课时跟踪检测二基因工程的基本操作程序

1、课时跟踪检测（二） 的基本操作程序基因工程课时跟踪检测（二）基因工程的基本操作程序（满分50分时间25分钟）一、选择题（每小题2分，共20分）1.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A.目的基因和受体细胞均可来自动植物或 微生物B.限制酶和DNA连接酶都能识别特定的碱基序列，是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原具有生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达解析：选A 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；基因工程中常用的工具酶有 限制酶和DNA连接酶，前者能识别特定的碱基 序列；大肠杆菌为原核生物，不含有内质网和高 尔基体等细胞

2、器，不能对蛋白质进行加工，其合成的胰岛素原无生物活性；载体中的抗性基 因为标记基因，其作用是有利于筛选含重组 DNA的细胞，不能促进目的基因的表达。.下列用于判断目的基因是否转移成功的 方法中，不属于分子检测的是（）A.通过害虫吃棉叶看其是否死亡B.转基因生物基因组DNA与DNA探针能 否形成杂交带C.转基因生物中提取的 mRNA与DNA探 针能否形成杂交带D.转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体 形成杂交带解析：选A分子水平的检测包括三个方 面：通过DNA分子杂交检测目的基因是否插入 受体细胞染色体的DNA上；通过RNA与DNA 杂交，检测目的基因是否转录；通过抗原一抗体 杂交，检测目的基因是

3、否翻译。通过害虫吃棉叶 看其是否死亡，属于个体生物学水平的检测。.下列关于PCR技术的叙述，正确的是()A. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列 完全已知的基础上B.该技术需要解旋酶和热稳定的 DNA聚 合酶C.该技术需要一对特异性的引物，要求一 对引物的序列是互补的D.该技术应用体内DNA双链复制原理， 也需要模板、原料、能量、酶等条件解析：选D PCR技术扩增的目的基因序 列不一定是已知的，A错误；PCR技术是通过 高温来使DNA解旋的，不需要解旋酶，B错误; 该技术需要的一对引物，分别能与模板 DNA的 两条链的末端碱基配对，其序列不是互补的，C错误。4,下列关于基因表达载体的叙述，错

4、误的是()A.基因表达载体的构建是基因工程的核心B.其上的启动子和终止子都是有特殊结构 的DNA片段一般用抗生素抗性基因作为标记基因D.虽然基因工程中的受体细胞有所不同， 但构建的基因表达载体都是一样的解析：选D由于受体细胞有植物、动物、 微生物之分，目的基因导入受体细胞的方法不 同，所以，表达载体的构建也有所差别5.右图是基因工程中基因表达载体的模式图，若结构 X是表达载体所必需的，则X最可能是（）A.荧光蛋白基因B.启动子C.限制酶DNA连接酶解析：选B 一个完整的基因表达载体应包 括启动子、终止子、目的基因和标记基因。.下列关于基因表达载体导入微生物细胞 的叙述中，错误的是（）A.常用原

5、核生物作为受体细胞，是因为原 核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较 少B.受体细胞所处的一种能吸收周围环境中 DNA分子的生理状态称为感受态C.感受态细胞吸收 DNA分子需要适宜的 温度和酸碱度D.感受态细胞吸收重组表达载体 DNA分 子的液体只要调节为适宜的pH即可，没必要用 缓冲液解析：选D将基因表达载体导入微生物细 胞时，需在一定条件（如适宜的温度、pH等）下, 将基因表达载体和感受态的微生物细胞混合培 养，在培养过程中，可能会影响pH的变化，因 此要加入缓冲液，以保持适宜的 pH。.利用基因工程技术生产竣酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是()A .过程需使用

6、DNA聚合酶.过程需使用解旋酶和 PCR获取目的 基因C.过程使用的感受态细胞可用 NaCl溶 液制备D.过程可利用DNA分子杂交鉴定目的 基因是否已导入受体细胞解析：选D 过程是逆转录过程，需要逆 转录酶催化；从cDNA文库中获取所需要的目的 基因，根据基因的核甘酸序列、基因的功能、基 因在染色体上的位置或基因翻译产物蛋白质等 特性来获取，不需要用解旋酶，也不需要 PCR; 用CaCl2溶液处理大肠杆菌，可使其成为感受态 细胞；鉴别目的基因是否导入受体细胞可利用 DNA分子杂交技术。.以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法错误的是 （）A.甲方法可建立该细菌的基因组文

7、库B.乙方法可建立该细菌的 cDNA文库C.甲方法要以脱氧核甘酸为原料D.乙方法需要逆转录酶参与解析：选C 甲方法是从细菌的DNA中直 接提取，故可以建立该细菌的基因组文库；乙方 法是由信使RNA逆转录得到的目的基因，故可 以建立该细菌的cDNA文库。甲方法只要利用 DNA限制性核酸内切酶将其原有的 DNA切断 即可，不需要以脱氧核甘酸为原料。乙方法需要 逆转录酶参与，并且以脱氧核甘酸为原料。纲织酢的分腐相美询海 获得；1小AmKNA niRMA- 将目的基因导入受体细胞、O(2)A过程需要的酶有 和O(3)要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须 用 处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为态；然后将

8、在缓冲液中混合培养完成转化过程。(4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉 花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生 植株要经过 C和E。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在 C过程的培 养基中加入。(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性 基因的传递符合孟德尔遗传规律。将转基因植第17页株与杂交,其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1: 1。若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与 卡那霉素敏感型的数量比为。解析：（1）基因工程的基本操作程序主要包括 四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构 建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测 与鉴定。（2）基因表达载体的构建过程中，需要用 同种限制酶切割目的基因和载体，使它们产生相 同的黏性末端，再用DNA连接酶把这两个DNA 片段连接起来。（3）农杆菌转化法导入目的基因 时，首先必须用 Ca2+处理土壤农杆菌，使土壤 农杆菌转变为感受态；然后将重组质粒和感受态 细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。（4）植物 组织培养过程的关键步骤是脱分化和再分化。因 为只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那 霉素培养基上生长，故若要确保再生植株中含有 抗虫基因，可在C过程的培养基中加入卡那霉第18页 素。(5)转基因植株相当于杂合子，与非转基因植 株杂