2014年高考生物黄金易错点专题汇编：专题20 基因工程细胞的分子组成

1、第 页共24页专题20基因工程K易貓須!EL步步为下列叙述符合基因工程概念的是()B(淋巴)细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B(淋巴)细胞中的抗体基因将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上根据基因工程的有关知识，回答下列问题：限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有和(2)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下:AATTCGGCTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另种限制

2、性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。反转录作用的模板是，产物是。若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。3一生物分子间特异性结合的性质厂泛用于生命科学研究.胡下实例齿体外处理“蛋白质-DNA复合体获得DNA片段信息的过程图-ATGCTTC-_TACGAAQ_据图回答：过程酶作用的部位键，此过程只发生在非结合区DNA，过程酶作用的部位是键。两过程利用了酶的特性。若将得到的DNA片段用于构建重

3、组质粒，需要将过程的测序结果与酶的识别序列进行比对，以确定选用何种酶。如果复合体中的蛋白质为RNA聚合酶，则其识别、结合的DNA序列区为基因的以下研究利用了生物分子间特异性结合性质的有(多选)。分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提取rRNA用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体基因定位将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟斗一下表中列出了几种限制88限制性核酸內切酶)识别序列及其切剧位点，图图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点谙回答下列间题：及汨尺1目的因BamHlHindm识

4、别序CKATCCAgcttGAATTCCCCGGG列及切CCTAGGTTCGAActiaagGGGCCC割也点|t+I4一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有个游离的磷酸基团。若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaI切割，原因是与只使用EcoRI相比较，使用BamHI和HindIII两种限制酶同时处理质粒和外源TOC o 1-5 h zDNA的优点在于可以防止。为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因

5、，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。录北极比目鱼中有抗拣基因，其编码的抗拣蛋白具有11牛氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强-下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是()愈伤过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()用

6、限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体将重组DNA分子导入烟草原生质体用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。进行转基因操作前，需用酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的和之间。采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2+、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、第 页共24页第4页共24页和。利用生物反应器

7、培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。回答有关基因工程的问题：构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生(相同、不同)黏性末端的限制酶。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂

8、交技术称为。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成，常用抗原抗体杂交技术。如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的上。人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。离血压相転4卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠_中获取。图中的高血压相关基因作为，质粒作为，二者需用切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有有关。子代大鼠如果和，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用

9、其建立高血压转基因动物模型。在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是、早期胚胎培养和胚胎移植。10.转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstI、SmaI、EcoRI、ApaI等四种限制酶切割位点。请回答：內coRI国的DNA=抗病嗣PslISmaIcuRIApal构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶，对进行切割。培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有，作为标记基因。香蕉组织细胞具有，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞

10、的【解析】选BoA项属于动物细胞工程的內容；C项属于徴生物发酵工程的內容Q项自然状态下的噬菌体侵染细菌后的D負整合，不是人工操作的-【解析】1当限制性內切酶在它识别序列的中心轴线两侧将DH的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制性內切酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是平末端-言为使运载体与目的基因相连，不同的限制性內切酶应该切出相同的黏性末端口：3)DXA连接酶根据其来源的不同分两两类，一类是从犬肠杆菌中分离得到的，称为EDXA连接酶，另一粪是从T4噬菌体中分离出来的，称为HDS连接酶.4反转录是指以Z为模板在逆转录酶的作用下合戚DXA的过程，可以在体外短时间內犬量扩増DXA的技

11、术叫PC艮多聚酶琏式反应基因工程中可収作两运载悴的除质粒外，还有噬菌郎的衍生物、动植物病毒等口犬肠杆菌细胞有细胞壁和细胞膜，能阻止质粒外源DH等物质的进入，只能通过-处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DXA分子的生理狀态这种细胞称为感受态细胞才能作为受体细胞-答案：1)黏性末端平末端切割产生的DNA片段末端与5I切割产生的相同EcallT4nNA或RKA)cDXAf或DXA)PCR噬菌体的衍生物动植物病羞泊未处理的犬肠杆菌吸收质粒外源的能力极弱【解析】心?；為酶作用于Dh分子后，若将分子切割戚片段，应作用于磷酸二酯键，蛋白65作用于蛋白质中的肮薩-酶的作用特点杲貝有专一性-港若用Dh片段构建

