,其上应存在控制质粒 DN服移的基因,有助于质粒进入受体细胞中。 噬菌体可侵染细菌,动物病毒、植物病毒不能侵染细菌,此过程还可以使用噬菌体作为

18、载体。(3)用PCR技术可扩增目的基因。PCR扩增的人胰岛素原基因含有内含子序列,原核细胞中缺少转录后切除内含子对应序列的机制,因此应将人胰岛素原基因,导入真核受体细胞中。答案:(1)胰岛B (四种)脱氧核糖核甘酸(2)基因文库 控制质粒 DNA转移的 C(3)PCR 真核.科学家从某细菌中提取抗盐基因, 转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。 如图是转基 因抗盐烟草的培育过程, 含目的基因的DN用口质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。 请 分析回答下列问题:(1)抗盐基因一般是与调节相关的基因。flind D(2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma酶切割,原因是。图中过程为防止质

19、粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用 酶对外源DNA质粒进行切割。(3)图中过程是通过 的方法将抗盐基因导入烟草细胞,该方法 的优点是。(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是解析:(1)抗盐基因一般是与调节渗透压相关的基因。(2)由图可知,使用Smal酶切割,将会破坏质粒的抗性基因(标记基因),同时也会破坏目的基因片段,因此用图中的质粒和目的基因构建重组 DNA分子时,不能使用 Smal酶切割。标记基因和外源 DNA目的基因中均含 有EcoRI酶切位点,用该酶切割,再在DNA连接酶的作用下,可形成

20、 3种环状产物,即外源DNA自身连接、质粒自身连接、外源DN府口质粒连接,因此为了防止目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化,应选用BarHl和Hindm酶对外源DN府口质粒进行切割,这样使目的基因两端的黏性末端不同,可以防止自身环化。(3)图中过程是通过农杆菌转化法将抗盐基因导入烟草细胞,该方法的优点是经济实用,转化效率高。(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既有分子水平的检测,也有个体水平的鉴定。分子水平的检测中,利用放射性同位素标记的抗盐基因(或目的基因)作探针进行分子杂交检测;个体水平上的鉴定中, 将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态。答案:(1)渗透压 (2) Sma会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因BanHI和Hind m (3)农杆菌转化法经济实用,转化效率高(4)抗盐基因(或目的基因)将培 育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中,观察该烟草植株的生长状态.如图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程,请回答下列问题:(1)若图示为“

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