常用缓冲溶液配制方法

1、(Viouisoo)Tl/iouiio1/|oui乙0Hdl/|ouiio1/|oui乙oHd任倬SSOiz昱翌忌嘗翅由二雪腮1/|ow乙00乙二書去B甜嘗翅由二雪腮9乙0Z6SO0660OZfl8王9王二乙乙o乙ZWZ56二096王OZOt0王879717乙乙乙人X00乙)Hd人X00乙)Hd0乙rsawoDH1/IOU1乙O+甜嘗翅由二雪腮1/IOU1ro县軍X(1/IOU1SOO)澤电由二轴310SI1/IOU1乙0ZOSZ二書去BW日00V9乙8VII0SOSOSOS9王VZ二0王89IZ7Z17乙0蚀OSOSOSOS879717乙07人XHd人XHdtf00乙吏昱契WE鱼7IDH1/

2、IOU1ro县軍人+翅&a1/IOU1ro县軍xNa2HPO4（毫升）柠檬酸（毫升）2.20.4010.602.41.2418.762.62.1817.822.83.1716.833.04.1115.893.24.9415.063.45.7014.303.66.4413.563.87.1012.904.07.7112.294.28.2811.724.48.8211.184.69.3510.654.89.8610.145.010.309.70Na2HPO4（毫升）柠檬酸（毫升）5.210.729.285.411.158.855.611.608.405.812.097.916.012.637.37

3、6.213.226.786.413.856.156.614.555.456.815.454.557.016.473.537.217.392.617.418.171.837.618.731.277.819.150.858.019.450.55Na2HPO4分子量=14.98,0.2mol/L溶液为28.40克/升。Na2HPO42H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7H2O分子量=210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。4.柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液pH钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克）CHOHO6872氢氧化钠（克）NaOH97%盐酸（

4、毫升）HCl（浓）最终体积（升）2.20.2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.202108345105.30.3524514468105.80.45285186105106.50.3826615612610使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5柠檬酸书檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）pH0.1mol/L0.1mol/LpH0.1mol/L0.1mol/L柠檬酸柠檬酸钠柠檬酸柠檬酸钠（毫升）（毫升）（毫升）（毫升）3.018.61.45.08.211.83.217.2

5、2.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸C6H8O7H2O:分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01克/升。柠檬酸钠Na3C6H5O72H2O:分子量294.12,0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。6乙酸-乙酸钠缓冲液(02mol/L)pH（18C）0.2mol/LNaAc（毫升）0.3

6、mol/LHAc（毫升）2.60.759.253.81.208.804.01.808.204.22.657.354.43.706.304.64.905.10pH（18C）0.2mol/LNaAc（毫升）0.3mol/LHAc（毫升）4.85.904.105.07.003.005.27.902.105.48.601.405.69.100.905.89.400.60Na2Ac3H2O分子量=136.09,0.2mol/L溶液为27.22克/升。7磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠T磷酸二氢钠缓冲液(0.2)pH0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.2mol/LNaH2PO4（毫升）5.88.092.

7、05.910.090.06.012.387.76.115.085.06.218.581.56.322.577.56.426.573.56.531.568.56.637.562.56.743.556.56.849.551.06.955.045.0pH0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.2mol/LNaH2PO4（毫升）7.061.039.07.167.033.07.272.028.07.377.023.07.481.019.07.584.016.07.687.013.07.789.510.57.891.58.57.993.07.08.094.75.3Na2HPO42H20分子量=178.0

8、5,0.2mol/L溶液为85.61克/升。Na2HPO412H2O分子量=358.14,0.2mol/L溶液为71.628克/升。NaH2PO42H2O分子量=156.01,0.2mol/L溶液为31202克/升。磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：NaH2PO4:pKal二2.12,pKa2=7.21;Na2HPO4:pKal二7.21,pKa2二12.32配酸性缓冲液：用NaH2PO4,pH二14,酉沖性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH二68,酉己碱性缓冲液：用Na2HPO4,pH二1012。用钾盐比钠盐

9、好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液的优点为：容易配制成各种浓度的缓冲液；适用的pH范围宽；pH受温度的影响小；缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于0.1。其缺点为：易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。(2)磷酸氢二钠T磷酸二氢钾缓冲液(1/15mol/L)pHmol/L/15Na2HPO4（毫升）mol/L/15KH2PO4（毫升）

10、pHmol/L/15Na2HPO4（毫升）mol/L/15KH2PO4（毫升）4.920.109.907.17.003.005.290.509.5078.002.00Na2HPO42H2O分子量=178.05,1/15M溶液为11.876克/升。KH2PO4分子量=136.09,1/15M溶液为9.078克/升。8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05M）X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至29毫升pH(20C)X（毫升）Y（毫升）pH(20C)X（毫升）Y（毫升）5.850.3727.052.9636.050.5707.253.5006.250.8607.453.950

11、6006664555265Lgg00O7boJ555089t4InM4NJgms(18000NJ00O7bo747O6bop工1O1O1o1o1o1o1O1OvHl*s-7NJ19S9仁47常415CO16117bo10049694929O00bo00cn004p工1O1O1o1O1O1oioio畑s-*OS5o仁52In23bo25NJ1woNJNCBbK畑暫即MfflH2o6.18ob4M请藩X8.25辿屮p工xW申p工xW7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.97.3043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5040.38.5014.77.60

