肿节风药材检验标准操作规程

1、肿节风药材检验操作规程范围 本标准建立了肿节风药材的检验操作规程。本标准适用于肿节风药材的检验。 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，其最新版本适用于本标准。中华人民共和国药典 2010版一部 肿节风药材质量标准 编号 3 职责 检验人员、复核人员对实施本标准负责。4 操作规程4.1 试药与试剂 甲苯、乙酸乙酯、甲酸、磷酸、盐酸、五氧化二磷、硫酸、硝酸、水合氯醛、甘油醋酸试液、稀甘油、羧甲基纤维素钠、硅胶G、氯仿、氨水、甲醇、5%对二甲氨基苯甲醛、20%三氯醋酸的苯溶液、0.5%的氯化铵溶液、稀盐酸、 乙腈、0.1磷酸溶液、肿节风对照药材、反丁烯二酸对照品、异

2、秦皮啶对照品、迷迭香酸对照品。4.2 设备及仪器 放大镜、直尺、生物显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、酒精灯、层析缸、药筛、电子天平、回流装置、硅胶G薄层板、无灰滤纸、点样毛细管、表面皿、紫外光灯、水浴锅、坩埚、扁形称量瓶、蒸发皿、高效液相色仪、烘箱、具塞锥形瓶、10量瓶、箱式电阻炉、电炉、干燥器。4.3 检验项目 性状（1） 操作方法 取用供试品，用目视或用放大镜观察，并用直尺测量其直径；闻其气，用口尝其味。（2） 记录 记录观察的形状，供试品其直径数值和气味。（3） 结果判定 本品长50120 cm，根茎较粗大,密生细根。茎圆柱形，多分枝，直径0.31.3cm；表面暗绿色至暗褐色，有明显的细纵

3、纹，散有纵向皮孔，节膨大；质脆，易折断，断面有髓或中空。叶对生，叶片卵状披针行至卵状椭圆形，长515 cm，宽36cm，表面绿色、绿褐色至棕褐色或棕红色，光滑；边缘有粗锯锯齿，齿尖腺体黑褐色，叶柄长约1cm，近革质。穗状花序顶生，常分枝。气微香，味微辛。判为符合规定。 鉴别.1 显微鉴别（1） 操作方法 取本品茎的横切面和粉末，滴加水合氯醛试液后，加热透化，再加稀甘油装片，在下观察。（2） 记录 记录茎的横切面和粉末鉴别特征。（3） 结果判定 茎的横切面：表皮细胞类长方形或长圆形，外被角质层，外缘呈钝齿状。皮层细胞10余列，外侧为23列厚角细胞 内侧薄壁细胞内含棕黄色色素，石细胞单个或成群散在

4、。中柱鞘纤维束呈新月形，断续环列，木化。韧皮部狭窄。木质部管胞多数，射线宽23列细胞。髓部薄壁细胞较大，有时可见石细胞单个或成群散在。 粉末：黄绿色至绿棕色。木薄壁细胞类方形或长方形,内含棕黄色色素。石细胞类方形、类圆形或不规则多角形,单个或成群,直径40-60l,胞腔较大,内含分泌物,孔沟明显。纤维狭长梭形或长条形,直径6-30m,壁厚,木化。叶上表皮细胞方形或长方形,垂周壁微波状弯曲或稍平直,外被厚角质层。叶下表皮细胞类多角形,垂周壁微波状弯曲或稍平直,气孔稍下陷,不定式,副卫细胞3-5个。网纹导管、螺纹导管及环纹导管易见,非木化。判为符合规定。.2 理化鉴别 照薄层色谱法（中国药典201

5、0版一部附录VI B）。（1）操作方法 取本品粉末2g 加水50ml,超声处理30分钟，滤过 ，滤液加乙酸乙酯振摇提取2次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取肿节风对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取异秦皮啶对照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各4l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9：4：1）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。（2） 记录 记录供试品和对照药材的用量，吸附剂、展开剂及其配比、点样量、薄层色谱图及

