甾体激素类药物的分析课件1

1、第十五章甾体激素类药物的分析第1页，共44页。基本结构：环戊烷并多氢菲ABCD12345678910111213141516171819一、基本结构及分类第2页，共44页。分类：甾体激素肾上腺皮质激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素第3页，共44页。二、结构与性质 1. 肾上腺皮质激素主要活性基团性 质4 3 酮UV、与羰基试剂反应C17 醇酮基还 原 性第4页，共44页。2. 雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团性 质4 3 酮UV、与羰基试剂反应 C17 羟基可成酯第5页，共44页。3. 孕激素主要活性基团性 质4 3 酮UV、与羰基试剂反应C17 甲酮基与亚硝基铁氰化纳反应C17

2、乙酰氧基C17 乙炔基水解鉴定乙酸与硝酸银沉淀第6页，共44页。4. 雌激素主要活性基团性 质A环为3OH 苯环UV、与重氮苯磺酸盐反应C17 乙炔基与AgNO3反应C17 羟基可成酯第7页，共44页。二、鉴别试验（一）与强酸的呈色反应甾体激素类药物呈色H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl（母核）第8页，共44页。与硫酸显色反应 显 色 荧光 加水稀泼尼松龙 深红 絮状灰泼尼松 橙 黄蓝绿炔雌醚 橙红 黄绿 红色 炔雌醇 橙红 黄绿 絮状玫红醋酸可的松 黄或微 褪色并澄 带橙 清第9页，共44页。(二) 官能团的反应肾上腺皮质激素药物呈色四氮唑盐费林试液多伦试液OH1 C17 醇酮基还原

3、性A. 呈色反应第10页，共44页。肾上腺皮质激素药物Cu2O橙红色碱性酒石酸铜B. 沉淀反应Ag黑色氨制硝酸银第11页，共44页。甾体类激素药物黄色的腙羰基试剂2. C3酮基和C20酮基常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼第12页，共44页。黄体酮蓝紫色亚硝基铁 氰化纳其他甾体淡橙色不显色3. 甲酮基呈色反应第13页，共44页。雌激素类药物红色偶 氮染料重氮苯磺酸4. 酚羟基第14页，共44页。含炔基的甾体激素白色银盐沉淀硝酸银5. 乙炔基第15页，共44页。有机氟F有机破坏有机氯Cl6. 有机卤素茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸硝酸银AgCl 蓝色配合物 第16页，共44页。-3-酮

4、 240nm苯环 280nm（三） UV法第17页，共44页。（四） IR法第18页，共44页。（五） TLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别第19页，共44页。（六） HPLC法 主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）第20页，共44页。三、 杂质检查（一）有关物质检查定义 与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“有关物质”第21页，共44页。（1）TLC法（高低浓度对比法） 判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色第22页，共44页。（2）HPLC法（高低浓度对比法） 判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积第23页，共44页。（二）游离磷酸的检

5、查地塞米松磷酸钠氢化可的松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠对照品法第24页，共44页。（三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮甲醇 0.3%丙酮 0.5% GC法第25页，共44页。（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RPHPLC（大多内标法）特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快例：黄体酮的含量测定：ODS柱；甲醇-水（65：35）；254nm内标：己烯雌酚（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）四、含量测定第26页，共44页。（二）UV法-3-酮 240nm（）肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素 苯环 280nm（）雌激素第

6、27页，共44页。（三）比色法弱、非分光光度活性药物强分光光度活性药物化学反应第28页，共44页。 肾上腺皮质激素类C17 -醇酮基强还原性1. 原理OH -还原四氮唑比色法第29页，共44页。 制备对照液 制备供试液加入四氮唑盐有色产物484nmAX CXAR标示量（%）=AXAR V标示量100%2、方法：以醋酸地塞米松为例第30页，共44页。3. 讨论（1） 基团对反应速度的影响C11= O C11OHC21OH C21-酯第31页，共44页。（2） 溶剂、水分的影响含水量5%含水10%A10%含水30%几无反应 无醛无水乙醇醛 A 无水乙醇第32页，共44页。（3） O2与光线的影响反

7、应过程反应产物怕光避光、快速O2影响颜色强度和稳定性隔绝空气、 快速、充N2第33页，共44页。（4）碱的种类及加入顺序反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳加入顺序：第34页，共44页。（5） 温度与时间t甲瓒分解ChP 25 4045第35页，共44页。肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3酮基1. 原理HCl（缩合）异烟肼比色法第36页，共44页。2.测定方法第37页，共44页。3.讨论反应速度（1）C3= O C17= O 、 C20= O C11= O 不反应反应专属性 C3酮基第38页，共44页。（2）溶剂的选择异烟肼盐酸盐甲醇、乙醇无水甲醇无水乙醇第39页，共44页。 原理max=515雌激素Kober反应比色法第40页，共44页。1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解其他鉴别方法3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查第十章 复习内容第41页，共44页。4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了解 UV法、Kober反应比色法及HPLC 法在其含量测定中的应用第42页，共44页。.Kober反应是