动物细胞融合和单克隆抗体(2)

1、关于动物细胞融合与单克隆抗体 (2)第一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交第二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月问题：什么是动物细胞融合？它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同？ （一）动物细胞融合第三张，PPT共二十八页，创作于2022年6月1、什么是抗体？单克隆抗体的制备回顾2、抗体的分布？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。主要分布在血清中。第四张，PPT共二十八页，创作于2022年6月第五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月抗

2、体的传统生产方法该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。第六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月第七张，PPT共二十八页，创作于2022年6月 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念什么是克隆？“克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。第八张，PPT共二十八页，创作于2022年6月实验目的:制备单克隆

3、抗体.实验原理：实验过程：1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验第九张，PPT共二十八页，创作于2022年6月单克隆抗体的制备 请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 第十张，PPT共二十八页，创作于2022年6月第十一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月单克隆抗体的突出优点：特异性强、灵敏度高、纯度高、产量大容易标化生产 克隆单个杂交瘤细胞，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。 原理：细胞膜的流动性、细胞增殖第十二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月单克隆抗体的应用诊断试剂最广泛应用准确、高效、简易、快速第十三张，PPT共二十八页，

4、创作于2022年6月运载药物 (“生物导弹” 单抗导向，药物为弹头)治疗疾病第十四张，PPT共二十八页，创作于2022年6月细胞膜的流动性、细胞的全能性膜的流动性、细胞增殖酶解法去壁小鼠免疫处理、细胞分散物理法化学法物理、化学、生物法原生质体的制备融合亲本细胞的准备原生质体的融合与筛选动物细胞融合与两次筛选杂种细胞的形成与培养产特定抗体的杂交瘤细胞培养杂种植株的鉴定单克隆抗体的分离提纯单抗有助于疾病的诊断、治疗、预防 获得具优良性状的杂种植株第十五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月1、单克隆抗体制备过程中使用的骨髓瘤细胞是一种缺陷型细胞，在含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基（HA

5、T）中无法生长；而小鼠脾细胞是正常细胞，在HAT培养基上可正常存活。用聚乙二醇诱导细胞融合后，经过数代培养，最终可在HAT培养基上存活并能产生单克隆抗体的细胞是 （ ）A骨髓瘤细胞之间形成的融合细胞 B脾细胞之间形成的融合细胞C骨髓瘤细胞与脾细胞之间形成的融合细胞 D脾细胞第十六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月2研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（ ）A利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞B以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞C抗癌物质在克隆细胞中大量合成D单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合3科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融

6、合的是 （ ）A经过免疫的B淋巴细胞 B不经过免疫的T淋巴细胞C经过免疫的T淋巴细胞 D不经过免疫的B淋巴细胞第十七张，PPT共二十八页，创作于2022年6月5.实际操作中如何经过两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞？ 第十八张，PPT共二十八页，创作于2022年6月有限稀释法稀释多次稀释将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。常用的方法有：酶联免疫吸附试验和免疫荧光测定。第十九张，PPT共二十八页，创作于2022年6月单克隆抗体与多克隆抗体第二十张，PPT共二十八页，创作于2022年6月提示1：对一种效应B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？问题：如何大量生产

7、单克隆抗体？单克隆抗体的制备第二十一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1抗原-抗体杂交法克隆化单克隆抗体 筛选21.注射抗原的目的是什么？第二十二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1抗原-抗体杂交法克隆化单克隆抗体 筛选22.诱导细胞融合的手段有哪些？第二十三张，PPT共二十八页，创作于2022年6月注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞选择性培养基 筛选1抗原-抗体杂交法克隆化单克隆抗体 筛选23.若细胞两两融合后，有几种融合情况？第二十四张，PP

8、T共二十八页，创作于2022年6月4.单克隆抗体制备过程步骤第二十五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月效应B细胞B淋巴细胞注射抗原骨髓瘤细胞融合B-B细胞杂交瘤细胞瘤-瘤细胞选择性培养基 筛选1多种杂交瘤细胞符合要求的杂交瘤细胞抗原-抗体杂交法 筛选2克隆化体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体杂交瘤细胞特点：既可以产生特异性抗体，又可以大量增殖第二十六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念单: 单个细胞 克隆: 无性繁殖单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体什么是克隆？