6、结果。（3） 结果判定 供试品色谱中，在与对照品药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；置氨蒸气中熏10分钟，与对照品色谱相应的斑点变为黄绿色。判为符合规定。 检查：.1 水分 照水分测定法（中国药典2010版一部附录 H第一法）。（1）操作方法 取本品25g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100105干燥5小时，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、干燥温度、干燥时间、水分的计算和结果

7、。计算公式： m p+ my - m z 水分= 100% m y式中：mp为恒重的称量瓶；（g）my为样品重；(g)mz为恒重的（瓶+样品）(g)（3）结果判断本品的水分小于或等于15.0%，判为符合规定。.2 总灰分 照灰分测定法（中国药典2010版一部附录 K）（1） 操作方法 取本品35g，至灼灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化，逐渐升高温度至500600，使完全灰化并至恒重。 根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、炽灼温度、炽灼时间、灰分的计算和结果。计算公式： mzmp 总灰分= 100% my式

8、中：mp 为坩埚恒重；my为样品重；mz为炽灼后（坩埚+样品）恒重（3）结果判断 本品的灰分小于或等于10.0%，判为符合规定。.3 酸不容性灰分 照酸不溶性灰分测定法（中国药典2010版一部附录 K）（1）操作方法 取4.3.3.2项下所得灰分的，在坩埚中小心加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10分钟，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不容性灰分的含量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、炽灼温度、炽灼时间、酸不溶性灰分

9、的计算和结果。 计算公式： mzmp 酸不溶总灰分= 100% my式中：mp 为坩埚恒重；my为样品重；mz为炽灼后（坩埚+样品）恒重（3）结果判断 本品的灰分小于或等于2.0%，判为符合规定。.3.3.4浸出物照水溶性浸出物测定法项下的热浸法（中国药典2010版一部附录 ）（1）操作方法 取本品4g，精密称定，置250ml的锥形瓶中，精密加入水100ml，密塞，精密称定，静置1小时后，连接回流冷凝管，加入至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，在称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取25ml,置以干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，与105干燥3小时，置

10、干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品的水溶性浸出物的含量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、加水量、滤液取用量、干燥温度、干燥时间、浸出物的计算和结果计算公式： （mz-mp）V 浸出物= 100% my25式中：mp为蒸发皿恒重；my为样品重；mz为干燥后（蒸发皿+样品）恒重； V为加水量。（3）结果判断 本品的浸出物不少于10.0。判为符合规定。 含量测定 4. 反丁烯二酸 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定 （1）操作方法 色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，以乙腈-水-磷酸(2:98:0.05)作为流动相;检测波长为

11、208nm,理论塔板数按反丁烯二酸计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的反丁烯二酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含反丁烯二酸20g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过3号筛）1g，精密称定，置具塞锥开瓶中，精密加入70%乙醇溶液50ml，称定重量，于水浴中加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70%乙醇溶液补足减失重量，摇匀，以微孔滤（0.45m）滤过,即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。（2）记录 记录对照品浓度、对照品峰面积、样品峰面积、样品称样量、含量的计算和结果。 计算公式 ：含量（%）=A

12、样C标V样A标M样10001000100%式中：A样：样品峰面积M样：样品称样量（以干燥品计）A标：对照品峰面积C标：对照品浓度V样：样品溶液体积（3）结果判定本品反丁烯二酸（C4H404）不得少于0.10%。判为符合规定。4.3.5.2 异秦皮啶、迷迭香酸 避光操作 照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录VI D）测定。（1）操作方法 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液(20:80)为流动相;检测波长为342nm。理论板数按异嗪皮啶峰计算应不低于4000。对照品溶液的制备 取异嗪皮啶对照品、迷迭香酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lm

13、l各含lOug的溶液,即得。供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.4g,精密称定,置具篆锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l.注入液相色谱仪,测定,即得。（2）记录 记录对照品浓度、对照品峰面积、样品峰面积、样品称样量、含量的计算和结果。 计算公式 ：含量（%）=A样C标V样A标M样10001000100%式中：A样：样品峰面积M样：样品称样量（以干燥品计）A标：对照品峰面积C标：对照品浓度V样：样品溶液体积（3）结果判定 本品按干燥品计算,