12、重组质粒，需要与限制性核酸內切酶切割的识别序列进行比对，选用切割石茯得的相同片段所对应的限制性核酸內切酶进行切割-4)ECA聚合酶特定结合启动子中EN為聚合酶结合位点-口)蛋白酶特定处理蛋白质，DT壷分子杂交和n-A基因的互补都体现了碱基互补配对原则-答案：1)磷酸二酯眛垃)专_性耳限制性核酸內切冷)启动子或转录起始冈)A.C-.D【解析】本题若查基因工程中限制酶的作用特点.1质粒切割前是双链环ttdxa分子，所有磷酸基团参与形戚磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团-从图1可以看出，质粒上只含有一个帥皿I的切点，因此被该酶切割后，质粒变为线性收琏DNA分子，因每条琏上禽有一个游离的磷酸基团，因此切

13、割后含有两个游离的磷酸基团-由题目可知，沁I识别的DH序列中只有G和C,而G和C之间可以形戚三个氢键，壷和T之间可以形戚两牛氢键，所乩沁I酶切位点越多，热稳定性就越高口汩质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图丄可知，标记基因和外源DXA目的基因中均含有.助皿I酶切位点，都可以被SmaI破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA。4；若只使用氐虑I,则质粒和目的基因两端的黏性末端相同，用连接酶连接时，会产生质粒和目的基因自身的连接产物，而利用I和耳加III剪切时，质粒和目的基因两端的黏性末端不同，用DXA连接酶连接时，不会产生自身连接产物-予质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，

14、故混合后加入g连接酶口质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞-汀）将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的犬肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作两惟一碳源的培养基培养受悴细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的细胞因不能利用碳源而死亡，从而达到睛选目的。【答案】乩1高沁I会破坏质粒的抗性基因和外源DXA中的目的基因斗）质粒和含目的基因的外源DH片段自身环化（5DXA连接鉴别和筛选含有目的基因的细胞门蔗糖齿惟一碳源2【解析】选E。為项，过程通过逆转录而获得的目的基因中不含有內含子，而基因组测序测的是全部基因，不能用于基因组测序；E项，从题中

15、可知抗冻能力増强是因蛋白中的11牛氨基酸的重复序列増多，而不是抗冻基因编码区重复来使抗冻能力増强；C项，农杆菌的作用是感染番茄植株而使重组质粒进入受悴细胞，不是用来筛选；D项，基因完全表达包括转录和翻译，检测翻译要用抗原一抗悴杂交，不能用DX為探针技术口【解析】选扎限制性核酸內切酶是用来切割获取抗除草剂基因片段，而非烟草花叶病羞的商扎為错；DH壷连接酶可以将获取的目的基因和:运）载体结合，构建基因表达载体，E正确；将获取的重组DT壷分子导入到烟草受体细胞中，目的基因会在其中表达，使烟草具备抗除草剂的特性，欲筛选出抗除草剂的转基因烟草，可以将烟草敗在含除草剂的培养基中培养，观察其是否能够正常生长

16、，GD正确。7.【解析】考查的知识点为动物细胞培养和基因工程-1）用陕蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，会使组织分散戚单牛细胞口耳启动子应位于目的基因的首端，它是EN壷聚合酶识别和结合的部位，终止子应位于目的基因的尾端，它相当于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停止下来口3PCR反应需要在一定的缓冲械中才能进行，同时还需提供：水、4种脱窜核糖核昔酸、模板DXA.耐热的DT壷聚合酶、引物-4多孔的中空薄壁小玻璃珠有利于空气交换，同时増犬细胞培养的表面积，有皴缓解了接触抑制口答案：1）陕蛋白或胶原蛋白启动子嬢止子（3）对干扰素基因特异的引物对TaqDXA聚合萌讨扩犬细胞贴壁生长的附着面积S.【解析

