各论禽流感新城疫

1、禽的病毒性疾病(jbng)概述共七十五页新城疫病毒(bngd) (Newcastle disease viruses, NDV)禽流感病毒(bngd)（Avian influenza virus, AIV）马立克病病毒（ Mareks disease virus ,MDV）传染性囊病病毒（Infectious bursal disease virus, IBDV）共七十五页？共七十五页禽流感病毒(bngd)（Avian influenza virus，AIV）1901年即分离禽流感病毒，但直到1955年才明确(mngqu)它与人及哺乳动物流感的关系，20世纪70年代开始注意在水禽广泛存在的禽流

2、感病毒是流感病毒的“基因库”，并对家禽业构成潜在威胁。禽流感的高致病力毒株对鸡有致病性，旧称“真性鸡瘟”（fowl plague），现名高致病性禽流感（Highly pathogenic avian influenza, HPAI）是OIE规定的通报疫病。共七十五页病原特征致病机理(j l)诊断防控禽流感病毒(bngd)（Avian influenza virus, AIV）高致病性禽流感的病原是一种分节段的RNA病毒，属于正粘病毒科（Orthomyxoviridae），甲型流感病毒属。流感病毒的血凝素（HA）及神经氨酸酶（NA）是两个最为重要的分类指标，所有16个HA与9个NA的组合都在禽类

3、发现病毒颗粒多形性，多为球形，但新分离的多为丝状。颗粒的最小直径80-120nm，有囊膜和纤突。核衣壳螺旋形对称。共七十五页共七十五页分类(fn li)地位高致病性禽流感的病原是一种分节(fn ji)段的RNA病毒，属于正粘病毒科（Orthomyxoviridae），甲型流感病毒属。正粘病毒科有5个属 甲型流感病毒属：是马、猪、貂、海豹、鲸、禽及 人的病原 乙型流感病毒属：仅感染人 丙型流感病毒属：感染人与猪 托高土病毒属 ：以蜱为媒介的虫媒病毒，感染家畜 及人类 鲑传贫病毒属：感染鱼类的鲑传染性贫血病毒共七十五页病毒命名流感病毒的血凝素（HA）及神经氨酸酶（NA）是两个最为重要(zhngyo

4、)的分类指标甲型流感病毒：16个HA亚型 9个NA亚型共七十五页还可根据病毒的宿主(szh)、地理来源、毒株号及分离年代进一步分类命名，例如 甲型流感病毒/马/布拉格/1/56（H7N7）马流感病毒1型原型甲型流感病毒/香港/1/68（H3N2）人流感1968年大流行株共七十五页出现重要的病原H7N7及H3N8，引致马呼吸道疾病，过去称为马流感病毒1型与2型H1N1及H3N2，通常(tngchng)从猪分离H7N7及H4N5，从患呼吸道及全身疾病的海豹分离H10N4从患呼吸道病的貂分离H1N1、H2N2、H3N2以及H5N1，可能还有H3N8，引致人呼吸道疾病所有16个HA与9个NA的组合都在

5、禽类发现共七十五页病毒颗粒(kl)多形性，多为球形，但新分离的多为丝状。颗粒(kl)的最小直径80-120nm，有囊膜和纤突。核衣壳螺旋形对称。为线状负链单股RNA，大小10000-13600nt。分8个节段。每个节段的两端具有末端重复序列，所有节段的3端相同。基因组的各个节段一端形成环，由核衣壳蛋白（NP，分子量560 000）包裹。共七十五页病毒(bngd)的主要特性 NAHAM1脂质囊膜NPRNAP蛋白M2 甲型流感病毒结构模式图共七十五页RNA 1 2 3 编码(bin m) P蛋白（PA PB1 PB2）在细胞质中形成多聚酶复合体，催化RNA的合成NP :核蛋白，与RNA结合后形成核

