食物过敏的实验诊断课件

1、食物过敏的实验诊断 血清sIgE检测的现在和未来 食物过敏 Food Allergy IgE-Dependent Immune Responses 食物不耐受 Food Intolerance与食物相关的超敏反应食物过敏（Food Allergy）临床诊断询问病史体内试验体外试验SPTsIgE实验诊断tIgEsIgEMcAbPcAb问题：蛋白含量与生物活性血清sIgE检测的现状免疫球蛋白E（IgE）的发现 花粉过敏患者 1819年， Dr. John Bostock 输血所致过敏性哮喘 1919年， Ramirz 免疫球蛋白E（IgE） 1967年， Ishizaka（瑞典）和Bennich

2、& Jonansson（美国）Fig 免疫球蛋白E（IgE）分子结构免疫球蛋白E（IgE）的体内分布结合型IgE抗体与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合游离型IgE抗体未与嗜碱性粒细胞或肥大细胞结合图：IgE与IgE受体结合免疫球蛋白E（IgE）的检测（1）血清（游离）IgE的检测总IgE水平Total IgE，tIgE特异性IgE水平Specific IgE，sIgE牛奶蛋白 某一蛋白 抗原表位牛奶sIgE抗体：血清tIgE水平放射免疫吸附试验（经典） radioimmnosorbent test，RIST血清tIgE水平化学发光免疫分析（现状） chemiluminescence immunoas

3、sayCLIA优点准确；快速血清sIgE水平放射过敏原吸附试验（经典） radioallegosorbent test，RAST血清sIgE水平荧光酶免疫分析 immuno-CAP血清sIgE水平荧光酶免疫分析 金标准 单种过敏原 随机组合 定量分析血清sIgE水平斑点酶联免疫吸附试验 Dot-ELISA（膜条）多种过敏原联合测定 廉价（符合国情） 组合模式（固定）血清sIgE水平酶联免疫吸附试验 ELISA（捕获法）免疫球蛋白E（IgE）的检测（2）外周血嗜碱性粒细胞激活试验Basophil Activation Tests, BAT 细胞表面（结合型）sIgE 体内sIgE生物学活性检测嗜

4、硷性粒细胞激活试验（BAT）临床标本外周抗凝血（全血） 特定过敏原将外周血已致敏的嗜碱性粒细胞激活 细胞鉴定与活化状态流式细胞仪（FCM）检测特定标志嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）FCM anti-CD123 anti-HLA-DR anti-CD63 or CD203c嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）激活状态CD63+嗜硷性粒细胞激活试验（BAT）卵巢发展蛋白蟹黄Eri s 2Fig rEris 2和CO诱导体外嗜碱性粒细胞激活结果血清sIgE检测的未来免疫球蛋白E（IgE）的检测存在问题科学问题过敏原的复杂性与血清sIgE的异质性血清sIgE含量测定与致病活性测定技术问题 现有方法不能满足临

5、床需要（简单、快速、通量）光激化学发光分析（LICA） 发光体系 发光微球（FG） 接受能量 受体微球（A） 感光微球（GG） 提供能量 供体微球（D）血清tIgE检测双抗夹心-LICA免“洗涤”高 - 精密度Fig 血清tIgE定量分析原理tIgE血清tIgE检测(LICA)分析性能参数批内精密度5.3 5.8批间精密度5.3 9.0血清sIgE检测蛋清sIgE四种过敏原受体微球-卵类黏蛋白（Gal d 1）受体微球-卵白蛋白（Gal d 2）受体微球-卵转铁蛋白（Gal d 3）受体微球-卵溶菌酶（Gla d 4）Fig B 血清蛋清sIgE检测模式血清sIgE检测（蛋清）- LICA分析

6、性能参数ELISALICA血清稀释曲线血清sIgE的精准检测分子诊断（CRD）The determination of specific IgE to different allergens is called molecular diagnosis or component-resolved diagnosis (CRD)血清sIgE抗体谱针对每种蛋白特异性抗体（sIgE）component-resolved diagnosis (CRD)Molecular diagnosis will help to increase the sensitivity of the testing and, on the other hand, provides a more-detailed patient-tailored risk profile.血清sIgE的异质性梭子蟹过敏原sIgE抗体异质性血清sIgE抗体谱检测过敏原组分sIgE抗体谱精准sIgE检测精准脱敏治疗天然总蛋白溶液 天然单一蛋白纯品 重组单一蛋白溶液已知抗原：血清sIgE和细胞表面sIgE细胞学方法生物学活性血清sIgE生物活性检测嗜碱性粒细胞激活试验（BAT）血清sIgE介导嗜碱性粒细胞KU812（