12、38.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57.9032.08.907.08.0029.2三羟甲基氨基甲烷（Tris）H0CH2CH20HCH0CH2NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。11硼酸硼砂缓冲液（02M硼酸根）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）7.47.67.81.01.52.09.08.58.08.28.48.73.54.56.06.55.54.0县/单上061M睥IAIS0OX8二書去&0%0十0容即

13、他船0300徒0SOSOSIOI00I860王乙OU09OSOSOS96f66人XHd人XHdtf00乙吏昱契WEHOONN乙0县軍人+他船lAISOO县軍X(卿mNS00)耿确翊血毬IH-EI县/单I0-SI昱翌忌IAI乙OZOW書去B翅SSt98S0乙ZIZVIZOSOSOSOSOS90IfOI00I869689I07188090tOSOSOSOSOSf6乙6068898人XHd人XHd县軍00乙吏昱契WEHOeuNO县軍A+WBB-lAIO县軍X(NS00)耿确碣汕胃FKt日ZX。呈瀏申啾曲霞出丑0W習芳旨他船。县/单LZZ1瞬忌IAI乙08飞9二書去3疋0孑H翅船县/单上061昱(制翅

14、船IAI乙0二)W1/1500上飞8二書去&0%0十0容即他船07080607OW08OrE666OLQCjpO0CNOCXIrLQCXICOooocxic5寸roOLQCNCNO00CNOi1UDOLQCXI-looocxic5JZd寸寸一-rcmOO0HcmeeeHNNN。十、収。寸00董便乏00寸8HraH2RmcDHZN。十、収CN9OOCN只蛊乏0z.98CNHraH2RoIonoueNc7（县軍）ODHNIAIIO689LA寸COCXITc7（县軍）03BNIAIIOTCXICO寸LA986Hdu牡A二等只A次羽垃：uoCXI(S3)SpH标准缓冲溶液StandardpHBuffe

15、rSolutions名称(Name)配制(Compoundingway)不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)0弋5弋10弋15弋20弋25弋30弋35弋40弋草酸盐cKH3(C2O4)221671671671671681681691.691.69标准缓H20为不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)冲溶液O.05mol/L。称取45X50X55X60弋70弋80弋90弋95弋-12.71g四草酸钾KH3(C24)22H20溶于无二氧化碳1.701.711.721.721.741.771.79181-的水中，稀释至1000ml酒

16、石酸在25弋时，用无二不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)盐标准氧化碳的水溶解外0弋5X10弋15弋20弋25弋30弋35弋40弋缓冲溶消旋的酒石酸氢钾-3.563.553.553.55液（khc4h4o6），并剧不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)烈振摇至成饱和溶液45弋50弋55弋60弋70弋80弋90弋95弋-3.553.553.553.563.583613.65367-苯二甲c(C6H4CO2HCO2K不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)酸氢盐)为005mol/L,称0弋5X10

17、弋15X20X25X30弋35X40X45X50X55X60弋70弋80X90X95X-4.054.064.084.094.134.164.214.23-标准缓取于(115.0士冲溶液5.0兀干燥23h的邻苯二甲酸氢钾(叫匕。)10.21g，溶于无CO2的蒸馏水并稀释至1000ml(注河用于酸度计校准)不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)4.004.004.004.004.004.014.014.024.04磷酸盐标准缓冲溶液分别称取在(115.05.0)弋干燥23h的磷酸氢二钠(Na2HPO4)(353001)g和磷酸二氢钾0弋5弋10弋15弋20丈25弋

18、30弋35丈40丈6.986.956.926.906.886.866.856.846.84不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)45丈50丈55丈60丈70丈80丈90丈95X-6.836.836.836.846.856.866.886.89-(KH2PO4)(339001)g，溶于预先煮沸过1530min并迅速冷却的蒸馏水中,并稀释至1000ml(注：可不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)用于酸度计校准)c(Na2B4O710H2O)称取硼砂不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)0弋5弋1

19、0弋15弋20丈25弋30弋35丈40丈(Na2B4O710H29.469.409.339.279.229.189.149.109.060）（3.80士001）g（注意：不能烘！），溶于预先不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)45弋50弋55弋60弋70丈80弋90弋95丈-煮沸过1530min并迅速冷却的蒸馏水中,并稀释至1000m。聚乙烯塑料瓶中密闭保9.049.018.998.968.928.898.85883-存。存放时要防止空气中的co2的进入（注河用于酸度计校准）在25弋，用无二氧不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatur

20、es)化碳的蒸馏水制备0弋5弋10丈15丈20丈25丈30丈35X40X氢氧化钙的饱和溶13.413.213.012.812.612.412.312111.9液。氢氧化钙溶液的210135048浓度c1/2Ca(OH)2应不同温度时的pH值(pHindifferenttemperatures)45X50X55X60弋70弋80弋90弋95弋-硼酸盐标准缓冲溶液氢氧化钙标准缓冲溶液注：为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。7654321-IS81Si3霸H舎*II9g!8(N8薛S19溶液名称(Solutionname)把25.0ml0.2mol/L的磷酸二Si钾与23.6ml0.1mol/LNaOH混合均匀,加水释至在200ml水中溶解六亚甲