淡水藻类植物的采集和培养

1、淡水藻类植物的采集和培养摘要：藻类分布的范围极广，对环境条件要求不严，适应性较强，在只有极 低的营养浓度、极微弱的光照强度和相当低的温度下也能生活。本文正是通过对 淡水生藻类植物进行调查、采集和培养，增加对藻类植物工作的经验，了解淡水 藻类的特性。关键词：藻类培养 生物学特性水生藻类标本的采集引言：藻类植物，包括数种不同类以光合作用产生能量的生物。它们一般被 认为是简单的植物，并且一些藻类与比较高等的植物有关。藻类植物是自然界 中非常重要的一大类生物类群，它们不仅是用于科学研究的良好材料，在医药、 食品、精细化工、环境保护、水产养殖等方面都有着广泛的应用。本实验研究的 基础是要对藻类的生物学特

2、性和生态因子有详细的了解，为后续的研究打下基 础。1.1试验原料1.1.1用具：显微镜、培养瓶、吸管、镊子、标签、记录本、玻璃片、灭菌 锅，载玻片，吸管，培养皿，相关工具书；1.1.2药品与试剂：硅藻：D1培养基硝酸钠0.12g 硫酸镁0.07g硅酸钠0.1g食盐0.01g磷酸氢二钾 0.04g氯化钙0.02g磷酸二氢钾0.08g硫酸锰0.002g柠檬酸铁0.005g 土壤提取液20mL A5溶液1mL蒸馏水979mL绿藻：SE培养基硝酸钠0.25g 氯化钙0.025g 磷酸氢二钾0.075g 磷酸二氢钾0.175g食盐0.025g 硫酸镁0.075g 三氯化铁0.005g土壤提取液40mL

3、A5溶液1mL Fe-EDTA 1mL蒸馏水958mLA5溶液：硼酸0.286g 氯化锰0.181g硫酸锌0.022g硫酸铜0.0079g钼酸铵钼0.0039g加蒸馏水定容至100mLFe-EDTA：Na2EDTA 1g 三氯化铁 0.081g 盐酸（0.1N）50mL 蒸馏水 50Ml土壤培养液的提取：去花园未施过肥0.5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏 水1000mL，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无 菌条件下过滤，去上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000Ml,土壤提取 液保存在4C备用。实验步骤2.1淡水藻类标本的采集方法水生藻类标本的采集水生藻类依其形

4、体大小可分为丝状种类和微小浮游种类。丝状种类可用镊子 采集。对固着于石块等物体上的藻可用刮刀将藻从基部刮下或连同附着物一起采 集。将采集到的标本放入标本瓶中并加入一些水，但水不要加得太满，应留有一 定的空间，标本瓶盖应注意密封，防止样品流失。标本瓶上要贴上标签，标签上 须用铅笔注明该标本采集的地点、日期和采集者。浮游种类要用专用的浮游生物网采集，如无专用工具，也可用市售的300目 尼龙筛绢对水体进行过滤，滤出的藻体可用少量水冲洗入标本瓶中。标本采集时还应用记录本记下各标本的采集环境、气温、水温、pH值、藻的 附着基质、水体透明状况、藻体的手感是否滑腻等，这些都是鉴定藻类的参考条 件。因此应注意

5、详细记录。新鲜的藻标本不宜久存，应尽快对标本进行观察鉴定，好的标本可用4%的 甲醛溶液(福尔马林溶液)固定保存。气生藻标本的采集气生藻类多生长在阴湿的地面、墙壁以及树干的背荫面。这类藻可用小铲刀 采集，用牛皮纸包好，风干后保存。对气生藻进行观察时，可用镊子镊取少许藻 体，放在载玻片上，滴一小滴水浸润后在显微镜下观察形态。2.2几种常见藻类的采集、观察和保存水绵 在春秋季较清洁的水体中较常见，用手指捻摸有滑腻感，在显 微镜下观察藻丝无分枝，叶绿体呈典型的螺旋带状，如在样品上加一点碘液(或 碘酒)可见排列于叶绿体上的淀粉颗粒染成深褐色。鞘藻和刚毛藻也是很常见的 丝状绿藻，与水绵不同的是这两种藻多生

6、长于污染水体中。鞘藻不分枝但手摸无 滑腻感，较老的细胞两端不等宽，进行有性生殖时形成大球形合子，易与水绵区 分；刚毛藻手摸有粗糙感，藻丝分枝。硅藻在雨后浅积水、小水沟等水质清澈的水体底部，呈棕色的表 层中均有大量的硅藻生长，硅藻一般个体较小，显微镜下可见多为舟形，会缓慢 滑动。颤藻 各种水体中均可见，以污水中较多，呈粘滑膜片状，深绿至 黑褐色。显微镜下观察藻丝不分枝，细胞中仅见均匀小颗粒。衣藻多出现于春秋季富含有机物的临时小水体中，可大量繁殖使水 体呈绿色。在显微镜下观察，藻体游动，呈卵圆形，高倍镜下仔细观察顶端有两 条等长鞭毛。衣藻标本固定一般用I2-KI溶液以防止鞭毛脱落。固定后的标本一

7、般可保存数周至几个月。裸藻也是一种单细胞游动藻类，细胞为梭形，顶部一根 鞭毛。绿球藻 生长于树皮上，呈绿色粉末状。显微镜观察为绿色圆球状。2.3对采集来的藻类植物进行分离、培养、鉴定和制作标本。本实验使用的藻类来自于自然水体，经过加营养盐(见表3-1)进行培养表3-1营养液配方营养盐贮备液浓度g/L测试液最终浓度mg/L氯化铵1.515六水氯化镁1.212二水氯化钙1.818七水硫酸镁1.515磷酸二氢钾0.161.6*注：营养盐贮备液经过滤后4C避光冷藏保存2.4取两个250ml锥形瓶，分别在酒精灯上灭菌，分别倒入10ml水样，将 已灭菌的硅藻和绿藻的土壤提取液注入两个锥形瓶中，分别注入10

8、0ml。将两个锥形瓶放入29.1 C培养箱中。一般培养时间3-5天，如果室温过低， 培养时间可增加到15天。培养期间隔2-3天，移出一半藻种培养液，加入新鲜 培养液到原来的体积，进行培养。这样重复2-3次。培养方式采用静置培养，每 天摇动3-4次，每次10分钟，其目的是使藻类处于悬浮状态，利于驯化和扩大 培养。实验结果与讨论3.1本实验经过反复进行才成功，分析主要原因有以下几点：细菌对藻类的影响。实验开始要对锥形瓶口进行消毒，若消毒工作做 得不好，极有可能导致藻类无法生长。培养液温度对藻类的影响。培养液高温杀菌后要冷却后再倒入瓶中进 行接种，若未待冷却就注入瓶中，温度过高极易可能烫死藻类。氧气对藻类影响。实验过程中曾把锥形瓶封口，导致部分藻类死亡， 部分瓶中藻类无法生长，封口几日，瓶内氧气不足，藻类产生的氧气无法供其生 存，导致死亡。3.2由本实