课题3　分解纤维素的微生物的分离

1、课题三 分解纤维素的微生物的分离专题二 微生物的培养与应用纤维素：棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物纤维素能被土壤中微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。1.简述纤维素酶的种类及作用2.从土壤中分离分解纤维素的微生物课题目标讨论：食草动物是怎样消化食物中纤维素的？在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素。纤维素生物燃料：最有希望替代石油的能源科学家正致力于研究，怎样将农业废弃物，木材及生长更为迅速的草本植物，转化为种类繁多的生物燃料（甚至是航空燃料）基础知识1.纤维素纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富

2、的多糖类物质。2.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶（一）纤维素和纤维素酶纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素【思考】实验分析：对照组实验组实验说明：纤维素酶可以分解纤维素（二）纤维素分解菌的筛选1.方法：刚果红染色法该方法通过颜色反应直接筛选2.原理：刚果红可以与纤维素形成_,当纤维素被_分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的_,可以通过_来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶透明圈是否产生透明圈空白的刚果红培养基纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明带从功能上看，这是一种什么培养基？鉴别培养基实验设计（一）实验流程土壤

3、取样选择培养（可省略）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落111、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_【选择培养】液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_ 具有 以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将_改为_。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。1、土壤取样地点：富含纤维素的环境中2、选择

4、培养目的：增加纤维素分解菌的浓度选用的培养基：液体选择培养基可以设计一个牛肉膏蛋白胨培养基做对照试验【操作步骤】1、为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？2、将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高。【思考】3、鉴别纤维素分解菌的培养基刚果红培养基染色法优点缺点先培养微生物，再加入刚果红倒平板时就加入刚果红颜色反应基本是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红可能会使菌落之间发生混乱操作简便，不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透

5、明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分两种方法的比较：有可能刚果红染液把一个菌落的菌冲到另一个菌落里,这样的话菌落就可能不是单菌种了,挑菌摇菌的时候有可能得到混合菌16在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。【思考】为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。 生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境1、

6、取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？结果分析与评价 2.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落？对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。3.分离的结果是否一致？由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，不同同学也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。20为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_实验，纤维素酶的发酵方法有_ 发酵和_ 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_ 含量进行定量测定。发酵产纤维素酶

7、液体 固体 葡萄糖 课题延伸分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结操作提示课题延伸结果分析与评价复习微生物技术选择培养的操作方法环境特点，取样理由培养基是否合格，是否筛选出菌落分离结果是否一致发酵产纤维素酶实验鉴定随堂练习1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是（ ）A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖D2.利用刚果红染色法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是（ ）A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌B3.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？（ ）A.生物结构与功能相适应的观点 B.生物结构与功能整体性观点C.生物与环境相适应的观点 D.生物发展进化的观点C4.从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（