正交实验法优选护肝康片中水飞蓟素纯化工艺

1、正交实行法优选护肝康片中水飞蓟素纯化工艺张良许沛虎张雪琼允许高媛张双硕【摘要】目的优选护肝康片中水飞蓟总黄酮最正确纯化工艺。要领在观察纯化要领的条件下,接纳正交实行法，以提取物中总黄酮量和水飞蓟宾的量为观察指标,观察影响水飞蓟素纯化因素。结果水飞蓟总黄酮最正确纯化工艺为接纳8%浓缩液，3倍量体积醋酸乙酯萃取2次，10in/次。结论优选的水飞蓟总黄酮纯化工艺不变可行。【关键词】正交实行水飞蓟素纯化工艺Abstrat:bjetiveTptiizethepurifiatinpressfttalflavnidsfrSilybuarianu.ethdsnthepreisefthebestpurifiat

2、inethd,rthgnaltestasusedfrstudyingtheeffetfsilyarinpurifiatiniththententsfttalflavnidsandsilybinasindex.ResultsTheptialnditinsereasflls：3tiesauntfethylaetate,8%nentratedslutin,extrating2ties,10inuterseahtie.nlusinTheptiupurifiatintehnlgyfttalflavnidsfrSilybuarianuisstableandfeasible.Keyrds:rthgnalte

3、st;Silybu;Purifiatintehnlgy护肝康片由单方药材水飞蓟构成,具有护肝保肝改进肝成果、低落血脂的成果,可用于各型肝炎的治疗。水飞蓟为菊科植物水飞蓟Silybuarianu(L.)Gaertn的果实。水飞蓟素(silyarin)是自然黄酮木脂素类化合物,为水飞蓟的果实经提取精制而得的混淆物。其重要身分为水飞蓟宾、异水飞蓟宾等。水飞蓟素作为抗肝损伤药物具有不变细胞膜、改进肝成果的作用1，2。本实行对水飞蓟中黄酮类物质的纯化要领举行了研究，优化水飞蓟纯化工艺，为水飞蓟中总黄酮提取纯化提供科学根据。1仪器与试药1.1仪器UV1101型紫外分光光度仪上海天美科学仪器，安捷伦1100

4、高效液相色谱仪，旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂，超声洗濯器天津赛恩斯科学仪器。1.2药材与试剂水飞蓟宾比较品(中国药品生物成品检定所，批号：0856-200203),水飞蓟药材购自武汉红十字药业。阐发纯甲醇、石油醚、醋酸乙酯，色谱甲醇。2要领与结果3,42.2水飞蓟总黄酮的测定2.3水飞蓟宾的测定2.4提取样品的制备称取水飞蓟药材300g，破坏，脱脂枯燥，用10倍量90%的乙醇提取3次，1h/次，分次过滤，归并滤液，滤液减压浓缩至无醇味，加水定容至1000l，摇匀。2.5纯化要领比力别离接纳萃取法和大孔树脂法纯化得提取物。萃取法：取100l浓缩液，用100l醋酸乙酯萃取两次，归并萃取液浓缩至干，

5、得提取物。大孔树脂法：取100l浓缩液，上D101-1树脂柱，水洗除杂，然后用70%乙醇洗脱2倍柱体积，归并洗脱液浓缩至干，得提取物。紫外测定总黄酮含量和高效液相色谱法测定水飞蓟宾含量。结果见表1。由以上结果可知，接纳萃取纯化要领得到的提取物总黄酮量和水飞蓟宾的量均比大孔树脂纯化高，因此接纳萃取法对水飞蓟素举行纯化。表1纯化要领比力结果略2.6萃取条件优选根据影响萃取的重要因素，选择药液浓度A、萃取体积比B、萃取时间、萃取次数D作为观察因素，每个因素取3个程度见表2。取水飞蓟浓缩液50l，方案L9(34)正交实行，以总黄酮的量和水飞蓟宾的量为观察指标，正交实行表方案见表3。对结果举行统计学处置

6、惩罚，方差处置惩罚结果见表45。表2工艺优化的因素程度略表3L9(34)正交实行结果略表4总黄酮丈量结果方差阐发略由表4总黄酮丈量结果和方差阐发可知，各因素对纯化结果的影响程度依次为D萃取次数B(体积比)A溶液浓度萃取时间，D萃取次数因素影响差异有明显性，水总黄酮丈量结果直不雅阐发表白优化工艺应为A3B21D2。表5水飞蓟宾丈量结果方差阐发略由表5水飞蓟宾丈量结果方差阐发可知，各因素对纯化结果的影响程度依次为D萃取次数B(体积比)萃取时间A溶液浓度，D萃取次数因素影响差异有明显性，飞蓟宾丈量结果直不雅阐发表白优化工艺应为A2B23D2。综合总黄酮和水飞蓟宾丈量结果方差阐发结果，萃取次数和萃取容

7、积用量对纯化结果有较大的影响，结合产业现实终极确定纯化工艺为：A3B21D2，即接纳8%浓缩液，3倍量体积的醋酸乙酯萃取2次，10in/次。2.7验证明行为了观察所选择最正确工艺的不变性,故对实在验条件举行验证,并对其举行放大实行，取水飞蓟药材300g破坏，脱脂枯燥，用10倍量90%的乙醇提取3次,1h/次，分次过滤，归并滤液，滤液减压浓缩至无醇味，加水定容至1000l，摇匀。取浓缩液250l3份，根据最正确工艺条件A3B21D2平行3次实行。结果见表6。表6纯化验证明行略由以上结果可知水飞蓟总黄酮的量和水飞蓟宾的量不变且含量均较高，优选的工艺条件不变可行。3讨论实行曾接纳固-液萃取和液-液萃

8、取两种要领对水飞蓟提取物和提取液纯化，液-液萃取法操纵更为轻便并且萃取结果更好，相对固-液萃取更为淘汰工序节省能源，同时液-液萃取法消费本领大、便于一连和宁静操纵、易于实现主动操纵等特点，使之更切合产业消费。接纳液-液萃取纯化后，萃取液浓缩至干，由于水飞蓟含有大量油脂性身分，枯燥的干膏中仍有部门油脂存在，因此接纳石油醚对枯燥提取物举行脱脂，接纳3倍量石油醚浸渍提取物静置留宿，过滤，枯燥得提取物。经石油醚处置惩罚的提取物丈量总黄酮含量更为正确。根据最正确的提取工艺举行验证放大实行，验证工艺的不变性和可行性，结果表白该工艺纯化水飞蓟总黄酮,含量较高，易于操纵，不变性好，适于产业化消费。【参考文献】1闫玉峰，于健.水飞蓟的化学身分及药理研究希望J.中国药事，2000，145：3