14、含异嗪皮啶(C11H10O5)不得少于0.020%,含迷迭香酸(C18H1608)不得少于0.020%。判为符合规定。 肿节风药材检验记录批 号规 格检验项目数 量请验部门检验日期年 月 日来 源报告日期年 月 日检验依据肿节风药材质量标准及中华人民共和国药典2010版一部【性状】 本品长 ，根茎 ,密生细根。茎圆 ，多分枝，直径 表面 ，有明显的 ，散有 ，节膨大；质脆，易折断，断面有 。叶 ，叶片 ，长 ，宽 ，表面 、 ，光滑；边缘有 ，齿尖腺体 ，叶柄长约 ，近 。穗状花序 ，常分枝。气 ，味 。 结论： 【鉴别】 茎的横切面：表皮细胞 ，外被角质层，外缘呈 。皮层细胞 余列，外侧为

15、列厚角细胞 内侧薄壁细胞内含 ，石细胞 。中柱鞘纤维束呈 ，断续环列， 。韧皮部狭窄。木质部 ，射线宽 。髓部 ，有时可见 。叶表面观：表皮细胞 ，气孔稍下陷，不 。 结论： 粉末鉴别： 。木薄细胞类方形或长方形，内含棕黄色色素。石细胞 ，单个或成群，直径 ,胞腔较大，内含分泌物，孔沟明显，纤维 ，直径 um，壁厚，木化。叶上表皮细胞 ，垂周壁微波状弯曲或稍平直，外被厚角质层。叶下表皮细胞类 ，垂周壁微波状弯曲或稍平直，气孔稍下陷，不定式，副卫细胞 。网纹导管，螺纹导管及环纹导管易见，非木化。 结论： 检验人： 复核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日第1页 共4页 理化鉴别： 取

16、本品粉末2g 加水50ml,超声处理30分钟，滤过 ，滤液加乙酸乙酯振摇提取2次，每次25ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取九节茶对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取异秦皮啶对照品，加甲醇制成1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各4l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9：4：1）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品药材和对照品色谱相应的位置上， ；置氨蒸气中熏10分钟， 。1. 2. 3. 结论： 【检查】 水分：照

17、水分测定法（中华人民共和国药典 2010版一部附录 H第一法）测定。项目序号称量瓶恒重样品重（瓶+样品）105干燥5h后重105继续烘1h后（瓶+样品）重如未恒重，105继续烘1h （1）（2）计算：（1） 100%= （2） 100%=平均值： = 结论： 总灰分： 照灰分测定法(中华人民共和国药典 2010版一部附录 K)测定。项目序号坩埚恒重/g样品重/g（坩埚+样）550炽灼4h后重/g550继续炽灼1h后（坩埚+样）恒重/g如未恒重550继续炽灼1h后（1）（2）计算： （1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 结论： 酸不溶性灰分： 照酸不溶性灰分测定法(中华人民共和国

18、药典 2010版一部附录 K)测定。 项目序号坩埚恒重/g样品重/g（坩埚+样）550炽灼4h后重/g550继续炽灼1h后（坩埚+样）恒重/g如未恒重550继续炽灼1h后（1）（2）第2页 共4页 检验人： 复核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日计算： （1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 结论： 浸出物: 照水溶性浸出物测定法项下的热浸法（中华人民共和国药典 2010版一部附录）测定。项目序号蒸发皿恒重/g加水量/ml样品重/g（皿+样）105干燥3h后重/g（1）（2）计算： （1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 结论： 【含量测定】 照高效液相色谱法（中国药典2010版一部附录 ）测定。 反丁烯二酸： 色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，以乙腈-水-磷酸(2:98:0.05)作为流动相;检测波长为208nm,理论塔板数按反丁烯二酸计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷干燥至恒重的反丁烯二酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含反丁烯二酸20g的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过3号筛）1g，精密称定，置具塞锥开瓶中，精密加入70%乙醇