17、】1）限制酶切割产生两种末端：黏性末端和平末端；用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒得到的两个末端杲相同的活）基因工程检测的右法：检测目的基因是否导入，采用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录，采用分子杂交技术；检测是否形戚蛋白质，采用抗原-抗体杂交技术：3,基因工程的目的是获得稳定遗传的新品种，因此要把目的基因插入到染色体的Dh分子中.对于不同的受体细胞，导入目的基因的方法不同-收子叶植物和裸子植物采用的农杆菌转化法需要将目的基因整合到农杆菌的71质粒的T-DXA上，通过农杆菌感染受体细胞将含有目的基因的T-DXA转移到受体细胞的染色陳DXAa2ECA聚合酶识别和结合的部位Ca-分子杂交

18、技术蛋白质（3）T-DXA染色.悴DNA【解析】本题主要若查基因工程和胚胎工程技术口1）茯取卵母细胞的途径：从活陳输卵管中采集，从已处死的雌鼠卵巢中获取口刁题干中论述：利用正常犬鼠制备遗传性高血压转基因模型犬鼠，所以推测目的基因为与高血压相关的基因，质粒为载体，两者必须用相同的限制性核酸內切酶切割，有相同的黏性末端，才能连接，能被限制性核酸內切酶切剧，是因次具有限制性核酸內切酶的切割位点-为如果检测到相应蛋白质，即可在分子水平进行检测目的基因是否表达，如果检测已患高血压，即可在亍郎水平进行检测目的基因是否表达口4）在上述转基因犬鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是体外受精、早期胚胎培养和

19、胚胎移植答案：卵巢刁目的基因载体同一种限制性核酸內切酶限制性核酸內切酶的切剧位点3）检测到相应蛋白质出现高血压4）体外受精【解析】:从图可看出，只有比M、巨“尺I两种酶能保持抗病基因结构的完整性，所以构建含抗病基因的表达载体為时，应选用限制前Bfl、EcoRI两种前，对抗病基因的D?；気和质粒进行切剧。卩）卡那雷素能抑制香琵愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基爲选已导入抗病基因的香琵细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，以此作为标记基因-为香蕉组织细胞貝有全能性，因此，可農利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株图中、依次表示组织培养过程中香薦组织细胞的脱分化和再分化口答案

20、：&垃I、辽沁1含抗病基因的D負和质粒耳抗卡那霉素基因耳全能性脱分化、再分化刃铀小易莎忍貝11易错起源1、基因工程的工具例1.将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子【审题视角】解答本题需要明确以下几点.：1）理解运载体的来源、结构和特点活）明确限制性核酸内切酶的作用-【精讲精析】选c。具体分析如下：选项内容分析A项正确每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒才能表达出腺苷

21、酸脱氨酶B项正确要让目的基因与质粒形成重组质粒，两者必须用冋种限制性核酸内切酶切割，所以每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C项错质粒作为（运）载体的条件之一是有多种限制性核酸内切酶的识别误位点，但每种限制性核酸内切酶只有一个识别位点，只能插入一个目的基因(ada)D项正ada导入大肠杆菌成功的标志是表达腺苷酸脱氨酶，因此每个插确入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子心占师点励211.有关酶的比较项目限制(性核酸内切)酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用特占八、切割目的基因及载体，

22、能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上将DNA两条链之间的氢键打开作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子2.载体作用作为运载工具，将目的基因转移到受体细胞内利用它在受体细胞内实现目的基因的大量复制具备的条件能在受体细胞内稳定保存并大量复制有多个限制酶切割位点，以便与外源基因连接具有特殊的标记基因，以便讲行筛选种类质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之夕卜，并

