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文档简介
1、草莓脱毒培养草莓为蔷薇科草莓属多年生草本植物,植株矮小,呈半平卧丛状生长,基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐荫,要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。(一)草莓脱毒 1. 病毒种类 草莓斑驳病毒、皱叶病毒、草莓镶脉病毒、轻型黄斑病毒等。 2. 脱毒方法1)热处理脱毒(恒温或变温的热空气处理方法)将草莓母株在4041温度的特定容器内下处理1-2个月。将母株和容器一起放在恒温箱中,母株必须带有成熟的叶片。每天光照16 h,光照强度5000 lx,白天温度38 ,夜间35 。 2. 茎尖培养脱毒1)初代培养 :取草莓顶芽,用自来水流水冲洗24 h,然后剥去外层叶
2、片,消毒,切取0.2 mm的茎尖。接入的培养基中。培养条件为2225 ,日照1618 h,光强3000 lx。 2)继代培养:把芽丛割成芽丛小块,转入新鲜的MS培养基中,令其长大,并进行分株,扩大繁殖。3)生根培养:在培养基中加入NAA1(mg/L)或IBA1。3. 无病毒苗的鉴定抗血清法、电子显微镜法、指示植物法、酶联免疫吸附法(ELISA)等,确保脱毒后的试管苗不含病毒。 (二)快繁技术 1. 材料与消毒:经过热处理(6-7月)后的草莓母株上新抽的匍匐茎作外植体,未经热处理的于7-8 月的匍匐茎发生旺盛期,在无病虫害的田块,连续晴天3-4 d选取健壮、新萌发且未着地的匍匐茎段3 cm作为外
3、植体。 外植体取来后流水冲洗材料2 h,进行表面消毒:洗涤灵水溶液洗去材料表面的油质;用70%酒精浸泡数秒除去蜡质;用3%的次氯酸钠溶液浸泡15-30 min,无菌水冲洗3 次。 把芽放在解剖镜下,无菌条件下,用镊子、刀片、解剖针等把芽外面的幼叶和叶原基去掉,暴露生长点。用利刀切下含1-2 个叶原基,0.5 mm的生长点,接种在培养基上。 2. 培养条件:茎尖分化培养基:MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L继代培养基:MS+6-BA 1 mg/L生根前一次的继代培养基: MS+6-BA0.5 mg/L 生根培养基:1/2MS+IBA 1.0 mg/L温度:23 左右光照:12 h 光照强度:2000 lx3. 生长与分化接种1-2 个月,茎尖在培养基上形成愈伤组织并分化出小的植株,将初次培养产生的新植株切割成带3-4 个芽的芽丛转入继代培养基中,每瓶3-4 个芽丛,3-4 周即可获得30-40 个腋芽形成的芽丛及植株。4. 生根培养为获得整齐健壮的生根苗,将芽丛切割开,单个芽转接到专门的生根培养基中生根,培养4 周后,即可长成4-5 cm高并有5-6 条根的健壮苗。5. 试管苗的移栽小心取出试管中的发根幼苗,用清水洗去附着的培养基,栽植到经过蒸汽消毒的培养土中,在温室内驯化。每天叶面喷水3-4 次,4-5 d即可成活,展开新叶。人工补充光照,
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