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文档简介
1、基因芯片(Gene Chip)定义基因芯片又称DNA芯片(DNA Chip)或生物芯片(Biological chip), 是指将大量探针分子固定于支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号的强度及分布进而对靶分子的序列和数量进行分析。基本构造1.支持物:如玻片、硅片、NC膜、Nylon膜2.探针:高密度的探针序列按照一定的次序固定在支持物上,每个位点的序列是已知的外观探针支持物剖面图平面局部放大基因芯片技术流程探针的设计与制备支持物的类型与预处理芯片的制作点样后处理样品的准备杂交与杂交后清洗检测分析基本过程用生物素标记并经扩增(也可使用其它放大技术)的靶序列或样品然后再与芯片上的大
2、量探针进行杂交用链霉亲和素(streptavidin)偶联的荧光素(常用的荧光素还有lassamine 和phycoerythrin)进行显色图象的采集用落射荧光显微镜(epifluorescence microscope)、激光共聚焦显微镜或其它荧光显微装置对片基扫描由计算机收集荧光信号,并对每个点的荧光强度数字化后进行分析。基因芯片的分类基因芯片有不同的分类方法: 按其片基不同可分为无机片基芯片和有机合成片基芯片; 按其应用不同,可分为表达谱芯片、诊断芯片、检测芯片;按其结构不同可分为DNA 阵列和寡核苷酸芯片; 按其制备方法不同可分为原位合成芯片和合成后交联芯片(合成后点样芯片)。制作方
3、法光刻DNA合成法点接触法喷墨法光刻DNA合成法寡聚核苷酸原位光刻合成技术是由Affymetrix公司开发的,采用的技术原理是在合成碱基单体的5羟基末端连上一个光敏保护基。合成的第一步是利用光照射使羟基端脱保护,然后一个5端保护的核苷酸单体连接上去,这个过程反复进行直至合成完毕。使用多种掩盖物能以更少的合成步骤生产出高密度的阵列,在合成循环中探针数目呈指数增长。优点: 合成效率高,点阵密度高,实现标准化和批量化大规模生产缺点: 设备昂贵,技术复杂,反应产率低点接触法(点膜法)点样法是将合成好的探针、cDNA或基因组DNA通过特定的高速点样机器人直接点在芯片上。采用的机器人有一套计算机控制三维移
4、动装置;多个打印/喷印针的打印/喷印头;一个减震底座,上面可放内盛探针的多孔板和多个芯片。根据需要还可以有温度和湿度控制装置;针洗涤装置。打印/喷印针将探针从多孔板取出直接打印或喷印于芯片上。直接打印时针头与芯片接触,而在喷印时针头与芯片保持一定距离。优点:设备廉价,技术简便,研制周期短,灵活性高 缺点:点阵密度低 喷墨法芯片原位喷印合成原理与喷墨打印类似,不过芯片喷印头和墨盒有多个,墨盒中装的是四种碱基等液体而不是碳粉。喷印头可在整个芯片上移动并根据芯片上不同位点探针的序列需要将特定的碱基喷印在芯片上特定位置。该技术采用的化学原理与传统的DNA固相合成一致,因此不需要特殊制备的化学试剂。 三
5、种制作芯片方法的示意图normalcancerDNADNAGENERAL SCANNING - ScanArray System 检测分析芯片技术的应用1. DNA序列测定基因芯片不仅可对大量基因或序列同时、快速进行定性、定量分析,而且作为一种极有发展前途的测序策略也倍受人们的重视。2. 蛋白质芯片 基因组计划后的另一项重要计划:蛋白组计划; 正常与癌变细胞蛋白谱的差异分析。3. 基因突变检测与遗传病和肿瘤诊断 点突变,基因缺失、扩增、插入、重复、倒位等。4. 药物筛选 在基因水平上寻找药物靶标,毒性对基因的影响。5. 微型化分析仪器 快速、平行、重复性检测。展望 尽管基因芯片技术已经在一些科
6、学研究和医学临床实践中得到了一些应用,但是在一些领域尤其在兽医领域中基因芯片技术还尚处于初步的探索发展阶段,在基因治疗和基因疫苗的研制等方面基因芯片技术还没有得到广泛的应用,但随着生物信息学的进步和发展,基因芯片技术一定会进一步成熟,必将给人类提供越来越多的方便,发挥越来越大的重要作用,从而帮助人们认识、掌握和利用生命科学的规律。1、不是井里没有水,而是你挖的不够深。不是成功来得慢,而是你努力的不够多。2、孤单一人的时间使自己变得优秀,给来的人一个惊喜,也给自己一个好的交代。3、命运给你一个比别人低的起点是想告诉你,让你用你的一生去奋斗出一个绝地反击的故事,所以有什么理由不努力!4、心中没有过
7、分的贪求,自然苦就少。口里不说多余的话,自然祸就少。腹内的食物能减少,自然病就少。思绪中没有过分欲,自然忧就少。大悲是无泪的,同样大悟无言。缘来尽量要惜,缘尽就放。人生本来就空,对人家笑笑,对自己笑笑,笑着看天下,看日出日落,花谢花开,岂不自在,哪里来的尘埃!5、心情就像衣服,脏了就拿去洗洗,晒晒,阳光自然就会蔓延开来。阳光那么好,何必自寻烦恼,过好每一个当下,一万个美丽的未来抵不过一个温暖的现在。6、无论你正遭遇着什么,你都要从落魄中站起来重振旗鼓,要继续保持热忱,要继续保持微笑,就像从未受伤过一样。7、生命的美丽,永远展现在她的进取之中;就像大树的美丽,是展现在它负势向上高耸入云的蓬勃生机
8、中;像雄鹰的美丽,是展现在它搏风击雨如苍天之魂的翱翔中;像江河的美丽,是展现在它波涛汹涌一泻千里的奔流中。8、有些事,不可避免地发生,阴晴圆缺皆有规律,我们只能坦然地接受;有些事,只要你愿意努力,矢志不渝地付出,就能慢慢改变它的轨迹。9、与其埋怨世界,不如改变自己。管好自己的心,做好自己的事,比什么都强。人生无完美,曲折亦风景。别把失去看得过重,放弃是另一种拥有;不要经常艳羡他人,人做到了,心悟到了,相信属于你的风景就在下一个拐弯处。10、有些事想开了,你就会明白,在世上,你就是你,你痛痛你自己,你累累你自己,就算有人同情你,那又怎样,最后收拾残局的还是要靠你自己。11、人生的某些障碍,你是逃
9、不掉的。与其费尽周折绕过去,不如勇敢地攀登,或许这会铸就你人生的高点。12、有些压力总是得自己扛过去,说出来就成了充满负能量的抱怨。寻求安慰也无济于事,还徒增了别人的烦恼。13、认识到我们的所见所闻都是假象,认识到此生都是虚幻,我们才能真正认识到佛法的真相。钱多了会压死你,你承受得了吗?带,带不走,放,放不下。时时刻刻发悲心,饶益众生为他人。14、梦想总是跑在我的前面。努力追寻它们,为了那一瞬间的同步,这就是动人的生命奇迹。15、懒惰不会让你一下子跌倒,但会在不知不觉中减少你的收获;勤奋也不会让你一夜成功,但会在不知不觉中积累你的成果。人生需要挑战,更需要坚持和勤奋!16、人生在世:可以缺钱,但不能缺德;可以失言,但不能失信;可以倒下,但不能跪下;可以求名,但不能盗名;可以低落,但不能堕落;可以放松,但不能放纵;可以虚荣,但不能虚伪;可以平凡,但不能平庸;可以浪漫
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