23、能够自我复制的小的双链环状DNA分子久噬菌体的衍生物动植物病毒心妙汛勲竝剧駆11限制酶的应用特点在获取目的基因和切割载体时最好用同一种限制酶，以获得相同的黏性末端。为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接，可用不同的限制酶处理目的基因和载体。载体的两点说明一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外，这样才能保证标记基因的完整性，有利于对目的基因的检测。易错起源2、基因工程的操作程序例2.肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将l

24、et-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。T基因RASSH描丽工转利加工miRNA赢*(无制译/功即YewidwuhiiJxMTTTmi略抑4蛋白B2IMiHIRASmRNA翻译请回答：进行过程时，需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。进行过程时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中

25、(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。【审題视角】解答本题的关键是：1)注意目的基因和载体需用同一种限制性核酸內切酶切割n刁注意题干信息基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的増殖受到抑制，由此推出肺癌细胞増殖受到抑制的原因是亦基因翻译抑制口【解析】1)基因工程中目的基因和载陳需要同一种限制性核酸內切酶切割产生相同的黏性末端，使目的基因与载体结合，载体中与EN壷聚合酶识别和结合的部位是启动子口订)原代培养产生的细胞需用胰蛋白酶处理，分散成单个细胞口卩)检测目的基因是否转录需提取受体细胞中的Z进行分子杂交；由图2可知7-7基因翻译抑制则不能产生RAS蛋白，因此RAS蛋白减少，肺癌细胞的増

26、殖就受到抑制口答案：1)限制性核酸內切或限制)启动子汉;胰蛋白:；3)RXARAS蛋白匕纽帀盒酣11目的基因的获取方法(1)从基因文库中获取；利用PCR技术扩增目的基因;人工合成，常用的方法是反转录法和化学合成法。基因表达载体的构建目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并可以遗传给下代，并使目的基因能够表达和发挥作用。3.将目的基因导入受体细胞的方法植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法(或Ca2+处理法)受体细胞体细胞或受精卵受精卵原核细胞转化过程目的基因插入Ti质粒的T-DNA上-进入农杆菌f导入植物细胞一稳定维持和表达目的基因表达载

27、体提纯f取受精卵f显微注射f受精卵移植f新性状动物首先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，使细胞壁的通透性增大，细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程4.目的基因的检测和鉴定基因工程操作过程中发生碱基互补配对的步骤(1)获取目的基因和同种限制酶处理载体：得到的黏性末端碱基互补；(2)构建基因表达载体：目的基因的黏性末端与载体的黏性末端互补；(3)表达检测DNA-DNA、DNA-RNA杂交时，遵循碱基互补配对原则。原核细胞、真核细胞基因结构的异同相同点：都有编码区、非编码区，在非

28、编码区都有调控遗传信息表达的核苷酸序列，在编码区上游均有与RNA聚合酶结合的位点。不同点：原核细胞的基因结构简单，编码区连续；真核细胞的基因结构复杂，编码区间隔，不连续。操作的注意问题获取目的基因时要保证其完整性。质粒的切割要保证标记基因的完整性。易错起源3、基因工程的原理和操作程序例3.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、G(GATCC、(GATC、CCCGGG。请回答下列问题:tttirrnrr_一rrrrni

29、GGAFCCOCTGGGCCCGGGGGATCC(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为。若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中共有种不同长度的DNA片段。若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可

30、能的原因是。【解题指南】解答本题的关键是：1）准确识别各种限制酶的切剧位点刁重组质粒中最少含有一种抗性基因口【解析】1）两条脱氧核昔酸琏之间的碱基通过氢键相连，一条脱氧核昔酸琏之间的碱基通过脱氧核糖-磷醍-脱氧核糖连接-2）根据限制酶沁I识别的碱基序列可知，限制酶沁I切割产生的末端为平末端，在图1序列中共有2个竝I的切割位点，切剧后形戚种不同长度的产物，分别537bp.790bp.561bpo图1中有讼I的两个识别序列，完全切割后产生3个不同长度的DXA片段，若虑框中的碱基被T-A替换，则产生丄个DNA片段，其中1个DNA片段与上次切剧的相同，因此经完全切剧后共产主4种不同长度的D?；為片段-

