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文档简介

1、DNA重组技术的基本工具基因工程实例1.基因工程的优点；2.基因工程成功的基础；3.基因工程的原理；4.基因工程的三种工具的作用及特点。 指按照人们的愿望,进行严格的设计并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作DNA重组技术或基因拼接技术。基因工程的概念别名 操作环境操作对象操作水平基本过程原理基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切拼接导入表达基因重组实例：基因工程培育抗虫棉的简要过程抗虫棉的培育有哪些关键步骤？苏云金芽孢杆菌提取抗虫基因普通棉花(无

2、抗虫特性)棉花细胞(含抗虫基因)与载体拼接，导入棉花植株(有抗虫特性)表达解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体。“分子手术刀” 来源主要从原核生物中分离纯化而来种类EcoRSam本质蛋白质特点识别特定序列、切割特定位点切割结果黏性末端平末端黏性末端黏性末端EcoR一、限制性核酸内切酶来源主要从原核生物中分离纯化而来种类EcoRSam本质蛋白质特点识别特定序列、切割特定位点切割结果黏性末端平末端Sma平末端平末端“分子手术刀” 一、限制性核酸内切酶中心轴线处中心轴线两侧来源主要从原核生物中分离纯化而来种类EcoRSam本质蛋白质特点识别特定序列、切割特定位点

3、切割结果黏性末端平末端“分子手术刀” 一、限制性核酸内切酶二、DNA连接酶EcoliDNA连接酶大肠杆菌连接黏性末端T4DNA连接酶T4噬菌体连接黏性末端或平末端功能将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。用同种限制酶切割DNA连接酶“分子缝合针”DNA聚合酶和DNA连接酶的比较DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链连接部位双链在两DNA片断之间形成磷酸二脂键单链将单个核苷酸加到已存在的核酸片断3末端形成磷酸二脂键三、基因进入受体细胞的载体功能将目的基因转移到受体细胞使目的基因在受体细胞内进行大量复制条件在宿主细胞内大量复制并稳定存在具有一个至多个限制酶切割位点，以供外源DNA片段插入具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择种类质粒噬菌体衍生物动植物病毒去向留在宿主细胞中进行复制整合到受体细胞的染色体的DNA上，并随染色体DNA进行同步复制“分子运输车”2、能否用SARS病毒作为基因载体？3、作为载体，若没有切割位点将怎样？4、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞，如何鉴定？5、假如目的基因导入受体细胞后不能复制，将怎样？1、从化学组成来看，载体应含有什么成分？双链DNA不能不能进行DNA的重组载体上应有标记基因可能造成基因丢失基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的

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