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文档简介
1、学习好资料 欢迎下载一、名词解释 1、 基因:编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列(对以 RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是 RNA序列)。2、 基因组:是细胞或生物体中,一套完整的单倍体的遗传物质的总和。泛指一 种生物体具有的遗传信息的总和。3、 转座元件( transposable element 之间移动的 DNA片段或基因。):是指能够在 DNA分子内部或 DNA分子4、 转座(transposion ):转座元件从基因组的一个部位直接转移到另一个部位 的过程。可引起基因组重排、基因突变、表型变化等。5、 假基因( Pseud
2、ogene):指与某些有功能的基因结构相似,但不能表达基因 产物的基因。又称为加工基因或非功能基因。6、 不对称转录 Asymmetric transcription:DNA链是有极性的, RNA以不对称的方式与启动子结合,使得转录只能沿着一个方向进行。对一个基因而言,互补链中只有一条链被转录成 RNA. 7、 断裂基因 (split gene) :真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互 相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基 酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。8、 外显子 (exon) :真核生物编码序列中出现在成熟 的遗传信息参与指定蛋白质的氨基酸
3、排列。RNA分子中的序列,所携带9、 内含子 (intron):真核生物细胞编码序列中的间插序列。这些序列被转录在前体 RNA中,经过剪接被去除,最终不存在于成熟RNA分子中。10、管家基因 (housekeeping gene):某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达,通常被称为管家基因。11、 第二信使( second messenger):配体与受体结合后并不直接进入靶细胞内,但间接激活细胞内其他可扩散、 并能调节信号转导蛋白活性的小分子或离子,如 cAMP、ca 2+等。12、G蛋白循环:G蛋白偶联型受体的信号转导途径中的第一个信号传递分子是 G蛋白,其活化过程称为 G蛋白循环,存
4、在有活性和无活性两种状态。13、受体:细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而引起生物学效应的特殊蛋白质,个别是糖脂。14、信号肽 (signal peptide):是未成熟分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列。 有碱性 N-末端区,疏水核心区及加工区三个区段。15、顺式作用元件 (cis-acting element):可影响自身基因表达活性的DNA序列 . 包括启动子、增强子、终止子、沉默子、隔离子16、反式作用因子 (trans-acting factor):由某一基因表达产生的蛋白质因子,通过与另一基因的特异的顺式作用元件相互作用,调节其表达。这种蛋白质因
5、子称为反式作用因子。17、Western blot:蛋白质免疫印迹法,是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或 PVDF 膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术 . 18、PCR:聚合酶链式反应, 是一种用于扩增特定的 DNA片段的分子生物学技术,利用一对特异性的引物,在耐热 DNA聚合酶的催化下,经过变形- 退火 -延伸,循环往复进行,使目的基因达到指数倍增的效果学习好资料 欢迎下载19、Co-IP:免疫共沉淀, 是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内相互作用的有效方法。20、基因工程:在
6、体外对不同生物的基因进行剪切、重组、连接,然后插入到载体分子中(细菌质粒、病毒或噬菌体DNA),后转入微生物、植物或动物细胞内进行无性繁殖,并表达出基因产物。21、限制性内切酶:能够识别DNA的特异序列 , 并在识别位点或其周围切割双链 DNA的一类内切酶。22、基因诊断:利用分子生物学技术,通过检测基因及基因表达产物的存在状态,对人体疾病作出诊断的方法。基因诊断检测的目标分子是 DNA、RNA,也可以是蛋白质或者多肽。23、基因治疗:指将目的基因通过基因转移技术(病毒载体介导或者非病毒载体介导的基因转移技术)导入靶细胞内,目的基因表达产物对疾病起治疗作用。二、问答:1. 病毒基因组有哪些特点