31、旳切割目的基因可选用限制酶百颐日I和限帘IBSMbaI,f旦限制酶MbaI可将质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因都破坏，而限制酶百鄭旧I只破坏抗生素A抗性基因，因此只能选用限制酶珈HI；重组质粒中含有抗生素E抗性基因，因此可在含抗生素B的培养基上培养口【答案】:脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖平537bp.曲01?a661bp4讨斶紳旧I抗生素B同种限制酶切割舷戚的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接K易愛嗨必口阴险1下列关于基因工程中有关酶的叙述不正确的是（）限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNADNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNA

32、逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA用某人的胰岛素基因制成的DNA探针检测下列物质，能形成杂交分子的是（）该人胰岛A细胞中的DNA该人胰岛B细胞中的mRNA该人胰岛A细胞中的mRNA该人肝细胞中的DNATOC o 1-5 h zB.D.据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是（）为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶I、II同时切割二者限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键与启动子结合的应该是RNA聚合酶能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系

33、基因工程是蛋白质工程的基础蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得高水平的表达，长成的植物通体光亮，堪称奇迹。下列有关发光烟草培育的叙述正确的是()在培育过程中需用同一种限制酶分别切割荧光素基因和质粒将目的基因直接导入烟草细胞常用的方法是显微注射法受体细胞只能用烟草的受精卵，因为受精卵的全能性最大导入目的基因的烟草细胞不需进行植物组织培养就能发育成一个完整的植株基因芯片技术是近几年发展起来的新技术，将待测DNA分子用放射性同位素或荧光物质标记，如果能与芯片上的单链DNA探针配对，它们就会结合起来

34、，并出现“反应信号”。下列说法中不正确的是()基因芯片的工作原理是碱基互补配对待测的DNA分子首先要解旋变为单链，才可用基因芯片测序“反应信号”是由待测DNA分子与基因芯片上的放射性探针结合产生的由于基因芯片技术可以检测待测DNA分子，因而具有广泛的应用前景有人认为转基因生物有可能成为入侵的外来物种，威胁生态系统中其他生物的存在其依据是()第 页共24页第i9页共24页转入的外源基因有可能与感染转基因生物的某些细菌杂交，形成新的病原体转基因植物的抗除草剂基因，有可能通过花粉传播而进入杂草中，使杂草成为超级杂草科学家赋予了转基因生物某些特殊性，增强了它们在该地区生存条件下的竞争能力转基因植物花粉

35、传播的距离有限，只能在种植区以内繁殖chiL基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失chiL基因的变异株细胞。技术路线如下图所示，对此描述错误的是()chiL基因的基本组成单位是脱氧核苷酸过程中使用限制酶的作用是将DNA分子的磷酸二酯键打开过程都要使用DNA聚合酶若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列有关叙述不正确的是()通常用小鼠受精卵作为受体细胞通常用显微注射法将含有人生长激素基因的表达载体导入受体细胞采用DNA分子杂交技术可以检测人的生长激素

36、基因是否表达构建含有人生长激素基因的表达载体需要用到DNA连接酶如同发明炸药时没有想把炸药用于人类互相残杀的战争一样，科学家在创造DNA重组技术时，也不是为了用于战争，但却无法抵挡新技术在军事方面的运用，生物武器就这样悄然出现了。下列关于生物武器的说法错误的是()生物武器难以检测，杀伤时可能并不会被马上察觉生物武器没有明确的标识，潜在危害大依靠科学力量和人类的文明合作，生物武器也会受到限制生物武器适应能力强，不受气候影响人外周血单核细胞能合成白介素2(IL2)。该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得

37、具有IL2生理功能、且不易降解的IL2HSA融合蛋白。其技术流程如下图。请回答：人外周血单核细胞z启动丞cDNAPCE?JiEcoRIBelII*JL-2cDNA_1mRNA尹点a_Jm丽启动参乂lHSAS因粵止子合基因無止子培养人外周血单核细胞的适宜温度为C；图中表示过程。表达载体1中的位点应为限制酶Bglll的识别位点，才能成功构建表达载体2。表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的mRNA中，与IL2蛋白对应的碱基序列不能含有(起始、终止)密码子，才能成功表达出IL2HSA融合蛋白。应用杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL2HSA融合蛋白。12普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细