6、酸核蛋白体再与P蛋白结合成为整个病毒粒子的核心。 共七十五页 纤突糖蛋白有两种，一种为棒状的血凝素蛋白（HA，分子量63 000），由同源三聚体组成；另一种为蘑菇状的神经氨酸酶蛋白（NA，分子量50 000) HA:HA1,HA2 HA1与细胞(xbo)表面的受体结合促进粘附；HA2与细胞膜融合促进其穿入。 NA具有唾液酸酶的活性，清除病毒颗粒表面特异性糖蛋白末端唾液酸，防止病毒自我凝集，促使病毒释放。共七十五页囊膜与基质蛋白（M1，分子量28 000）相连，M1参与病毒转运物质的过程，主要参与被感染细胞的细胞核与胞质的物质转运。另一种基质蛋白M2（分子量11 000）的四聚体插入M1，构成少

7、量的离子通道，在核内的病毒子脱离核衣壳时发挥离子通道作用(zuyng)，促使离子进入病毒粒子，解除蛋白之间的相互作用(zuyng)。共七十五页非结构蛋白(dnbi)NS1和NS2，该基因是基因组中结构最小的节段，存在于被感染的细胞的胞核和胞质中，抑制polyA结构的mRNA从细胞核内向外运输，从而抑制宿主细胞蛋白的合成。图22-5 流感病毒的吸附、穿入与脱壳（据Greber）核膜血凝素神经氨酰酶（HN）M1vRNPs胞浆膜凹窝内吞小体核孔复合物基质蛋白2（M2）基质蛋白1（M1）病毒RNA-核衣壳蛋白（vRNA-NP）共七十五页抵抗力与所有有囊膜的病毒一样，抵抗力不强。流感病毒对热、脂溶剂敏感

8、(mngn)在外环境中极不稳定共七十五页病毒(bngd)的变异甲型流感病毒变异(biny)的显著特点是HA和NA发生遗传性或抗原性漂移（genetic or antigenic drift）遗传性或抗原性转移（genetic or antigenic shift）共七十五页抗原性变异是HA和NA二者的遗传性或抗原性漂移（genetic or antigenic drift）及遗传性或抗原性转移（genetic or antigenic shift）导致的。漂移发生在某个亚型之内，是点突变的积蓄，其中和表位与未突变株稍有差异。转移则骤然获得一个全新的HA或NA基因，从而产生新的亚型，可能(knn

9、g)在全世界引致新型流感的暴发流行。 共七十五页抗原漂移和抗原转移是病毒毒力变异的基础。前者主要是指发生在病毒基因中的点突变,其中以编码HA的基因突变率最高,其次是NA。发生在不同位点上的突变对病毒的影响是不同的:HA受体结合点上的突变可能改变病毒宿主特异性,而发生在HA上糖基化位点及裂解位点的突变则可能导致(dozh)病毒发生根本性变化。此外,不同于病毒内部其他蛋白质的变异一直处于相对稳定的状态, HA和NA基因的改变则可以随时间的延长发生积累。抗原漂移的变异幅度较小,一般不引起暴发流行。后者是指,由于基因节段间的重配使病毒结构发生较大幅度的突变而导致新的毒株或新的亚型出现。这种不同毒株间基

10、因节段的重配可引起病毒基因的“质变”,当产生对其缺乏免疫力的新毒株时,将引起新的暴发流行。共七十五页毒力变异(biny)的分子基础HA是否富含碱性氨基酸。HA裂解为HA1和HA2，暴露融合肽段，通过融合进入宿主细胞，为入侵(rqn)的关键步骤。高致病力毒株HA的切割位点有多个氨基端毗连，决定该病毒可被机体大多数组织细胞的蛋白酶裂解。低致病力的裂解位点均只有一个单一的碱性氨基酸精氨酸，只能被胰蛋白酶切割，存在于消化道和呼吸道。球体表面糖基化位点（影响细胞亲和性），多聚酶复合体的作用（H5N1,NS1变化，破坏细胞内关键信号的转导通道）等。共七十五页共七十五页病毒毒力有很大差异。高致病力毒株主要有

11、H5N1和H7N7亚型的某些毒株。禽流感病毒能感染人，某些毒株甚至(shnzh)可不经过猪体混合重配再传染的过程，直接感染人。共七十五页重组(zhn z)的甲型流感在人群中三次大流行：1918年西班牙流感1957年亚洲流感1968年香港流感 人类(rnli)的感染共七十五页西班牙型流行性感冒是人类历史上最致命的传染病，在19181919年曾经造成全世界约10亿人感染，2千5百万到4千万人死亡（当时世界人口约17亿人）；其全球平均致死率约为2.5%-5%，和一般流感的0.1%比较起来(q li)较为致命。其名字的由来并不是因为此流感从西班牙爆发；而是因为当时西班牙有约8百万人感染了此病，甚至连西

