茶多酚设计性实验

1、茶多酚的提取与测定实验目的1、学习提取茶多酚方法和技术。2、学习溶剂提取法的操作方法和步骤。3、掌握用分光光度计法测定茶多酚的总量的方法。实验原理茶叶中有诸多保健作用，这与茶叶中富含茶多酚，咖啡因，茶多糖 和茶氨酸等有效成分有密切关系。茶多酚不仅是是构成茶叶色，香， 味的主体化学物质，而且是一种理想的天然的食品抗氧化剂，已被列 为食品添加剂。此外，它还具有清除自由基，抗衰老，防辐射，减肥， 降血脂，防癌等多方面的功能。茶多酚在食品加工，医疗保健，日用 化工等领域具有广阔的应用前景。近十年来，国内外特别是我国和日 本对探索新的茶多酚提取分离工艺日益关注。茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合

2、物。用分光光度法测 定其含量。由于茶多酚易溶于热水，因此本实验首先用热水在一定温度下将茶多 酚从茶叶中提取出来；然后对茶叶浸提液盐析处理除去部分杂质;再 利用某些金属离子与茶多酚形成的络合物在一定pH值下溶解度最低 的特性，将茶多酚从浸提液中沉淀出来并高效地与咖啡碱等杂质分 离；经过稀酸转溶将茶多酚游离出来后，用对茶多酚具有很好选择性 的有机溶剂再次对其进行萃取分离；最后将茶多酚萃取液通过真空浓 缩、真空干燥得到茶多酚精品。实验材料与试剂器材：分析天平：感量0.0001g, 540分光光度计，布氏漏斗，真空 泵,研磨缸一个，500ml烧杯两个，烘箱，玻璃棒，7支试管，滴管一 个，10ml移液管

3、一支，水浴锅。试剂：蒸馏水，酒石酸亚铁溶液：称取1g （准确至0.0001g）硫酸亚铁 和5g （准确至0.0001g）酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L（溶液应避光， 低温保存，有效期一个月）。pH7.5磷酸盐缓冲液：磷酸氢二钾：称取 23.377g磷酸氢二钾，加水溶解后定容至1L。磷酸二氢钾:称取9.078g 磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。取上述磷酸氢二钾溶液85m和 磷酸二氢钾溶液15m混合均匀。250ml乙酸乙酯，无水硫酸钠，茶多 酚标准溶液的配制：称取纯品0.2500g，加水溶解定容至250mL, 混匀，即为每毫升含1mg纯品的标准溶液（mg/mL）。实验步骤茶多酚的提取工艺。采集

4、茶叶一去灰尘，洗十净一晾十一十茶叶 一粉碎一90。接近沸水中搅拌浸提一过滤一乙酸乙酯萃取一 得有机相一无水硫酸钠十燥一减压蒸馏一得黄色粉末状茶多酚 一称量。1.2.1预处理。粉碎十茶叶:将采集来的茶叶洗净、晾十， 烘十，最后粉碎。粉碎的目的是与液体的接触面增大，使提取率增高。 由于试验条件的限制，用剪刀代替粉碎机，将于茶叶剪碎，并且用研 钵研细。于茶叶量为50.00g。1.2.2提取。在众多的提取方法中， 选用了溶剂提取法，具体过程是称取经过预处理的干茶叶末30.00g,加入250mL90C接近沸水中搅拌浸提，过滤，先后用250mL的乙 酸乙酯萃取两次。合并两次有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏 除去乙酸乙酯溶剂得黄色粉末状茶多酚热水茶渣氯化锌HCl 乙酸乙酯茶叶粉碎浸提过滤离子沉淀离心沉淀转溶萃取 减压浓缩干燥茶多酚茶多酚的含量。茶多酚标准曲线的绘制。分别吸取茶多酚标 准溶 1.0mL、2. 0mL、3. 0mL、4. 0mL 于4 个50mL 容量瓶 中，各加水至10mL,再加酒石酸亚铁10mL,加入pH为7. 5的磷 酸缓冲液至刻度，混匀后用1 cm比色皿，以空白试剂作参比，于 540nm处测定吸光度(A),绘制出标准曲线表1茶多酚标准曲线茶多酚标准溶液体积(mL)1.02.03.04.0A0.1150.2230.3620.475茶叶中茶