38、胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家们通过基因工程技术，培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种，操作流程如下图。请据图回答：(1)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞采用最多的方法是，筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的的表达。为促使图中、过程的顺利完成，需要条件下进行。要快速繁殖转基因抗软化番茄植株，目前常用的科技方法是。为获得这种番茄的脱毒苗，应用其进行培养。除了图示培育方法外，还可通过蛋白质工程技术，对的结构进行特定的改变，从而获得抗软化的番茄品种，关键的操作是对进行定向改造。为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给

39、其他植物而造成基因污染，可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄植物细胞的(结构)中。13我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白(S蛋白质，对应的基因为S基因)，回答下列问题。(1)在这项技术中，S基因属于。用处理S基因和运载体，并用使之结合，这里的DNA片段两两结合的产物有种，除了S基因，构建好的表达载体还应具有等结构。将表达载体导入到哺乳动物细胞，筛选得到工程细胞。使用合成培养基培养工程细胞时，通常需要加入等天然成分。工程细胞在生长过程中有现象，需要定期使用酶处理，以便于分瓶继续培养，在培养过程中，定期收集培养液，分离纯化即可得到所需产品。由于哺乳动

40、物细胞娇嫩挑剔，培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，从饲养的转基因动物分泌的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，构建表达载体时需要将S基因与等调控组件重组在一起，并将表达载体通过的方式，导入到哺乳动物的中(填细胞名称)。人的肠道具有独立的黏膜免疫系统，这使得口服疫苗成为可能，但有效的口服疫苗必须要在到达肠道的过程中躲避胃酸和蛋白酶的降解，否则就会失效。如果要生产口服的乙肝疫苗，理想的受体是植物细胞，理由是可食的转基因的植物疫苗的优点有(至少答出两点)：解析：选CD負聚合酶只能从引物末端延伸Dh而不能延伸RX為；限制酶水解相邻核昔酸间的化学键打断DXA；DNA连接酶可将末

41、端碱基互补的两个DXA片段连接口解析：选C瞋岛素基因探针的碱基摊列顺序与底岛素基因中的一条琏相同，因此可以与胰哥素基因、胰岛素基因转录形戚的皿商壷形成杂交分子；底岛素基因存在于所有的体细胞中，但是该基因只在BSB细胞中表达-解析：选D将质粒与目的基因进行切剧、连接时，不能保证二者全部戚功连接-因此，导入了原质粒的受体细胞中能检测到标记基因的表达产輒f旦是不一定会检测到目的基因的表达产物解析：选C蛋白质工程的过程是：预期蛋白质功能-设计预期蛋白质结构-推测应有的氨基酸序列-找到相对应的脱氧複昔战序列-合成DXA-表达出蛋白质，所以实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系；蛋白质工程是

42、在基因工程上延伸出的第二代基因工程，蛋白质工程是在基因水平上改造蛋白质口解析：选為在转基因植物的培育过程中，不能将目的基因直接导入到受体细胞中，必须先让目的基因与运载体结合，此时要用同种限制酶切剧，以形戚相同的黏性末端，便于二者连接-以植物细胞作受体细胞时，可以用体细胞，也可農用受精卵，导入的方法一般为农杆菌转化法，显徴注射法用于动物细胞-导入目的基因的受体细胞需经植物组织培养才能发育戚一个新个体-5.解析：选C特测D直分子具有飲射性同位素与芯片上的单DXA探针配对产生“反应信号-7.解析：选C外来物种入侵一股是由于该生物在适宜的环境和缺乏天敌的情况下能够犬量鑒殖，并且对当地的生物多样性产生了彫响-转基因生物往往是改良的品种，因而貝有较强的适应能力，很可