7、?不同病毒基因组大小相差较大;由 DNA或 RNA组成;病毒基因组有连续的也有不连续的;病毒基因组的大部分是编码序列(90%),非编码序列通常为调控序列;绝大多数为单倍体基因组(逆转录病毒基因组除外);基因有连续的和间断的;功能相关的蛋白质基因丛集;有基因重叠现象。2. 原核生物基因组有哪些特点?1、通常由环状双链 DNA分子组成 2、只有一个复制起始点 3、操纵子结构普遍 4、基因密度高,编码区在基因组中所占比例大(50%)5、基因组中重复序列很少 6、非编码区内主要是一些调控序列 7、存在可移动成分产生转座现象3. 简述乳糖操纵子的负调控机制。乳糖操纵子是由调节基因、启动子、操纵基因和结构
8、基因组成的。lacI编码阻遏蛋白。阻遏蛋白的负性调控: 当培养基中没有乳糖时, 阻遏蛋白结合到操纵子中的操纵基因上, 阻止了结构基因的表达; 当培养基中有乳糖时, 乳糖分子和阻 遏蛋白结合, 引起阻遏蛋白构象改变, 不能结合到操纵基因上, 使 RNA聚合酶能正常催化转录操纵子上的结构基因,即操纵子被诱导表达。学习好资料 欢迎下载4. 简述受体与配体结合的特点(1)有高度专一性:受体选择性地与特定配体结合,这是由分子的几何形状决定的,两者的结合通过反应基团的定位和分子构象的相互契合而实现。(2)有高度亲和力(3)可饱和性:增加配体至一定浓度,可使受体饱和。(4)可逆性:受体与配体以非共价键结合,
9、当生物效应发生后, 配体与受体解离。(5)特定的作用模式 受体在细胞内的分布有组织特异性, 有特定的作用模式,受体与配体结合后,能引起特定的生理效应。5. 简述 AC-cAMP-蛋白激酶 A信号转导通路组成:胞外因子、受体、G蛋白、 AC、cAMP、PKA 信号分子与受体结合,引起受体构象改变,受体活化G 蛋白,活化后的 G 蛋白激活 AC,AC催化 ATP生成 cAMP,导致细胞内 cAMP浓度增高,激活 PKA,使目标 蛋白或酶磷酸化,从而调控酶的活性或基因表达,产生生物学效应。6. 简述 PLC-IP3/DAG-PKC信号转导通路 信号分子与受体结合, 引起受体构象变化, 受体活化 G
10、蛋白,活化后的 G 蛋白 激活 PLC,PLC 水解 PIP2 生成 IP3 和 DG,IP3 使钙通道打开,细胞内 Ca2+ 升高, Ca2+与 CaM 结合,激活 Ca2+-CaM 依赖的蛋白激酶,后者使目标蛋白磷 酸化,在 Ca2+等的参与下, DG激活 PKC,使蛋白质和酶磷酸化,产生生物学效 应。7. 简要说明五种 RNA的功能。核糖体 RNA(rRNA):负责蛋白质的合成 信使 RNA(mRNA):蛋白合成的模版转运 RNA(tRNA):转运蛋白合成所需要的氨基酸、识别mRNA遗传密码微小 RNA( miRNA):表达具有组织特异性和阶段特异性,在调控发育、疾病过程中有重要作用 小
11、干扰 RNA(siRNA):触发 RNA干扰 , 降解 mRNA,基因沉默。学习好资料 欢迎下载8、研究蛋白 - 蛋白、蛋白 DNA互作的方法有哪些?原理是什么?蛋白 - 蛋白互作:1、酵母双杂交系统:是将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的 DNA结合结构域基因和转录激活因子(如GAL4等)激活结构域基因, 构建成融合表达载体, 从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。2、Co-IP(免疫共沉淀)免疫共沉淀,是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。用的有效方法。蛋白 -DNA互作:是确定两种蛋白质在完整细胞内相互作CHIP染色质免疫共沉淀 在活细胞状态下固定蛋白质DNA复合物, 并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段, 然后通过免疫学方法沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的 DNA片段,从而获得蛋白质与 DNA相互作用的信息。9、简述 PCR技术的原理及步骤,并分析PCR技术的影响因素。原理:PCR即聚合酶链式反应,是一种用于扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,利用一对特异性的引物, 在耐热 DNA聚合酶的催化下, 经过变形 - 退火 - 延伸,循环往复进行,使目的基因达到指数倍增的效果。步骤:PCR由变性 - 退火- 延伸三个基本反应步骤构成
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