三细菌的革兰氏染色及芽孢染色法-课件

1、1细菌的革兰氏染色法 2知识回顾1.什么是微生物？2.细菌简单染色及其操作步骤？细菌的革兰氏染色法 3引导探索细菌的革兰氏染色法 41. 革兰氏染色的基本原理2.革兰氏染色所需要的材料和器材3.革兰氏染色的操作方法及步骤4.革兰氏染色结果分析5. 小结学习内容细菌的革兰氏染色法 51.能够说出革兰氏染色的基本原理。2.能够描述出革兰氏染色法的操作步骤及注意事项。3. 能够熟练规范的对细菌进行革兰氏染色。通过本节课学习，学生能够达到以下目标：学习目标细菌的革兰氏染色法 6 1.革兰氏染色法 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立的。细菌先经碱性染料结晶紫染色，而经碘液媒染后，用

2、酒精脱色，复染后可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。染色的基本原理细菌的革兰氏染色法 初染媒染脱色复染72.革兰氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较染色的基本原理细菌的革兰氏染色法 肽聚糖81.材料 培养12-16h枯草杆菌（Bacillus subtilis） 培养16h大肠杆菌（Escherichia coli）2.染色液和试剂 草酸铵结晶紫、碘液、95%乙醇、蕃红、二甲苯、香柏油3.器材 载玻片、接种环、酒精灯、废液缸、洗瓶、擦镜纸、显微镜等需要的材料及器材细菌的革兰氏染色法 9涂片干燥固定初染水洗媒染水洗脱色水洗 复染水洗干燥观察

3、实验步骤细菌的革兰氏染色法 10实验方法及步骤-涂片、干燥、固定菌悬液涂片干燥滴加无菌水固定取菌苔涂片 固定的目的： 1.使细胞质凝固，以固定细胞形态； 2.并使菌体牢固地附着在载玻片上。细菌的革兰氏染色法 11革兰氏染色步骤-染色碘液媒染1min脱色2030s草酸铵结晶紫染色1-2min媒染目的是提高染料和菌体细胞的结合程度，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物脱色后使革兰氏阴性菌变为无色 细菌的革兰氏染色法 12蕃红复染 12min复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，从而将细胞区分成G+和G-两大类群革兰氏染色步骤-复染细菌的革兰氏

4、染色法 13紫色革兰阳性菌 红色革兰阴性菌革兰染色结果细菌的革兰氏染色法 14思考讨论：细菌革兰氏染色的意义？ 1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关151.本实验获得成功的关键？ 1）革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。 如脱色过度，会染成阴性菌；如脱色时间过短，染成假阳性菌。 2）在涂片时不可过厚，否则在染色脱色时，都不易均匀。 3）固定时烘烤要适度，太轻会冲走细菌，过度会破坏细菌形态。 4）在镜检时，以分散开的菌体的革兰氏染色反应为准。 5）选用幼龄的细菌。2.革兰氏染色会迅速将细菌分为革兰氏阳性和阴性，是很重要的染色方法。小结细菌的革兰氏染色法 16课堂检测1.细菌革兰氏染色的步骤包括：涂片、_ 、 _ 、 _ 、 _ 、 _ 、 _ 和镜检。2.革兰氏阳性菌呈 _ 色，革兰氏阴性菌呈红色。3.细菌染色多采用 _ 染料4.革兰氏染色的关键步骤是（） A 脱色B 媒染C 复染D 固定5.当对未知菌进行革