12、班牙国王也感染了此病，所以被称为西班牙型流行性感冒。至于在西班牙则称此为法国型流行性感冒。 共七十五页 流感(li n)期間 Camp Funston 的緊急軍事醫院。共七十五页共七十五页国外学者认为，在中国南部生活着密集的人群及养殖大量的猪和鸭，彼此密切接触提供了上述的机遇。其实除华南之外，东南亚也具有类似情况，2004年禽流感在该地区的广泛流行(lixng)，似可为佐证。共七十五页野生水禽(shu qn)是禽流感病毒的基因库共七十五页1997年8月，首次证明H5N1可不经猪作为(zuwi)中介直接传染人的病例，是香港一名与宠物鸡密切接触的儿童。患者死亡，分离到H5N1当年在香港总共18个人

13、的病例，6人死亡人类(rnli)感染禽流感共七十五页共七十五页1999年至2003年在香港发现H9N2也可由禽直接传染人， 3名幼童发生了轻微病症2003年荷兰(h ln)发生H7N7引致的HAPI，造成一名兽医死亡，83人感染患结膜炎和其它轻度疾病2004年1月HPAI在东南亚暴发流行，日本、韩国、我国台湾及大陆也有发生。在东南亚发现由禽传染人的病例，越南最为严重，引致至少21死亡共七十五页截至2006年1月10日，已证实全世界感染51型禽流感病毒的患者达146人，其中有76人死亡。出现(chxin)这些病例的国家有越南、泰国、柬埔寨、中国、印尼和土耳其。其中越南的疫情最为严重，有93人感染

14、禽流感，其中42人死亡。至06年3月15日，中国15人感染禽流感，其中10人死亡。共七十五页共七十五页共七十五页共七十五页诊 断分离(fnl)病毒一般从泄殖腔或采样，接种8-10日龄鸡胚尿囊腔，取尿囊液用鸡红细胞作HA-HI、ELISA或RT-PCR等 共七十五页图3426-1 鸡胚接种途径示意图（据Flint等）鸡胚共七十五页共七十五页OIE规定的高致病性毒株的标准为： 将含病毒的鸡胚尿囊液原液用灭菌生理盐水作110稀释，静脉内接种48周龄SPF鸡8只，每只0.2ml，隔离饲养(syng)观察10d，死亡6只者，判定为HPAI共七十五页鉴于(jiny)H5及H7亚型毒力易于变强的特点，国际禽

15、病专家已于2003年建议OIE修改上述HPAI病毒的判定标准，取而代之的是，将H5及H7亚型的所有毒株一概划归为HPAI的范畴，不再作鸡胚接种测定毒力共七十五页高致病性禽流感诊断技术Diagnostic techniques for highly pathogenic avian influenzaGB/T 18936-2003禽流感病毒通过荧光RT-PCR检测方法Method of the real-time RT-PCR for the detection of avian influenza virusGB/T 19438.1-2004H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法Metho

16、d of the real-time RT-PCR for the detection of avian influenza virus subtype H5GB/T 19438.2-2004H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法Method of the real-time RT-PCR for the detection of avian influenza virus subtype H7GB/T 19438.3-2004H9亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法Method of the real-time RT-PCR for the detection of avian inf

17、luenza virus subtype H9GB/T 19438.4-2004H5亚型禽流感病毒荧光NASBA检测方法Protocol of detection avian influenza virus subtype H5 using NASBA GB/T 19439-2004禽流感病毒荧光NASBA检测方法Protocol of detection avian influenza virus using NASBA GB/T 19440-2004进出境禽鸟及其产品高致病性禽流感检疫规范Quarantine requirement of entry-exit avian and its

