LC3000液相色谱仪操作规程

1、LC3000液相色谱仪操作规程1、首先将色谱仪电源打开，让仪器进行预热。2、进行样品前处理，以及流动相进行过滤和脱气，过滤流动相时使用溶剂过滤器，有机试剂使用有机膜，水使用水系膜。过滤完后对其进行脱气处理。注意脱气处理大概需要15-20分钟左右。3、甲醇处理完后将其接入液路，然后将P3000泵的放空阀打开，并启动泵让甲醇充满液路，并保证没有汽泡，然后关闭放空阀。也可借助外力（使用洗耳球或注射器）在放空阀处将液体吸过来再启动泵，这样可以省时间。走30分钟，停止泵，等待泵没有压力。换10%甲醇水冲洗30分钟以上。停泵，等待压力降至0左右。换流动相冲洗，查看管路中有无气泡，保证没有汽泡的情况下，启动

2、泵。4、双击CXTH-3000色谱工作站点击CXTH-3000（中文版）出现提示，关闭即可；出现色谱数据处理及仪器控制面板界面。5、在色谱数据处理及仪器控制面板界面中设置所分析样品的色谱条件，如果使用单泵操作时，先确定所用泵是A泵还是B泵。点开时间程序中查看有无打,如果有；去掉为。6、设置参数：6.1在基本控制栏中设置波长（nm) ,然后点击！确认。时间常数、量程切换都为2.切记开灯不要点。6.2设定流速（ml/min): 后点击！确认。6.3设定最小压力为0，最大压力为35，如果数据已经符合，就不要改动。6.4确定管路有无气泡，如果没有气泡，点击电脑上的第一个绿色图标（启动图标） 7、做样品

3、之前，保证仪器先用色谱甲醇走30分钟，采集基线。把满屏量程改至100，其他参数不变。查看基线走直后，停止采集，进样。 8、如果分析的样品流动相中含有酸、盐，必须用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水过渡40分钟左右。即先用色谱纯甲醇走基线30min，停止泵，换上甲醇水走基线40min,再停止泵，更换为流动相。 注意：没走一步都要先确认管路中有无气泡后，才能启动泵。等待流动相基线走直后方可进样，所进样品必须用0.45m有机系滤头过滤。进样之前，需手动停止泵（点击停止采集红色图标），待变成绿色的图标后，把进样阀扳到LOAD状态，样品匀速推进后，迅速扳下进样阀（INJECT).自动采集数据

4、。等待图谱出完后，基线走直。停止，保存图谱。以此类推进样。样品分析结束后，先停止泵，换甲醇水货甲醇冲洗仪器，冲至所做样品前的压力，即可停止泵，关机。梯度程序操作：12.1打开梯度混合器；12.2在打开的工作站中的仪器控制面板中，点击时间程序，打开后，在运行时不使用基本控制中的参数，而使用本页的程序前打，总运行时间不变。12.3设定参数; 时间 流速（ml/min) A B C D 波长(nm) 归零 量程 0 1.00 50 50 0 0 按标准 是 212.4设置好后，点击第一绿色图标采集基线，泵即可启动，走30min后，按停所有泵。换上甲醇水或流动相。12.5如果分析的样品流动相中含有酸、

5、盐，必须用甲醇：水（10:90）及（20:80）的甲醇水过渡40分钟左右。即先用色谱纯甲醇走基线30min，停止泵，换上甲醇水走基线40min,再停止泵，更换为流动相。12.6设置所分析样品的梯度条件（按照GB标准），设置好后点仪器控制面板中文件，另存设置。即可保存梯度条件。如果已存的梯度条件，可打开仪器控制面板中文件，引进设置，即可。12.7条件设置好后，点击采集基线即可，启动泵。把满屏量程改至100。查看基线，基线走直后，进样。12.8进样前，先按停止采集（红色图标），变为绿色后，把过滤好的样品进入液相色谱（由LOAD状态，进样后，迅速扳下，到INJECT状态）自动采集图谱。12.9等待图

6、谱出完后，基线走直，停止采集（点击红色图谱），保存图谱，进入第二针，以此类推。12.10样品分析完后，冲洗仪器同上（先用甲醇水冲洗40min后，最后用甲醇冲洗至做样前的压力即可。停所有泵，关机。谱图处理：13.1做标准曲线：13.1.1先打开已经做好的谱图，从低浓度到高浓度依次处理。比如先将8mg/l的图谱调查点文件项点打开找所存位置的8mg/l的图谱打开输入最小峰面积点击黄色图标再处理（如有处理不掉的峰，点击对已检测出的峰进行手工取消成恢复）点击定量计算后点击定量组分（自动填全部套峰时间），填写组分名称、浓度后点击定量方法，选择计算校正因子（标准样品）后点击定量计算后点击定量结果中当前表存档

7、，提示入档成功，档中现有1档数据，点击确定。13.1.2以此类推其它浓度，都存档成功后点击定量方法点工作曲线，点击计算后，点击显示。查看标准曲线是否合格。如合格，点击文件存为模板，即可。13.2样品处理：13.2.1调出样品色谱图，输入最小峰面积点黄色图标再处理如有处理不掉的峰，点击对已检测的峰进行手工取消或恢复点击定量计算后点击定量组分（自动填全部套峰时间），填写组分名称调出曲线点定量方法，选择多点校正（基于工作曲线）后点击定量计算后点击定量结果，查看样品浓度即可。代入公式计算。13.2.2如果不需要标准曲线的，直接打开色谱图，鼠标应在峰中间，右击后点击峰尺寸，点看峰面积，代入公式计算。注意

8、事项：将色谱工作站CXTH-3000打开，将各项参数设置好（因为本工作是可以反控仪器的，因此仪器的常规操作是可以在工作站上完成的），然后点击采集基线按扭，这时可以看如果基线比较平直了，就可以停止采集基线，这时可以将待测的样品打到进样阀里，（样品必须用0.45um滤头过滤，过滤后方可进样）。并将进样阀的手柄扳至LOAD位置，把过滤好的标样用进样针匀速推进，扳到INJECT位置。因为有进样阀有触发线连接工作站，所以扳阀的同时色谱工作站已经进行谱图采集的操作了。等待图谱出完后，按红色的图标进行手动停止，保存图谱。在以此类推进样。采样结束后可以对谱图及定量结果进行相关操作，并得出结果。如果需要打印可以将谱图数据进行打印。实验结束后，还需要用纯甲醇对整个液中进行冲洗，也就是将流动更换成纯甲醇，检查管路中有无气泡。如有气泡，排气。无气泡直接启动泵，运行30分钟左右。如果实验过程中流动相配制中含有