18、products for highly pathogenic vian influenzaGB 19441-2004共七十五页预防(yfng)与控制 我国农业部规定对患HPAI的病鸡和疫点周围3km范围内所有禽类要全部扑杀，对于带有HPAI病毒(bngd)的禽类及同群禽要全部扑杀，禽类尸体和产品的无害化处理对于HPAI疫区周围5km范围内，所有禽类按照规定的标准进行强制免疫对于HPAI疫区周围10km范围内禁止活禽交易共七十五页OIE法典（2002）规定：HPAI的潜伏期为21d某一区域在最后一例HPAI病例确诊实施扑杀政策和消毒措施，并至少过去21d，或不采取扑杀政策时，最后一例感染动物(d

19、ngw)临床康复或死亡6个月后，可视为非HPAI疫区某一国家至少在过去3年内未发生过HPAI，可视为无HPAI国家；如采取扑杀政策，不论是否实施HPAI疫苗接种，期限为最后一例感染动物扑杀后6个月，可视为无HPAI国家共七十五页禽流感的预防(yfng) 目前已经研制出H9N2和H5N2亚型的禽流感灭活疫苗，5-7日龄进行初次免疫，颈部皮下注射0.3ml/只，20日龄以后加强免疫，肉鸡至出栏可确保安全。蛋鸡120日龄左右加强免疫，可保护整个产蛋期。 其他还有各类的基因工程疫苗，但均处于研制阶段。共七十五页禽流感的治疗 禽流感特别是高致病力禽流感目前还没有特异的治疗方法，因此，在该病的流行过程中，

20、不主张治疗。 目前用来治疗的药物有金刚烷胺、金刚乙胺，但他们是人医上用于治疗流感的常用药物，兽医(shuy)滥用后病毒易对其产生耐药性，且畜禽产品中的残留容易进入人体，因此该药不应轻易作为兽药，且兽医(shuy)上还没有批准该药。其作用的具体机理尚不清楚。共七十五页对低致病力禽流感的治疗，应注意以下几点：该病没有特效药物，使用(shyng)的药物均为对症治疗。使用药物要与改善畜禽的饲养管理相结合。任何药物的使用，必须遵照国家的兽药管理的有关规定。共七十五页重点(zhngdin)回顾正粘病毒科,基因组为线状负链单股RNA,八个节段血凝素（HA）及神经氨酸酶（NA）是两个最为重要的分类指标抗原漂移

21、(pio y)和抗原转移H5及H7亚型的所有毒株一概划归为HPAI共七十五页新城疫病毒(bngd)共七十五页即”鸡瘟(jwn)”的病原，副粘病毒科新城疫病毒(bngd) (Newcastle disease viruses, NDV)病原特征致病机理诊断防控有囊膜及纤突病毒颗粒多形性，可呈丝状基因组为单分子负链单股RNA纤突具有两种糖蛋白：血凝素神经氨酸酶（HN）及融合蛋白（F）。无毒株的HN及F为无活性的前体，有毒株的这些前体可被组织内的蛋白酶切割并活化。共七十五页病史(bn sh)ND 1926年首次暴发于印度尼西亚的Java 次年在英国的Newcastle爆发。经证明，新城疫与欧洲鸡瘟（

22、禽流感病毒）病原不同，为与鸡瘟区别，根据该病发生地名命名为“新城疫”.首次确诊以来的八十多年里，世界范围(fnwi)内曾发生过四次NDV大规模的流行。首次大流行源于上世纪二十年代的东南亚和英国共七十五页共七十五页共七十五页自然条件下，NDV主要通过呼吸道、眼结膜及消化道侵入宿主。病毒首先(shuxin)在呼吸道及肠道粘膜上皮复制，借助血流扩散到脾及骨髓，产生二次病毒血症，从而感染肺、肠及中枢神经系统。F和HN两种糖蛋白是NDV致病的分子基础（特别是F蛋白(dnbi)）。即HN蛋白通过识别，吸附于细胞表面的受体来参与病毒粒子感染，而F蛋白则通过融合多肽，穿入细胞膜而发挥致病作用。病毒只有在具有嗜

23、性的感染组织才能裂解活化和扩散。致病机理P基因是副粘病毒唯一能够编码多蛋白的基因。P基因重叠的ORFs通过“RNA编辑”的方式编码第二种蛋白V蛋白。IFN信号抑制、阻止凋亡、细胞周期改变、抑制双链RNA信号以及阻止IFN合成，都与副粘病毒V蛋白有关共七十五页新城疫后期出现神经症状,且并发(bngf)鼻炎发病后出现(chxin)大量白皮蛋共七十五页诊断(zhndun)必须作病毒分离及血清学试验或RT-PCR。可取脾、脑或肺匀浆，接种10日龄鸡胚尿囊腔分离病毒，病毒能凝集鸡、人及小鼠等红细胞，再作血吸附及HI试验鉴别。当存在循环抗体时，可从肠道分离病毒。抗体检测只适用于对未进行免疫接种鸡群的诊断，

24、可用HI试验。在慢性新城疫流行的地区，可用HI试验作为监测手段。分离株有必要(byo)进一步测定其毒力。共七十五页防控免疫通常采用由天然弱毒株筛选制备的活疫苗及弱毒或强毒株的油乳剂灭活苗。弱毒苗可采用饮水、气雾、滴眼或滴鼻途径。免疫后约一周可产生免疫保护，产蛋母鸡应每4个月免疫一次。实际生产中，弱毒苗与灭活疫苗配合使用(shyng)，方能收到较好的免疫效果。由于鸡在免疫接种后15d仍能排出疫苗毒，因此有些国家规定鸡在免疫接种21d后才可调运。共七十五页活苗死苗多联苗多价苗共七十五页马立克病病毒(bngd)（Mareks disease virus） 病毒是细胞结合性疱疹病毒，靶细胞为T淋巴细胞

25、,具有致肿瘤(zhngli)特性。病原特征致病机理诊断防控疱疹病毒科的B亚群疱疹病毒，双股DNA，有囊膜。共七十五页病毒对鸡及鹌鹑有致病性，其它禽类无致病意义。4周龄雏鸡即可感染发病，25月龄高发，致病的严重程度与病毒毒株的毒力、鸡的日龄、性别、免疫(miny)状况及遗传品系有关。隐性感染鸡可终生带毒并排毒，其羽囊角化层的上皮细胞含有病毒，是污染源，易感鸡通过吸入此种毛屑感染。共七十五页共七十五页脾脏(pzng)病变，肿大 肿瘤(zhngli)共七十五页共七十五页Left - normal chicken eye. Right - Eye of a chicken 眼型可见虹膜增生，瞳孔(tn

26、gkng)变小，边缘不整共七十五页诊断(zhndun)免疫荧光试验等血清学方法可检出病毒。病毒分离可用全血白细胞(xbo)层接种细胞(xbo)，或接种4日龄鸡胚卵黄囊或绒尿膜，再作荧光抗体染色或电镜检查作出诊断。禽白血病病毒往往与本病毒同时存在，要注意鉴别。PCR检测共七十五页防控由于HVT(火鸡疱疹病毒冻干苗 )与本病毒95%DNA同源，常用作疫苗进行(jnxng)预防接种。某些天然无致病力毒株也筛选为疫苗，但需液氮保存，使用不便。常规方法是对1日龄雏鸡进行免疫接种，试行18日龄的鸡胚卵内接种有良效。对鸡群除采取全进全出的管理体制外，抗病育种也是措施之一。共七十五页传染性囊病病毒(bngd)

27、（Infectious bursal disease virus, IBDV） 病原特征(tzhng)致病机理诊断防控又名传染性法氏囊病病毒。全世界均有发现，很少鸡群能保持无病毒状态。双RNA病毒科,无囊膜，有一层外壳，20面体对称病毒对热 (6030min)稳定，在pH39、经乙醚或氯仿处理均不丧失其传染性。病毒的复制对细胞的RNA及蛋白质的合成无明显影响。病毒在胞浆组装并蓄积。病毒颗粒如何释放尚不清楚.共七十五页致病机理(j l)病毒感染后在肠道的巨噬细胞及淋巴细胞中复制，进入部分循环系统，导致初次病毒血症。在感染后11h，在腔上囊（简称囊）淋巴细胞中检测到病毒抗原。此时大量的病毒从囊释放，导致二次病毒血症，并在其他组织(zzh)中定位。